期刊导航
期刊开放获取
河南省图书馆
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式:
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
猪白血病抑制因子的真核表达与活性分析
被引量:
2
1
作者
李明堂
付玉
+2 位作者
王清爽
果洪宇
李洪广
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期849-852,共4页
采用分子克隆技术构建猪白血病抑制因子(LIF)的真核表达载体,表达重组猪LIF蛋白并分析其活性。酶切和DNA测序显示,所构建的真核表达质粒pcDNA3.1-pLIF-MycHis含有编码分泌型猪LIF蛋白的cD-NA序列;免疫印迹分析显示,分泌到上清中的重组...
采用分子克隆技术构建猪白血病抑制因子(LIF)的真核表达载体,表达重组猪LIF蛋白并分析其活性。酶切和DNA测序显示,所构建的真核表达质粒pcDNA3.1-pLIF-MycHis含有编码分泌型猪LIF蛋白的cD-NA序列;免疫印迹分析显示,分泌到上清中的重组蛋白在相对分子质量约37 000的位置上有明显的增强表达条带;活性分析结果显示,重组蛋白能够维持小鼠E-14胚胎干细胞在未分化状态。该结果显示重组猪LIF蛋白在CHO细胞中进行了正确表达并具有很好的生物活性,能够用来培养小鼠胚胎干细胞,为用于猪胚胎干细胞系的研究奠定了良好的基础。
展开更多
关键词
猪白血病抑制因子
活性分析
胚胎干细胞
下载PDF
职称材料
建立稳定表达猪LIF蛋白的小鼠STO细胞系
被引量:
1
2
作者
陈袁
赵丽华
+7 位作者
杨宁
张曼玲
金永
侯道荣
吴兆强
李艳如
姜海滨
李荣凤
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期897-904,共8页
目的:在STO小鼠成纤维细胞中表达猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF),并尝试使用其作为饲养层培养大鼠诱导多能性干细胞(i PS细胞)。方法:通过脂质体转染的技术,将已构建的猪LIF基因真核表达载体p CAG-p LIF转染至小鼠ST...
目的:在STO小鼠成纤维细胞中表达猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF),并尝试使用其作为饲养层培养大鼠诱导多能性干细胞(i PS细胞)。方法:通过脂质体转染的技术,将已构建的猪LIF基因真核表达载体p CAG-p LIF转染至小鼠STO细胞中,获得能够稳定表达猪LIF的转基因STO细胞(STO-p LIF细胞)。通过RT-PCR、q PCR、Western blot等方法检测STO-p LIF细胞中猪LIF基因的表达量,选择高效表达猪LIF的STO-p LIF细胞作为饲养层,培养大鼠i PS细胞。通过生长曲线检测、碱性磷酸酶染色、干细胞多能因子的RT-PCR和免疫荧光染色等方法,检验STO-p LIF细胞饲养层在大鼠i PS细胞培养方面的功能。结果:STO-p LIF细胞中LIF RNA和蛋白表达水平均上调(P<0.05),而该细胞系作为饲养层所培养的大鼠i PS细胞在形态、多能性因子表达方面更接近于传统培养的大鼠i PS细胞,与无外源添加LIF所培养的大鼠i PS存在差异(P<0.05)。结论:成功获得了稳定表达猪LIF基因的STO-p LIF细胞,并证明该细胞作为饲养层在大鼠i PS细胞培养中具有一定优势。
展开更多
关键词
猪白血病抑制因子
小鼠STO细胞
饲养层细胞
大鼠i
PS细胞
下载PDF
职称材料
建立高效表达猪LIF的猪胚胎成纤维细胞系
被引量:
1
3
作者
杨宁
赵丽华
+5 位作者
张曼玲
金永
侯道荣
吴兆强
陈袁
李荣凤
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2015年第7期936-945,共10页
该文目的是建立高效表达重组猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的猪胚胎成纤维细胞(porcine embryonic fibroblasts,PEF)系PEF-p LIF,为下一步辅助建立和培养猪nave胚胎干细胞奠定基础。以猪胚胎成纤维细胞的总RNA为...
