重组C因子法检测猪源纤维蛋白贴DBT细菌内毒素

目的采用重组C因子法建立用于定量检测猪源纤维蛋白贴DBT的检测细菌内毒素方法。方法分别采用凝胶法和重组C因子法对猪源纤维蛋白贴DBT进行细菌内毒素检查。结果猪源纤维蛋白贴DBT稀释8倍后,使用Lonza和Hyglos的细菌内毒素重组C因子检测试剂盒进行干扰试验,回收率均在50%~200%之间,符合中国药典2020年版9251的规定,其限值为<3 EU·mg^(-1)。采用细菌内毒素重组C因子试剂盒按上述标准对10批猪源纤维蛋白贴DBT进行细菌内毒素检查,结果与细菌内毒素凝胶法检测结果相一致。重组C因子更有利于排除干扰,且更方便进行细菌内毒素的定量测定。结论重组C因子法能有效检测猪源纤维蛋白贴DBT的细菌内毒素,有望成为凝胶法检测的替代方法。

猪源纤维蛋白贴配方的优化

目的优化猪源纤维蛋白贴(简称“DBT”)的配方。方法在单因素实验的基础上,以冻干前的纤维蛋白原、凝血酶和胶原蛋白含量为考察因素,以黏合强度、持黏力和吸水力的总评归一化(OD)值为响应值,采用Box-Behnken-响应面法优化DBT的配方,并进行验证。结果根据单因素实验和Box-Behnken-响应面法优化结果,结合实际生产,得DBT的最优配方为纤维蛋白原含量6.5 mg/cm^(2)、凝血酶含量8.0 IU/cm^(2)、胶原蛋白含量5.6 mg/mL;3次验证实验的平均OD值为0.7266(RSD=0.58%,n=3),与预测OD值(0.7330)的相对误差为-0.87%。结论所得DBT的最优配方稳定、可行。

猪源纤维蛋白贴生物相容性初步研究

目的研究猪源纤维蛋白贴(DBT)生物相容性,为临床应用提供依据。方法通过体外溶血性试验比较不同浓度DBT浸提液对新西兰兔血细胞混悬液中红细胞溶解和凝集的影响。通过皮肤局部刺激性试验研究不同浓度DBT浸提液的皮肤刺激性。结果体外溶血试验结果显示DBT各组不产生溶血。皮肤局部刺激性试验结果显示DBT无明显刺激性,与阴性对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论DBT在体外对兔红细胞未见溶血作用,不引起红细胞凝聚。经DBT处理的皮肤部位大体观察和组织病理学检查均未见明显刺激性,显示DBT的生物相容性良好。