赭曲霉毒素A在猪组织残留的研究进展

赭曲霉毒素A是曲霉或青霉菌合成的一种毒性代谢物,有从饲料携带到动物组织的风险。具有肾毒性、神经毒性、致突变、致畸和免疫抑制作用。早期的研究多数关注农作物和饲料中赭曲霉毒素A污染现状,以及人类或动物暴露于这种污染物的危害。很少有研究评估猪组织中赭曲霉毒素A的残留情况。因此,本研究的目的是探讨含有赭曲霉毒素A的饲料对猪组织中其含量的影响,以及猪组织中赭曲霉毒素A的污染概况。以期为我国建立食品中赭曲霉毒素A的预警体系提供参考。

猪组织中替米考星残留的高效液相色谱检测方法研究

用乙腈和磷酸二氢钾缓冲液提取猪组织中替米考星,固相萃取柱净化,甲醇-乙腈-乙酸铵洗脱,紫外检测器290 nm处检测,建立了猪组织中替米考星残留的高效液相色谱检测方法.该方法检测肌肉、肝脏中替米考星的检测限分别为0.01和0.025 μg/g;定量限分别为0.02和0.05 μg/g.肌肉在0.02～2.0 μg/g添加范围内,平均回收率在84.2%～96.6%之间,变异系数在5.0%～8.2%之间;肝脏在0.05～5.0μg/g添加范围内,平均回收率在82.0%～92.8%之间,变异系数在5.8%～11.3%之间.本方法检测限低,分析简便、准确,符合残留分析的要求.

液相色谱-串联质谱结合谱库检索法同时测定猪组织中12种类固醇激素

建立了猪组织中12种类固醇类激素(炔诺酮、雄诺龙、醛固酮、去氢睾酮、达那唑、去氢甲睾酮、甲基睾丸酮、诺龙、孕酮、康力龙、睾酮和丙酸睾酮)多残留的液相色谱-四极杆/线性离子阱串联质谱(QTrap LC-MS/MS)的检测方法。组织样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解提取,混合型强阳离子交换固相萃取小柱(MCX柱)净化后,以含0.1%(体积分数)甲酸的乙腈和水为流动相,经Venusil MP C18色谱柱(100mm×2.1mm,3μm)分离,按照多级反应监测(MRM)、信息相关采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI),结合建立的12种类固醇类激素的标准谱图库检索的多步模式进行分析。结果表明,12种类固醇激素的线性范围为0.5～100.0μg/L,线性相关性良好(r>0.99);样品在5.0μg/kg添加水平下的平均回收率为72.0%～98.1%,相对标准偏差为3.1%～12.5%;方法检出限(S/N=3)为0.2～0.5μg/kg。实际样品检测结果表明,应用本方法可以实现对猪组织样本中类固醇类激素残留的定性定量分析,且具有灵敏、准确的特点。

固相萃取-气相色谱-质谱法测定猪组织中沙丁胺醇残留量

建立了动物组织中沙丁胺醇残留量固相萃取-气相色谱-质谱分析方法。动物组织样品经过葡萄糖醛甙酶酶解后调节pH至9．5，然后用异丙醇／乙酸乙酯混合溶剂液液分配去除杂质，旋转浓缩后用乙酸铵缓冲溶液溶解经SCX固相萃取（SPE）柱净化，洗脱液经氮气吹干后用双三甲基硅基三氟乙酰氨（BSTFA）衍生，采用选择离子模式（86、350、369、440）进行测定，外标法定量。检出限为0．10μg/kg。在添加浓度0．5～5．0μg/kg范围内，平均添加回收率在66．4％～82．4％，相对标准偏差（批内）（CV）在3．5％～5．9％之间；批间（CV）在2．2％～4．8％之间。衍生物的峰面积与样品浓度在0．002～0．50mg／L范围内呈良好的线性关系，线性回归系数大于0．999。

