猪流行性乙型脑炎的诊断与预防

【目的】探讨猪流行性乙脑(又名“日本乙型脑炎”)的防治策略,为猪场疫病防控提供借鉴和参考,以保障猪场稳定生产。【方法】基于对猪流行性乙型脑炎的全面分析,总结其流行病学特征:妊娠母猪感染乙脑会表现流产或早产,新生仔猪可能表现出全身性痉挛,公猪在高热后会出现睾丸肿胀。提出其主要的诊断方法是通过细菌学和病毒学检测进行确定。【结果】猪流行性乙脑的治疗措施主要为康复猪血清或抗血清的应用、加强饲养管理、降低颅内压、利尿解毒和使用免疫增强剂等。【结论】作为一种严重的人畜共患传染病,猪流行性乙脑在亚洲各国包括中国的部分地区广泛存在。为有效控制猪流行性乙脑的传播,猪场需加强对其病原学特点和传播方式的认识,采取免疫接种、灭蚊和做好人员防护等措施进行综合防控。

猪流行性乙型脑炎的诊断与防治

猪流行性乙型脑炎又名日本乙型脑炎,简称为猪乙型脑炎,是一种人与动物共患的急性传染性疾病,特点是对牲畜和人类的中枢神经系统造成损害。怀孕母猪会因为受到传染而流产,生产木乃伊胎或死胎,种公猪会产生睾丸炎,育肥阶段的猪群感染病毒之后会出现高烧不退,仔猪则会出现脑炎症状。虽然该种疾病死亡率很小,但是会使怀孕母猪生产性能下降,降低经济价值,对我国生猪产业的发展产生不利影响。

猪流行性乙型脑炎的防控措施

猪流行性乙型脑炎主要发生于每年的6~9月份蚊虫活动频繁的季节,对我国养猪业的危害很大。本文分析了猪流行性乙型脑炎的流行病学及临诊症状,深入探讨了猪流行性乙型脑炎的防控措施。

关注猪流行性乙型脑炎

猪流行性乙型脑炎(Swine epidemic encephalitis B)是由流行性乙型脑炎病毒引起的一种人、畜共患传染病。猪感染后表现为高热、流产、产死胎及公猪睾丸炎。本病由蚊虫传播,常于夏末初秋流行,有明显的季节性。

猪乙型脑炎的科学防控

猪乙型脑炎是生猪养殖过程中常见病毒传染性疾病,主要原因是感染乙脑病毒所致。此类传染病能够在人畜之间进行传播,呈现全球流行性。生猪感染后会严重影响其生产性能,且会形成长久繁殖障碍,对于养殖场的健康发展和经济收益均有一定影响。从生猪繁殖性能来看,母猪感染病菌后,多以流产和死胎为主要症状,公猪则主要以睾丸肿胀为主,进而影响生殖能力。

hs-CRP、PCT、IL-6、CSF及头颅MRI+DWI+Flair检查对流行性乙型脑炎诊断价值的研究

目的探究超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)、白介素-6(IL-6)、脑脊液(CSF)及头颅磁共振成像+弥散加权成像+水抑制成像(MRI+DWI+Flair)检查对流行性乙型脑炎的诊断价值。方法选择2016年1月至2021年12月就诊于天水市第一人民医院神经内一科的流行性乙型脑炎患者50例,病毒性脑炎患者50例,通过对两组患者血常规、hs-CRP、PCT、IL-6、CSF、头颅MRI+DWI+Flair对比研究,明确上述指标对流行性乙型脑炎的诊断价值。结果流行性乙型脑炎患者和病毒性脑炎患者的血常规白细胞数目、中性粒细胞数目、淋巴细胞数目比较,差异有统计学意义(P<0.05),hs-CRP、PCT、IL-6、CSF结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。头颅MRI+DWI+Flair检查提示流行性乙型脑炎病灶以中线受累为著,丘脑、脑干、颞叶、海马受累多见,基底节、侧脑室次之。丘脑、海马、脑干、侧脑室旁病灶在流行性乙型脑炎与病毒性脑炎中差异有统计学意义(P<0.05)。结论血常规、hs-CRP、IL-6、PCT、CSF可作为筛查中枢神经系统感染的指标,头颅MRI+DWI+Flair检查是诊断流行性乙型脑炎的特异性指标,根据其特殊的受累部位,结合其T2、DWI、Flair、ADC图可进一步明确病灶性质,对疑诊患者尽早行头颅影像学评估,可尽早明确诊断,早治疗,最大程度改善患者预后。

猪乙型脑炎的科学防控

近年来,随着养殖业的快速发展,养猪业也得到了较快的发展。但同时生猪生产中存在着一些问题,如疫病频发、仔猪成活率低、饲料利用率低等,这些都直接影响到养猪事业的健康发展。其中猪乙型脑炎在当地造成较大的影响,相关技术人员需要给予一定重视,并采取有效的方法做好诊断分析与防治工作。

