集约化猪场不同毒株猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗免疫后血液中持续带毒及抗体消长规律研究

某地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与中国高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(hp-PRRSV)同源性极高,为了筛选适合该地区病情的疫苗,指导养殖户生产,试验选择hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)作为疫苗候选株,选取30日龄、健康状况良好、群体差异性小的断奶仔猪30头,随机分成A、B和C组,每组10头,A组注射hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株),B组注射PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株),C组注射相同剂量生理盐水作对照,免疫前和免疫后14、28、42、56、70、84d采集血清,通过淋巴细胞计数、血清病毒核酸检测、血清抗体检测等分析猪体内hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)免疫应答情况。试验结果显示,淋巴细胞数量方面,仔猪免疫后,淋巴细胞数量均上升,42d时A、B组均达到最大值,A组为19.3×109/L,B组为16.7×109/L,C组则一直处于原始水平;抗体阳性方面,14d时A组为80%,B组为60%,C组为0,42d时A组为100%,B组为80%,C组为0;病毒核酸阳性率方面,14d时A组为90%,B组为100%,C组为0,42d时,A组为40%,B组为70%,C组为0,70d时,A组为0,B组为20%,C组为0。由此可知,hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)能快速诱导猪发生免疫应答、产生免疫抗体,抗体持续时间长、效价高、稳定性良好,且疫苗毒在体内存在时间短、减毒时间快、安全性高,对所研究地区猪群免疫具有优越效果。

高水平母源抗体仔猪接种猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗的免疫效果分析

为评估猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗的免疫效果,本研究于规模猪场选取具有母源抗体的仔猪,接种PRRS弱毒活疫苗后不同时间采集血清,应用RT-PCR检测PRRS病毒(PRRSV)核酸,应用N-ELISA和G-ELISA两种试剂盒检测PRRSV抗体。结果显示,在免疫接种后60 d内可在实验仔猪血清中检测到疫苗株核酸,而在整个实验期间未能检测到野毒株核酸。仔猪在免疫前具有较高的母源抗体,阳性率达到100%,此后逐渐下降,在免疫后第28 d/60 d(第2次试验/第1次试验)降到低点后又稳步升高,从免疫后第60 d/90 d到150 d试验结束时阳性率均达到100%。应用两种ELISA试剂盒同时检测329份血清样品,检测结果的符合率为96.96%;配对χ~2检验,p>0.05,两者差异不显著;Kappa值为0.81,属于极强一致性;两者相关系数r为0.794,具有显著线性相关。本研究结果表明,高水平母源抗体猪群接种弱毒活疫苗后取得良好的免疫效果,可选用N-ELISA或G-ELISA试剂盒进行免疫效果评估。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗安全试验

2010年青海省高致病性猪繁殖与呼吸综合征防治，改用弱毒活疫苗进行免疫预防，因弱毒活疫苗在青海省第一次使用，为确保免疫预防工作的顺利进行，掌握疫苗安全性，在全省进行大面积使用前，确定湟源县和平安县做高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗试点工作，并在平安县做高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗小区试验。现就疫苗的免疫安全试验总结如下：

不同疫苗接种对商品猪群感染猪繁殖与呼吸综合征病毒的影响

为评价不同免疫方案对商品猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的防控效果,在一规模化猪场选取240头未经PRRS疫苗免疫且无PRRSV感染的断奶仔猪分成3组,组内包含15头耳牌跟踪猪。其中混合免疫组、弱毒疫苗组在25 d免疫PRRS经典毒株弱毒疫苗,混合免疫组在50 d免疫PRRS经典毒株灭活疫苗;对照组不接种PRRS疫苗。试验前称重并记录各组耗料情况,于44 d(首免后20 d)或猪群出现PRRSV感染后每隔10 d采血监测PRRSV病毒血症以及抗体产生情况,试验后称取各组试验猪重量。结果显示,2个组猪在首免后抗体出现上升,于99 d(二免后49 d)猪群产生了较高的抗体水平,并持续到试验结束。而混合免疫组在二免后20 d,对照组在69 d监测到有猪开始出现PRRSV病毒血症,弱毒疫苗组于89 d发现有猪出现病毒血症。表明对试验猪免疫1次PRRS弱毒疫苗,可显著降低猪只感染PRRSV后的病毒血症几率,以及病毒血症持续时间;与未接种疫苗的猪相比,接种PRRS疫苗的猪在料肉比方面没有表现出明显的差异;接种该弱毒疫苗免疫25 d的基础上,加免1针灭活疫苗没有显示出明显优势。