液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的9种β-兴奋剂残留量

建立了猪组织中9种β-兴奋剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗、妥布特罗、西马特罗和异舒普林)多残留的液相色谱-四极杆/线性离子阱串联质谱(QTrap LC-MS/MS)检测方法。样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解提取,液液萃取净化,以乙腈-甲酸水溶液为流动相,经C18柱分离后用QTrap LC-MS/MS进行多反应监测(MRM)、信息相关采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI)和谱库检索分析。9种β-兴奋剂的线性范围为0.1～50.0μg/L,线性关系良好(r>0.99);样品中9种目标物在0.5、1.0和5.0μg/kg添加水平下的回收率为72.0%～95.1%,相对标准偏差为3.1%～12.1%;方法检出限为0.1～0.2μg/kg。实际样品检测结果表明,本方法可实现猪组织样本中β-兴奋剂残留量的灵敏、准确的定性和定量分析。

超快速液相色谱-四极杆/线性离子阱质谱同时检测猪组织中9种β-受体阻断剂残留

建立了同时检测猪组织中9种β-受体阻断剂（ BBs）残留的超快速液相色谱-四极杆/线性离子阱质谱方法。均质试样经β-葡糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶水解，乙腈提取，硅藻土与 BondElut 分散固相萃取填料双重快速净化，以0.1％（v / v）甲酸水溶液-甲醇为流动相使用 Kinetex TM C18-XB 色谱柱（150 mm＆#215;2.1 mm，2.6μm）超快速液相色谱分离，优化多反应监测（MRM）离子对后，采用预设定多反应监测（ sMRM）-信息依赖性采集（ IDA）-增强子离子扫描（EPI）模式检测，在线 EPI 谱库定性分析，内标法定量。结果表明，9种 BBs 在线性范围内的线性关系良好（ r≥0.995）；定量限（LOQ，S / N≥10）均达到0.5μg / kg；3个添加水平（0.5、1.0和5.0μg / kg）下的回收率为87.5％~111.8％；RSD 为4.0％~12.5％。该方法快速、准确、灵敏，可有效用于猪组织样品中多种 BBs 残留的同时测定。

高效液相色谱电化学检测法测定猪组织中的克伦特罗

建立了猪组织中克伦特罗的高效液相色谱 电化学检测方法。色谱柱为DiscoveryC18柱(5μm,4 6mmi.d.×250mm);流动相为1.7mmol/L氯化锂 甲酸 甲醇(体积比为65∶1∶34)混合溶液,流速为1 0mL/min;柱温为40 0℃;电化学检测器工作电位为1 25V。猪组织中克伦特罗含量为0 5～500ng/g时,克伦特罗的含量与其峰面积之间存在良好的线性关系(r>0 99),在组织中按0 5,50,500ng/g3个添加水平做克伦特罗的回收率试验,其回收率为75 8%～87 1%(n=4)。该方法重现性好,灵敏度高,简便,可用于猪的肌肉、肺脏、肝脏、肾脏及脂肪组织中克伦特罗残留的检测。

QuEChERS-超高效液相色谱法-串联质谱法同时检测猪组织中赛庚啶及可乐定残留量

建立了Qu ECh ERS前处理结合超高效液相色谱-串联质谱同时检测猪组织中赛庚啶和可乐定残留量的方法。猪肉样品添加0.5 g C18粉,猪肝和猪肾样品添加3.0 g硫酸镁和2.0 g氯化钠,再分别加入10 m L 0.1%甲酸乙腈进行提取,提取液经浓缩后采用LC-MS/MS进行检测,内标法定量。该方法线性关系良好,猪肉、猪肝和猪肾中赛庚啶和可乐定在1~50μg/kg浓度范围内加标回收率分别为62%~112%和106%~121%,相对标准偏差均<10%,方法检出限为0.5μg/kg。方法灵敏度高,选择性好,可作为猪组织中赛庚啶和可乐定残留量检测的确证方法。

固相萃取-高效液相色谱法测定猪组织中的头孢喹诺

本文建立了固相萃取-高效液相色谱法测定猪组织中头孢喹诺的方法。组织样品用磷酸盐缓冲液、异辛烷和乙腈提取,40℃旋转蒸发至近干,C18固相萃取小柱净化后注入高效液相色谱仪分析。采用Inertsil C18色谱柱（250×4.6 mm,5μm）,以磷酸盐缓冲液-乙腈（体积比为80∶20）为流动相,于270 nm波长处检测。肌肉、脂肪、肝脏和肾脏样品中头孢喹诺的检测限分别为5、10、15、30μg/kg。在20~2 000μg/kg添加水平内,平均回收率为55.7%~79.4%,相对标准偏差为3.3%~5.7%。本方法可用于猪组织中头孢喹诺残留的检测。