猪乙型脑炎的科学防控

乙型脑炎一种在生猪养殖过程中较为常见的急性传染病,主要由猪流行性乙型脑炎病毒引发,该病具有高致死率、快速传播以及强大的传染性等特点,一旦发病不仅给养猪业造成严重的经济损失,同时也对养殖人员的健康和公共卫生安全构成严重威胁。因此对猪乙型脑炎的病原特性、临床症状以及防控措施进行深入探讨,对于促进养猪业的健康发展具有重要现实意义。

5例流行性乙型脑炎儿童继发自身免疫性脑炎的临床分析

目的探讨儿童流行性乙型脑炎(epidemicencephalitisB,EEB)继发自身免疫性脑炎(autoimmune encephalitis,AE)的临床特征。方法 回顾性分析2020年1月-2022年6月在郑州大学附属儿童医院住院治疗的5例“双相病程”EEB患儿的临床资料。结果 5例患儿,男3例,女2例;中位发病年龄为7岁(范围:3岁9个月至12岁),EEB发病至AE症状出现中位间隔时间为32 (范围:25~37) d。AE期主要症状为运动障碍(5/5)、低热(4/5)、精神行为异常(4/5)、抽搐(2/5)、意识障碍加重(2/5)、肢体无力(1/5)。与EEB急性期头颅磁共振成像结果相比,AE期病灶扩大3例,无变化2例。AE期4例抗N-甲基-D-天冬氨酸受体抗体阳性,其中1例合并抗γ-氨基丁酸B型受体抗体阳性;1例AE抗体均阴性。5例患儿AE期免疫治疗均有效,随访3个月,1例基本恢复正常,4例遗留神经功能障碍。结论 EEB可诱发AE,以抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎最常见,AE期症状与经典抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎类似,免疫治疗有效,预后可能与EEB期神经功能障碍有关。

猪伪狂犬病、猪细小病毒病和猪流行性乙型脑炎检测基因芯片的制备及检测方法研究

对猪伪狂犬病(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒病(Porcine parvovirus,PPV)和猪流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis virus,JEV)检测基因芯片的制备及该芯片的检测方法进行了研究。试验克隆和鉴定了16个芯片靶基因,经筛选,取其中13个靶基因PRV gB、gG、TK和gE;PPV NS2、NS3、VP1和VP2以及JEV C、PrM/M、E、NS1和NS5制备PRV、PPV和JEV检测基因芯片,基因芯片点样系统SpotArrayTM 24将靶基因点样于氨基化玻片表面,靶基因最佳点样浓度为200 ng/μL,探针扩增标记反应体系中,Cy3-dCTP使用终浓度为2.5μmol/L,芯片杂交温度可在44℃～60℃之间任意选择。以PRRSV、CSFV、PCV1、PCV2、TGEV、HPS、PAP、E.coli和S.pp菌毒株DNA或CDNA为模板标记制备的探针均不与PRV、PPV、和JEV检测基因芯片杂交,芯片检测的灵敏度为3 pg/μL,芯片批间重复性好,同一张芯片可进行至少10次的重复杂交。该方法对8株PRV、5株PPV和JEV SA14-14-2单独或混合样品检测均为阳性,可区分伪狂犬病病毒野毒和基因缺失疫苗毒,对20份临床样品单独或混合感染的检出率分别为:单独感染PRV检出率15%(3/20),PPV 5%(1/20),JEV 0%(0/20);PRV和PPV混合感染检出率15%(3/20),PRV和JEV混合感染检出率5%(1/20),JEV和PPV混合感染检出率5%(1/20),三者混合感染的检出率5%(1/20)。与PRV、PPV和JEV多重PCR检测方法比较,芯片检测的灵敏度大大提高,同时可区分PRV野毒和基因缺失疫苗毒,对20份临床样品的检出率一致。

流行性乙型脑炎病毒(JEV)全长感染性克隆的制备及恢复病毒的获得

根据JEV病毒减毒株SA14-14-2基因组序列,设计覆盖全长的4对重叠引物,以提取的活疫苗病毒RNA为模板,RT-PCR扩增出4个片段,并克隆到质粒载体中,进一步构建两个半端分子克隆,然后将全长cDNA序列克隆到一个新改造的低拷贝质粒载体pBR-kpn中,构建我国流行性乙型脑炎病毒(JEV)基因组全长cDNA克隆。经过体外转录后得到的转录子转染BHK-21细胞,重新获得JEV的恢复病毒,通过生物学特性、分子生物学水平、蛋白水平等几个方面对恢复病毒进行鉴定。结果获得了稳定的全长cDNA克隆,转录子转染BHK-21细胞后,第4天开始出现细胞病变(CPE),第6～7天时CPE为 ,经过Vero细胞进一步放大培养后,间接免疫荧光实验和RT-PCR实验均为阳性。证实了构建的JEV的全长cDNA克隆有感染性,为进一步的研究奠定了基础。