该文目的是建立高效表达重组猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的猪胚胎成纤维细胞(porcine embryonic fibroblasts,PEF)系PEF-p LIF,为下一步辅助建立和培养猪nave胚胎干细胞奠定基础。以猪胚胎成纤维细胞的总RNA为模板,利用RT-PCR的方法扩增猪白血病抑制因子基因(LIF),将LIF c DNA连接到真核表达载体p CAGDNA3的启动子下游,构建LIF基因真核表达载体p CAGDNA3-p LIF;利用核转染的方法将p CAGDNA3-p LIF质粒转入PEF;对转染细胞进行G418筛选,得到稳定高效表达重组猪LIF的PEF-p LIF;利用RT-PCR、Western blot鉴定PEF-p LIF中LIF基因及LIF表达情况;使用PEF-p LIF细胞作为饲养层培养小鼠胚胎干细胞,通过对小鼠胚胎干细胞进行碱性磷酸酶染色及细胞免疫荧光染色,对PEF-p LIF维持干细胞干性功能进行初步验证。实验结果显示,成功构建了真核表达载体p CAGDNA3-p LIF;并将其成功转入PEF中,获得高效表达重组猪LIF的PEF-p LIF;以PEF-p LIF作为饲养层成功培养克隆形态正常的小鼠胚胎干细胞。该研究表明,稳定高效表达重组猪LIF蛋白的猪胚胎成纤维细胞系PEF-p LIF可作为饲养层维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态,可为下一步建立及培养猪nave胚胎干细胞提供条件。
展开更多
关键词
猪白血病抑制因子
猪
胚胎成纤维细胞
饲养层细胞
小鼠胚胎干细胞
原文传递
题名
猪白血病抑制因子的真核表达与活性分析
被引量:
2
1
作者
李明堂
付玉
王清爽
果洪宇
李洪广
机构
长春理工大学生命科技学院
吉林大学中日联谊医院神经外科
出处
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期849-852,共4页
基金
吉林省科技发展计划项目(20010522)
长春市科技计划项目(2006075)
文摘
采用分子克隆技术构建猪白血病抑制因子(LIF)的真核表达载体,表达重组猪LIF蛋白并分析其活性。酶切和DNA测序显示,所构建的真核表达质粒pcDNA3.1-pLIF-MycHis含有编码分泌型猪LIF蛋白的cD-NA序列;免疫印迹分析显示,分泌到上清中的重组蛋白在相对分子质量约37 000的位置上有明显的增强表达条带;活性分析结果显示,重组蛋白能够维持小鼠E-14胚胎干细胞在未分化状态。该结果显示重组猪LIF蛋白在CHO细胞中进行了正确表达并具有很好的生物活性,能够用来培养小鼠胚胎干细胞,为用于猪胚胎干细胞系的研究奠定了良好的基础。
关键词
猪白血病抑制因子
活性分析
胚胎干细胞
Keywords
LIF
activity analysis
ES cell
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
建立稳定表达猪LIF蛋白的小鼠STO细胞系
被引量:
1
2
作者
陈袁
赵丽华
杨宁
张曼玲
金永
侯道荣
吴兆强
李艳如
姜海滨
李荣凤
机构
南京医科大学江苏省异种移植重点实验室
出处
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期897-904,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(31371487)
文摘
目的:在STO小鼠成纤维细胞中表达猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF),并尝试使用其作为饲养层培养大鼠诱导多能性干细胞(i PS细胞)。方法:通过脂质体转染的技术,将已构建的猪LIF基因真核表达载体p CAG-p LIF转染至小鼠STO细胞中,获得能够稳定表达猪LIF的转基因STO细胞(STO-p LIF细胞)。通过RT-PCR、q PCR、Western blot等方法检测STO-p LIF细胞中猪LIF基因的表达量,选择高效表达猪LIF的STO-p LIF细胞作为饲养层,培养大鼠i PS细胞。通过生长曲线检测、碱性磷酸酶染色、干细胞多能因子的RT-PCR和免疫荧光染色等方法,检验STO-p LIF细胞饲养层在大鼠i PS细胞培养方面的功能。结果:STO-p LIF细胞中LIF RNA和蛋白表达水平均上调(P<0.05),而该细胞系作为饲养层所培养的大鼠i PS细胞在形态、多能性因子表达方面更接近于传统培养的大鼠i PS细胞,与无外源添加LIF所培养的大鼠i PS存在差异(P<0.05)。结论:成功获得了稳定表达猪LIF基因的STO-p LIF细胞,并证明该细胞作为饲养层在大鼠i PS细胞培养中具有一定优势。