液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中13种氟喹诺酮类药物

采用MRM→IDA→EPI→谱库检索模式建立了猪组织中13种氟喹诺酮类药物的液相色谱-电喷雾串联质谱多残留检测方法,结合谱库检索功能同时实现了定性定量分析。组织样品经N,N-二甲基甲酰胺-乙腈混合溶液提取,Waters HLB柱净化,本方法13种氟喹诺酮类药物的线性范围为1.0～5000.0μg/kg,线性相关系良好(r>0.99);在2.0～20.0μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为81.6～114%;相对标准偏差为1.1～11.2%;方法检出限为0.1～0.5μg/kg。

超高效液相色谱-电喷雾串联技术测定猪组织中7种β-兴奋剂

2g猪组织样品经β-葡萄糖苷酸酶酶解,0.2mol/L高氯酸沉淀蛋白,用乙酸乙酯-异丙醇(6+4,V/V)和叔丁基甲醚提取,旋转蒸发器减压蒸干,正己烷脱脂后,样液用UPLC分离,电喷雾串联四级杆质谱进行检测,本方法研究的7种β-兴奋剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗和异舒普林)的线性范围为0.25～500μg/kg,线性相关系数r>0.99;0.5～10μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为75.2%～96.7%;相对标准偏差为5.6%～13.1%;方法检出限(LOD)为0.1～0.25μg/kg。

LC-MS/MS法结合谱库检索测定猪组织中三聚氰胺及其同系物

采用MRM→IDA→EPI→谱库检索模式建立了猪组织中三聚氰胺及其同系物的液相色谱-电喷雾串联质谱多残留检测方法,结合谱库检索功能同时实现了定性定量分析。组织样品经2%三氯乙酸、10%乙酸铅和乙腈混合溶液提取,Sepucol ENVI-CARB柱净化,三聚氰胺及其同系物的线性范围为10~5 000μg.kg-1,线性关系良好（r〉0.99）;在10~100μg.kg-1添加水平范围内,平均回收率为94.2%~99.9%、相对标准偏差为3.8%~7.5%、方法检出限为2μg.kg-1。

头孢喹肟注射液在猪组织中的残留消除研究

建立了猪组织中头孢喹肟的固相萃取-高效液相色谱（SPE—HPLC）测定方法，并研究了头孢喹肟在猪组织中的残留消除规律。组织样品用磷酸盐缓冲液和乙腈提取、离心、蒸发，然后用预先活化的C18固相萃取小柱净化。用磷酸盐缓冲液淋洗、乙腈溶液洗脱固相萃取柱。收集洗脱液，氮气吹干后重新溶解，终溶液用高效液相色谱法分析。测定方法的LOD（检测限）和LOQ（定量限）分别为5～30ng／g和20～100ng／g。在0．02～2．0μg／g添加范围内，平均回收率55．7％～79．4％，变异系数低于6．7％。健康猪按2mg／kg剂量肌肉注射2．5％头孢喹肟注射液，每日1次，连续5d，最后一次给药后0．5、1、2、3、5、7、9d分别宰杀5头猪，采集肌肉、脂肪、肝脏和肾脏，测定组织中头孢喹肟残留量。头孢喹肟主要残留于猪的肾脏和肝脏，脂肪和肌肉中残留较少，提示肾脏和肝脏为头孢喹肟在猪体内残留的靶组织。停药3d后，所有组织中药物残留量均低于EMEA规定最高残留限量（MRL）。研究结果表明，国产硫酸头孢喹肟在猪组织中消除迅速。建议休药期为3d。