开江县2002-2006年猪流行性乙型脑炎病毒感染监测

目的探讨开江县猪流行性乙型脑炎（乙脑）病毒感染强度和感染时间分布，为乙脑防制提供科学依据。方法2002-2006年6—7月上、中、下旬在开江县新宁镇肉联厂采集本地8月龄的屠宰猪血清，采用酶联免疫法（ELISA）进行乙脑抗体IgG检测，阳性计为感染猪。结果5年共采集猪血清592份，乙脑抗体阳性194份，阳性率为32．77％。2002-2006年抗体阳性率分别为43．41％、24．17％、26．89％、4．62％及75．53％，之间差异有统计学意义（X^2=137．32，P〈0．01），感染高峰时间2002-2005年在7月中、下旬，2006年在6月中旬，比前4年早30-40d。结论根据2002-2006年猪乙脑病毒感染率和感染高峰时间，可以预测人间乙脑流行强度和发病高峰时间。由此，可早期做好乙脑防制措施，控制其发病和流行。

三种ELISA试剂盒检测猪流行性乙型脑炎病毒血清IgG抗体比较

目的比较国内常用商品化ELISA试剂盒检测猪流行性乙型脑炎病毒血清IgG抗体的诊断效果。方法选用3种猪乙脑病毒血清IgG抗体ELISA检测试剂盒(Keqian,Lvshiyuan,Tianchen),以微量中和试验为金标准,对90份猪血清进行检测分析。结果中和试验的阳性检出率为34.4%(31/90),Keqian,Lvshiyuan和Tianchen阳性检出率分别为50.0%(45/90),47.8%(43/90)和38.9%(35/90)。灵敏度最高的是Keqian,为90.32%,但其特异度只有71.19%;Tianchen的灵敏度和特异度分别为83.87%和79.66%;Lvshiyuan的灵敏度和特异度分别仅为41.94%和16.95%。与中和试验比较,Tianchen试剂盒的κ系数最高为0.63,其次是Keqian为0.57,Lvshiyuan仅为0.04。显示3种试剂盒具稳定性。结论目前国内商品化猪乙脑病毒血清IgG抗体ELISA检测试剂盒诊断结果差异较大,与中和试验相比存在较高的假阴性,质量有待提高。

伪狂犬病病毒、猪细小病毒和流行性乙型脑炎病毒检测基因芯片的制备

对伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和流行性乙型脑炎病毒(JEV)检测基因芯片的制备及该芯片的检测技术进行了研究。选定靶基因最佳点样质量浓度为200 mg/L,用基因芯片点样仪将其点制在氨基化基片上,经干燥、水合、紫外线交联和洗涤后,成功制备了PRV-PPV-JEV检测基因芯片。以CY3荧光素标记的dCTP经PCR扩增制备探针,对芯片的质量进行了评价。结果表明,制备的芯片质量好,探针最佳使用质量浓度为3 000μg/L,芯片系统检测灵敏度可达3μg/L。该芯片可同时检测PRV、PPV和JEV,其灵敏度高、特异性强,芯片可重复使用,室温下至少可保存4个月。

猪流行性乙型脑炎病毒种猪精液分离株的鉴定及进化分析

利用RT-PCR技术对河南省某规模化猪场乙脑疑似病例的种猪精液进行分析,从部分样本中扩增出与流行性乙型脑炎病毒(JEV)M基因和E基因具有高度同源性的预期产物。在3日龄乳鼠脑内接种种猪精液上清,10 d左右即出现典型神经症状,并且病死鼠脑组织RT-PCR结果均为阳性。用病死鼠脑组织研磨上清接种BHK-21细胞,感染60 h后用JEV单抗进行间接免疫荧光鉴定均为阳性,这表明分离毒株均为JEV流行毒株,分别命名为BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3。对新分离毒株进行体外细胞培养,BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3连续传代3次后病毒量均获得明显增加,最高分别可达104.5±0.1TCID50/mL和104.2±0.2TCID50/mL。用生物学软件MEGA 4.0分别构建JEV基因的系统进化树,发现BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3处于同一进化分支,均属于基因Ⅲ型。

猪流行性乙型脑炎的血清学调查

为调查贵州省猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)的隐性感染率和使用疫苗后的血清抗体水平,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对贵州省规模化养猪场和农村散养户共764头份猪血清样本进行了JEV抗体水平检测。结果表明,未免疫猪群JEV的血清抗体阳性率为13.25%;而免疫猪群中JEV的血清抗体阳性率为82.18%;表明JEV的免疫效果比较理想,但未免疫猪群存在JEV感染,应引起重视。

猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法的建立与初步应用

[目的]建立1种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。[方法]根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化。[结果]该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5 pg;特异性试验表明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应。与RT-Nested-PCR相比,2种方法检出率的符合率为90.9%。反应结束后可以通过添加化学发光剂进行可视化观察,大大缩短了检测时间。该方法无需特殊仪器,只需在水浴锅中进行,是一种适于基层的简便、灵敏、快速的猪JE的检测方法。[结论]成功建立了猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法,并在临床上进行了初步应用。

猪流行性乙型脑炎的诊断与防制

猪乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的一种动物和人共患的蚊媒病毒性疾病。该病不仅给人类健康带来巨大威胁,也给作为农业支柱产业的畜牧业造成巨大的经济损失。本文主要从乙型脑炎流行病学特点、发病后引起的临床症状、病理变化特征及其诊断方法和防制措施方面进行阐述总结。