关键词
猪白血病抑制因子
小鼠STO细胞
饲养层细胞
大鼠i
PS细胞
Keywords
porcine leukemia inhibitory factor
STO cells
feeder cells
rat induced pluripotency stem cells
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
建立高效表达猪LIF的猪胚胎成纤维细胞系
被引量:
1
3
作者
杨宁
赵丽华
张曼玲
金永
侯道荣
吴兆强
陈袁
李荣凤
机构
南京医科大学江苏省异种移植重点实验室
出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2015年第7期936-945,共10页
基金
国家自然科学基金面上项目(批准号:31371487)
江苏高等学校协同创新计划"心血管病转化医学协同创新中心"资助的课题~~
文摘
该文目的是建立高效表达重组猪白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的猪胚胎成纤维细胞(porcine embryonic fibroblasts,PEF)系PEF-p LIF,为下一步辅助建立和培养猪nave胚胎干细胞奠定基础。以猪胚胎成纤维细胞的总RNA为模板,利用RT-PCR的方法扩增猪白血病抑制因子基因(LIF),将LIF c DNA连接到真核表达载体p CAGDNA3的启动子下游,构建LIF基因真核表达载体p CAGDNA3-p LIF;利用核转染的方法将p CAGDNA3-p LIF质粒转入PEF;对转染细胞进行G418筛选,得到稳定高效表达重组猪LIF的PEF-p LIF;利用RT-PCR、Western blot鉴定PEF-p LIF中LIF基因及LIF表达情况;使用PEF-p LIF细胞作为饲养层培养小鼠胚胎干细胞,通过对小鼠胚胎干细胞进行碱性磷酸酶染色及细胞免疫荧光染色,对PEF-p LIF维持干细胞干性功能进行初步验证。实验结果显示,成功构建了真核表达载体p CAGDNA3-p LIF;并将其成功转入PEF中,获得高效表达重组猪LIF的PEF-p LIF;以PEF-p LIF作为饲养层成功培养克隆形态正常的小鼠胚胎干细胞。该研究表明,稳定高效表达重组猪LIF蛋白的猪胚胎成纤维细胞系PEF-p LIF可作为饲养层维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态,可为下一步建立及培养猪nave胚胎干细胞提供条件。
关键词
猪白血病抑制因子
猪
胚胎成纤维细胞
饲养层细胞
小鼠胚胎干细胞
Keywords
leukemia inhibitory factor
porcine embryonic fibroblasts
feeder cells
mouse embryonic stem cells
分类号
S852.2 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪白血病抑制因子的真核表达与活性分析
李明堂
付玉
王清爽
果洪宇
李洪广
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
下载PDF
职称材料
2
建立稳定表达猪LIF蛋白的小鼠STO细胞系
陈袁
赵丽华
杨宁
张曼玲
金永
侯道荣
吴兆强
李艳如
姜海滨
李荣凤
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
下载PDF
职称材料
3
建立高效表达猪LIF的猪胚胎成纤维细胞系
杨宁
赵丽华
张曼玲
金永
侯道荣
吴兆强
陈袁
李荣凤
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2015
1
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部