猪繁殖与呼吸综合征两种减毒活疫苗免疫后病毒载量及抗体水平分析

为了解A、B两种商用猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗免疫猪后病毒血症及抗体水平的差异,在后备母猪场随机选择100头35日龄后备母猪,分为A、B两组,分组后猪混养14 d。试验猪50日龄时,对A组50头后备母猪免疫A疫苗(1头份/头),B组50头后备母猪免疫B疫苗(1头份/头),疫苗免疫后0、1、2、3、5、7、10、14、21、28、35 d各组猪随机采集血样10份,荧光定量PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒载量,ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。结果显示,B疫苗免疫后,试验猪的猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒血症期持续时间更久,持续至免疫后35 d;A疫苗免疫后,试验猪的猪繁殖与呼吸综合征病毒载量更高;B疫苗免疫后试验猪的N蛋白抗体水平变化趋势更稳定;B疫苗免疫后试验猪的PRRSV GP蛋白抗体水平更高。试验结果表明B疫苗的免疫效果优于A疫苗。

2013—2021年云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行与混合感染状况调查

【目的】调查云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的流行规律和混合感染情况。【方法】采用分子生物学方法对2013—2021年间的3112份血液样品进行PRRSV核酸检测,并进一步分析其流行和混合感染情况。【结果】检测样品中,有801份样品为PPRSV阳性,阳性率为25.74%,二重、三重和四重混合感染率分别为41.20%、12.48%和1.87%;不同生长阶段猪群的PRRSV感染程度差异较大,生长育肥猪感染最严重(33.24%);相对于育肥场和散养户,种猪场的感染程度较轻,三者的感染率分别为27.94%、28.94%和14.29%。对不同毒株类型分析发现:高致病性毒株和经典毒株仍是主要的流行毒株,分别占毒株数的58.49%和22.64%,但占比呈逐年下降趋势。于2019年和2021年在云南省内分别发现了类NADC30毒株和类NADC34毒株,分别占毒株数的15.09%和3.77%,其感染率呈逐渐上升趋势。【结论】猪繁殖与呼吸综合征仍是影响云南省生猪产业健康发展最重要的疫病之一,表现形式以和其他疾病混合感染为主。随着新毒株的发现,云南省PRRSV基因更加多样,防控形势愈加复杂。

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的高度接触性传染病,对养猪业的可持续发展造成严重威胁。目前全球范围内已开发出多种PRRS疫苗,其在一定程度上控制了疫情的流行。目前被广泛用于PRRS疫情防控的疫苗类型主要是传统的活疫苗和灭活疫苗,但活疫苗对不同流行毒株的交叉保护能力弱,且有病毒重组变异风险,而灭活疫苗免疫原性较低,需要佐剂辅助及多次重复免疫。新技术疫苗如嵌合疫苗、基因缺失疫苗、亚单位疫苗、活载体疫苗以及核酸疫苗等具备良好的安全性和免疫效力,但需要进行更深入的研究和临床试验。未来,随着新技术的不断进步,PRRS新技术疫苗必将展现出更好的有效性和安全性。本文综述了现有传统疫苗和新技术疫苗的应用和最新研究进展,以期为PRRS防控和疫苗开发提供参考。

猪繁殖与呼吸综合征病毒重组毒株GX-C4CG6致病性探究

为评估猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组毒株GX-C4CG6对小猪的致病性,选择PRRSV抗原、抗体均为阴性的小猪进行攻毒试验,然后通过攻毒后猪只体温变化及死亡情况、临床症状评分、血清抗体变化、攻毒后平均日增重、解剖后肺脏眼观及显微病理变化、血清/肺脏病毒拷贝数等指标,对该毒株致病性进行评估。结果显示:GX-C4CG6毒株攻毒组有4头猪出现发烧,平均体温在攻毒后第12、13天大于40℃,最高体温达40.4℃,未出现死亡;被攻毒猪仅表现轻微减料,未表现出明显的呼吸障碍;攻毒后7 d,攻毒组猪只抗体开始转阳,至攻毒后14 d,攻毒组猪只ELISA抗体S/P平均值达最高;攻毒组在攻毒后第1周和对照组平均日增重差异不显著,至第2周差异显著(P<0.05),攻毒组显著低于对照组;被攻毒猪出现肺脏间质性肺炎,血清和肺脏病毒拷贝数浓度较高,分别达9.2×10^(5)和1.6×10^(7)copies/mL。结果表明,PRRSV GX-C4CG6毒株对小猪表现温和致病性。本研究为PRRSV重组毒株流行的控制提供了基础资料。

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗的安全性和体液免疫研究

采用转瓶生产技术 ,在MARC 14 5细胞中增殖PRRSV克隆 2 0株 ,经过条件的优化选择 ,得到TCID50 ≥ 10 -7.55/mL的高滴度PRRSV溶液 ,为生产疫苗打下基础 ;所生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全无致病性 ,能刺激猪产生特异性抗体应答 ,接种后第 14天可检测出特异性中和抗体。疫苗内的PRRSV滴度在冻干前后变化不大 ,冻干疫苗在 4～ 8℃保存有效期为 6个月 ,- 2 0℃保存有效期达 18个月 ,表明生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全且能刺激猪产生体液免疫应答 ,可用于PRRS的预防接种。

