猪源乳杆菌对大肠杆菌抑制效果的研究

本试验进行了猪源乳杆菌对常见致病性大肠杆菌K88的体外抑制试验。结果表明:分自健康仔猪肠道的6株乳杆菌培养物上清液,对致病性大肠杆菌K88均有较强的抑制作用,证明6株乳杆菌能产生抑菌素,为研究与开发抗仔猪大肠杆菌病的微生态制剂奠定了基础。

猪源黏膜乳杆菌和色氨酸调节幼龄小鼠胃肠免疫稳态与功能发育的机制

本试验旨在研究猪源黏膜乳杆菌(Limosilactobacillus mucosae)与色氨酸单独或联合处理调节幼龄小鼠胃肠5-羟色胺受体(HTR)与免疫功能发育的规律与机制。试验选取32只3周龄雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、色氨酸组、黏膜乳杆菌组和黏膜乳杆菌+色氨酸组,每组8个重复,每个重复1只。黏膜乳杆菌组和黏膜乳杆菌+色氨酸组小鼠每隔1 d灌胃100μL/(只·d)的黏膜乳杆菌活菌悬液(1×10^(8) CFU/mL),其余组灌胃等量磷酸盐缓冲液;色氨酸组和黏膜乳杆菌+色氨酸组小鼠通过饮水添加0.15 mg/(g BW·d)的色氨酸(0.5 mg/mL色氨酸饮水),其余组饮水中添加0.44 mg/mL的丙氨酸作为等氮处理。试验期14 d。结果表明:1)黏膜乳杆菌+色氨酸处理2周后,可显著提高小鼠体重和小肠长度(P<0.05);2)黏膜乳杆菌或与色氨酸联用可调节胃肠5-羟色胺(5-HT)代谢稳态,并差异化调节HTR在胃肠的表达,显著上调HTR4和HTR7在胃中的表达(P<0.05);3)黏膜乳杆菌或与色氨酸联用可促进胃和空肠中M2型巨噬细胞的极化、上调Wnt3a表达并差异化调节转化生长因子-β(TGF-β)亚型在胃肠的表达;4)黏膜乳杆菌或与色氨酸联用可显著提高结肠中吲哚浓度(P<0.05),但显著降低小肠和结肠中5-HT浓度(P<0.05)。以上结果表明,猪源黏膜乳杆菌和色氨酸联合使用可通过调节胃肠5-HT代谢与HTR的表达、上调M2型巨噬细胞极化和胃肠TGF-β亚型表达并激活Wnt信号促进幼龄小鼠胃肠发育和生长。

猪源唾液乳杆菌对生长猪氮表观消化率及血清指标的影响

本研究旨在探讨猪源唾液乳杆菌对生长猪氮表观消化率和血清指标的影响。选用平均体重为(35.22±0.86)kg长×大二元杂交猪81头,随机分成3组,每组3个重复,每个重复9头。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加0.20%、0.40%猪源唾液乳杆菌冻干制剂,试验期为30 d。结果表明:添加0.20%、0.40%的猪源唾液乳杆菌冻干制剂可显著提高生长猪氮表观消化率(P<0.05);与对照组相比,2个试验组猪血清白球比显著降低(P<0.05),尿素氮、乳酸脱氢酶、肌酸激酶含量分别比对照组降低了14.77%和13.42%(P<0.05)、16.92%和20.0%(P<0.05)、28.96%和23.00%(P<0.01),但2个试验组间差异不显著(P>0.05)。结果提示,日粮中添加猪源唾液乳杆菌能够提高生长猪氮表观消化率,改善血清指标,减少应激,且以添加剂量为0.20%时效果最好。

定点改造的猪源胰高血糖素样肽-2基因在植物乳杆菌中的表达

根据pGLP-2基因序列,进行定点位点改造,即将pGLP-2的第二位的丙氨酸替换成甘氨酸,形成不被DPP-IV酶切的p(Gly2)-GLP-2,并进行植物乳杆菌(LP1)的密码子偏嗜性修饰,克隆至由超强启动子SCP驱动外源基因表达的植物乳杆菌表达载体p SCPSP,电转化表达宿主菌植物乳杆菌。通过基因组PCR方法鉴定后获得阳性重组转化子,将24 h培养上清通过Tricine-SDS-PAGE检测目的条带,并用pGLP-2ELISA特异性检测试剂盒检测24 h、36 h、48 h培养上清中目的蛋白的表达含量。结果,对pGLP-2成功进行了氨基酸的定点改造,形成了p(Gly2)-GLP-2,成功构建了表达载体p SCP-p(Gly2)-GLP-2;将质粒电转化入植物乳杆菌LP1后成功获得阳性转化子p SCPSP-p(Gly2)-GLP-2-LP1,在Tricine-SDS-PAGE试验中可观察到4 ku左右的目的条带;ELISA试验中p(Gly2)-GLP-2在24 h、36 h、48 h的表达量呈下降趋势,确定最佳表达时间为24 h。结果表明,本试验成功构建的由超强启动子SCP组成的表达系统,在宿主菌植物乳杆菌中成功表达了改造后的p(Gly2)-GLP-2,为pGLP-2的开发研究奠定了基础。

苦豆籽粕-两歧双歧杆菌-唾液乳杆菌合生元微胶囊的工艺研究

以抑制仔猪致病性大肠杆菌效果优异的猪源唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、两歧双歧杆菌(Bifidobac-terium bifidum)为益生菌和苦豆籽粕为益生素,通过海藻酸钠-壳聚糖包被技术将益生菌和益生素做成1个微胶囊整体。工艺1和工艺3制作的产品活菌数分别达到1.1×109和5.2×107 CFU/g,人工胃液和人工肠液处理后的活菌数分别为2.5×108和1.9×107 CFU/g,常温保存90d后活菌数分别为3.7×107和1.2×106 CFU/g。该结果为防治仔猪早期断奶腹泻、仔猪黄白痢的生产应用提供了科学依据。