EGF和FGF-2对猪皮下脂肪神经嵴干细胞增殖和分化的影响

【目的】探究表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)和成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF-2)对猪皮下脂肪神经嵴干细胞(neural crest stem cells, NCSCs)增殖及分化的影响,以优化猪皮下脂肪神经嵴干细胞的培养条件。【方法】通过体外分离培养原代猪皮下脂肪NCSCs,免疫荧光染色鉴定NCSCs标志物p75 NTR,并用不同浓度的EGF和FGF-2(0和0、10和10、10和20、20和10、20和20、30和30 ng/mL)作用于传代猪皮下脂肪NCSCs,用CCK-8试剂盒测定细胞增殖率,确定细胞生长的最适EGF和FGF-2浓度,将试验分为空白组和最适浓度组,测定两组细胞的生长曲线,成脂化诱导后油红O染色,对比两组细胞的脂滴生成量。【结果】免疫荧光染色结果显示,原代猪皮下脂肪NCSCs经p75 NTR鉴定呈阳性。CCK-8细胞增殖试验结果显示,EGF和FGF-2的浓度均为20 ng/mL时对传代猪皮下脂肪NCSCs的促增殖作用最佳。生长曲线显示,两组细胞均在第5~9天处于对数生长期,第10~15天细胞增殖减缓,逐渐到达停滞期。油红O染色结果显示,最适浓度组胞质内的脂滴生成量远多于对照组。【结论】在培养液中添加20 ng/mL EGF和20 ng/mL FGF-2对猪皮下脂肪NCSCs的增殖和分化有促进作用。

区间偏最小二乘法结合拉曼光谱测定猪肉皮下脂肪的碘值

碘值是评价脂肪酸品质的重要指标,为探究拉曼光谱技术结合化学计量学方法对完整脂肪样本中脂肪酸不饱和程度测定的可行性,以猪肉皮下脂肪为研究对象,利用实验室自主搭建的拉曼光谱检测系统,获取其300~2000cm-1波段的光谱,进而利用该光谱进行预处理方法的优化研究和碘值相关变量的优选研究,并以传统韦氏滴定法测定得到的碘值为参考值,采用偏最小二乘法建立了完整脂肪样本中碘值的校正模型。结果表明:8次多项式拟合基线校正为最优预处理方法;经区间偏最小二乘法筛选得到的优选变量为1106~1470cm-1;结合最优预处理方法和优选变量建立碘值预测模型,其预测集相关系数Rp和预测均方根误差(RMSEP)分别为0.9463和2.5391×10-2。研究结果证明,优选的拉曼光谱变量可用于完整脂肪中碘值的快速无损测定,为基于拉曼光谱的猪胴体脂肪酸不饱和程度的在线、快速、无损检测提供了理论依据。