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗的安全性和体液免疫研究

采用转瓶生产技术,在MARC-145细胞中增殖PRRSV克隆20株,经过条件的优化选择,得到TCID≥10-7.55/mL的高滴度PRRSV溶液,为生产疫苗打下基础;所生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全无致病性,能刺激猪产生特异性抗体应答,接种后第14天可检测出特异性中和抗体。疫苗内的PRRSV滴度在冻干前后变化不大,冻干疫苗在4-8℃保存有效期为6个月,-20℃保存有效期达18个月,表明生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全且能刺激猪产生体液免疫应答,可用于PRRS的预防接种。

猪繁殖与呼吸综合征病毒的免疫保护机制及疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的高变异性、免疫逃逸以及异源毒株间的交叉保护效果差,致使现有疫苗保护效力的持久性和有效性受限。本文归纳了PRRSV国内外流行毒株的进化和抗原变异以及毒株中和表位的免疫保护机制研究现状,系统分析了传统疫苗、反向遗传学构建的嵌合疫苗、基因工程疫苗、干扰素诱导激活疫苗以及纳米疫苗等的研究进展,提出了通过不断改良佐剂、改进接种方式等途径开发新型PRRSV疫苗,有望加快终结PRRS的全球流行,为研发安全高效的新型PRRSV疫苗提供了参考。

猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗研究进展

经典的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是一种主要表现为母猪繁殖障碍与新生仔猪呼吸道症状的传染病。近年来,国内新暴发和流行的高致病性PRRS,则以高热、高发病率和高死亡率为特征，给国内养猪业带来巨大的经济损失。

猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗安全性和免疫原性测定

选用猪繁殖与呼吸综合征病毒福建分离株(PRRSV Fuzhou 01株)为制苗种毒。病毒经Marc 145细胞增殖、超速离心浓缩、甲醛灭活后,分别制成新型佐剂IMS1312灭活疫苗和油乳剂灭活疫苗,两种疫苗病毒含量约为108.0TCID50.mL-1。30头25日龄的PRRSV抗体阴性的断奶猪被随机分成5组,每组6头,用于检测疫苗的安全性和免疫原性。结果表明两种疫苗首次免疫断奶仔猪后14 d可以检测到抗体,二免14 d抗体水平达到高峰,一免180 d后抗体水平可以维持在1∶320。两种佐剂苗在4℃放置12个月均不分层,并对断奶仔猪具有良好的安全性和免疫原性。

猪繁殖呼吸综合征弱毒疫苗的研制

PRRSV SA 弱毒株免疫仔猪 ,无不良临床表现 ,不排毒 ;免疫怀孕母猪 ,母猪精神、食欲、体温均正常 ,并在预产期顺利产仔 ,表现出良好的安全性。SA 弱毒免疫猪后 2周即产生抗体反应 ,免疫仔猪 4～ 6个月后 ,能抵抗强毒攻击 ;母猪在配种前 2周免疫 ,在怀孕 90～ 96d时 ,用强毒攻击 ,不表现任何临床症状 ,并顺利产仔 ,表现出坚强的免疫力。用SA 弱毒制备成冻干疫苗 ,免疫猪表现出良好的安全性和免疫力。证明PRRSV SA 弱毒疫苗能预防猪繁殖呼吸综合征。

猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30(SY株)不同佐剂灭活疫苗免疫效果的研究

为研究利用不同佐剂制备的猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30(NADC30-PRRSV)SY株灭活疫苗的免疫效果,本研究对由ISA201VG和ISA70VG佐剂分别制备的2种NADC30-PRRSV SY株疫苗的免疫效果进行比较研究。本研究选用35日龄PRRSV抗体和抗原均为阴性的健康仔猪15头,随机分为3组:ISA201VG免疫组、ISA70VG免疫组和未免疫攻毒组。免疫组首免10^(7.0)TCID_(50)/头,间隔21 d后以相同剂量进行二次免疫,采用ELISA法检测PRRSV血清抗体,结果显示,免疫后第35 d,ISA70VG免疫组5头试验猪PRRSV抗体阳转率达100%,ISA201VG免疫组5头试验猪PRRSV抗体阳转率达40%。二免后14 d采用NADC30-PRRSV SY株攻击试验猪,攻毒剂量为1×10^(5.0)TCID_(50)/mL,检测各组猪体温度化,结果显示,ISA70VG免疫组试验猪从攻毒后第8 d起体温超过40℃,持续6 d;ISA201VG免疫组5头试验猪只有1头体温超过40℃;未免疫攻毒对照组5头猪攻毒后第11 d13 d体温升至40℃持续3 d。各组猪增重检测显示,ISA70VG佐剂免疫组与未免疫感染对照组相比较,体重呈现负增长且体重减少均在5%以上,而ISA201VG与未免疫感染组相比较,体重呈现正增长且增长均在7%以上。对PRRSV感染后两个实验组肺组织病理观察均可见肺脏呈局限性间质性肺炎和淤血,并伴有血栓、部分肺泡隔增宽,支气管周围有淋巴细胞浸润伴有间质性肺炎,但ISA70VG组比ISA201VG组组织病变更加严重。本实验表明ISA201VG佐剂效果更好,同时首次证实类NADC30-PRRSV(SY株)也能导致严重抗体依赖增强效应,不益作为疫苗株。

猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的免疫与抗体监测分析

为探讨湖北某试验猪场猪群PRRS减毒活疫苗的免疫效果,选择HP-PRRS弱毒疫苗（JXA1-R株）对20头35日龄仔猪进行初步免疫试验,4周后采血进行PRRS抗体检测; 另采集未免疫疫苗的20、30、60、70、120日龄阶段猪只血样194份,免疫疫苗的基础母猪群血样265份和配种前后备猪血样65份,分析其血清PRRS抗体阳性率、S/P均值和CV值. 结果显示,20头35日龄仔猪免疫疫苗后4周抗体阳性率达85%,S/P均值和CV值分别为1.55和30%,初步表明疫苗免疫效力良好;未免疫疫苗的猪只在20～60日龄时抗体值随母源抗体逐步下降,在60日龄时达到最低为33%,70～120日龄时抗体值由85%上升到96%,说明此生长阶段已感染PRRSV;全部母猪群和后备猪抗体阳性率分别为87%和92%,S/P值〉2.5的比例为9.1%,表明疫苗总体免疫稳定,并判断该场为PRRSV感染阳性稳定场.通过试验研究,旨在为该场科学防控PRRS提供临床依据.

猪繁殖与呼吸综合征活疫苗中病毒含量荧光定量PCR测定方法的建立及初步应用

为建立快速、敏感、特异的评价猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）活疫苗中病毒含量的方法，根据GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）基因序列设计合成了标准品引物和定量引物，RT—PCR扩增PRRSV基因片段并连接到pMD19-T载体上，构建标准品质粒pMD19-TPRRSV。采用SYBRGreenI染料法进行荧光定量PCR检测，分析标准曲线并进行特异性、稳定性、重复性试验。结果显示，该方法检测病毒含量为7．43×10^0～7．43×10^8拷贝／μL，标准品各稀释度质粒拷贝数与Ct值之间相关系数高（R2=0．9989），引物特异性强。应用该方法对6个厂家PRRS活疫苗中的病毒含量进行测定，发现不同厂家生产的疫苗中病毒含量差异较大，最高差异可达47．9倍。本试验建立的检测PRRS活疫苗病毒含量的荧光定量PCR方法可用于疫苗生产过程中及免疫动物前疫苗质量的评价。

某规模猪场暴发繁殖与呼吸综合征类NADC30毒株的诊疗

某规模化养猪场在2024年1-4月期间,出现母猪流产、死胎增加的现象,仔猪死淘率升高,部分批次超过20%,送检病料检测到猪蓝耳病病毒核酸阳性且为NADC30-like毒株。本案例探讨了猪场蓝耳病毒NADC30-like毒株感染后的防控方法。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)免疫后病毒血症和抗体消长规律

应用高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)对28-30日龄的仔猪进行免疫,前8周每周采血,8周后每2周采血进行疫苗毒核酸检测和抗体水平检测,直至免疫后第16周。结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)在血清中存在的最长时间大约为6周;抗体从免疫后第2周开始转阳,至第3周时全部为阳性,并且抗体水平不断上升,至免疫后第10周时平均抗体水平达到最高。

猪圆环病毒病和猪繁殖与呼吸综合征二联灭活疫苗免疫猪抗体消长规律试验

为了确定猪圆环病毒病和猪繁殖与呼吸综合征(PCVD-PRRS)二联灭活疫苗的免疫期,试验采用PCVD-PRRS二联灭活疫苗免疫4周龄仔猪,于免疫后7,14,21,30,60,90,120,150,180,210,240天采血,分别进行PCV-2、PRRSV的ELISA抗体和中和抗体测定,以测定疫苗免疫猪后抗体的消长规律和疫苗的免疫期。结果表明:4周龄仔猪在免疫后7天抗体开始出现,21天PCV-2ELISA抗体达峰值,30天中和抗体达峰值;30天PRRSVELISA抗体达峰值,21天中和抗体达峰值,所有猪维持较高的抗体水平达180d以上;该疫苗的免疫期可达6个月。