喹乙醇在猪组织中残留的数学模型分析

试验采用高效液相色谱法检测猪组织（肌肉、肝脏、肾脏）中的喹乙醇残留量，通过对饲料中喹乙醇添加量和组织中喹乙醇残留量的分析，建立数学模型。研究表明，饲料中喹乙醇的添加量在75～125μg／g的范围内，饲料添加量与猪组织（肌肉、肾脏、肝脏）的残留数学模型分别为：y=0．0496x＋0．544；y=2．9338e^0.0106x；y=2．9959e^0.0112x。

高效液相色谱-串联质谱法测定猪组织中的土拉霉素

建立了高效液相色谱-串联质谱法测定土拉霉素在猪肝脏、肾脏、肌肉、皮脂和肺脏中的残留检测方法，并初步探讨了土拉霉素的基质效应。样品用乙腈提取，涡旋振荡离心后经正己烷脱脂，C18固相萃取柱净化后，40℃氮气吹干，用50％乙腈定容。以Penomenex Luna C18柱为色谱柱，乙腈-2mmol／L乙酸铵水溶液（含0．1％甲酸）为流动相，梯度洗脱；流速0．25mL／min；柱温35℃。质谱条件为电喷雾离子源，检测方式为正离子多离子反应监测（MRM），外标法定量。在10．0～500μg／kg范围内，方法的线性关系良好（r〉0．99）。5种基质中土拉霉素的检出限为3～5μg/kg，定量下限均为10μg/kg。在高、中、低3个加标水平下的平均回收率为74％～96％，批内相对标准偏差（RSD）为4．0％～16％，批间RSD为7．0％-15％。该法准确、灵敏，适用于猪组织中土拉霉素的测定。

超高效液相色谱测定猪组织中4种β2-兴奋剂

建立了超高效液相色谱(UPLC)测定猪组织中4种β2-兴奋剂(奥西那林、克伦特罗、沙丁胺醇、莱可多巴胺)的方法,猪组织被捣碎后,加入乙酸-乙酸铵缓冲液和酶(HP-2)进行酶解,再用HClO4沉淀蛋白,离心,上清液用氨水调节pH至9.5±0.5,V(乙酸乙酯)∶V(异丙醇)=6∶4提取,收集有机层,旋转蒸发仪蒸至近干,乙酸-乙酸铵缓冲液溶解残渣,通过MCX小柱,氨化甲醇洗脱后测定。

猪囊尾蚴DNA疫苗在猪组织中的分布

目的 :分析猪囊尾蚴 DNA疫苗 pc DNA3- c C1肌肉接种后在猪体内的组织分布。 方法 :分别于疫苗接种后 1d、7d、4周、8周 ,提取猪骨髓、肾、肝、脑、性腺、肠系膜淋巴结、脾、胸腺、外周血及肌注部位的肌肉和皮肤的总 DNA,通过 PCR的方法检测疫苗质粒在各组织中的分布及随时间变化的情况。 结果 :疫苗接种后的第 1天几乎所有组织中都检测到质粒 ;但随着时间的延续 ,仅在注射部位的肌肉和皮肤中检测到质粒的存在 ,并保持到 8周以上。 结论 :肌注疫苗质粒后 。

猪组织中10种β-兴奋剂类兽药残留量的气相色谱-质谱法检测

利用气相色谱-质谱检测技术,建立了猪组织（猪肉、猪肝、猪肾）中10种β-兴奋剂类兽药残留量的检测方法。样品经乙酸钠缓冲溶液提取后,依次经液-液萃取、阳离子交换柱净化,再经双（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺-三甲基氯硅烷（BSTFA-TMCS）衍生,气相色谱-质谱检测。在相应的质量浓度范围内,10种β-兴奋剂的质量浓度与峰面积有良好的线性关系,相关系数r2大于0.996,检出限为1~5μg/kg。对猪组织样品的室内平均回收率为59%~77%,相对标准偏差为0.87%~7.0%;室间平均回收率为63%~76%,相对标准偏差为1.5%~12.6%。方法具有简便快速、准确度和灵敏度高、重复性好等特点,适合于动物组织中β-兴奋剂的测定。

猪组织和血浆中磺胺二甲嘧啶残留分布规律的研究

试验采用Agilent HP1100高效液相色谱分析法,对饲喂不同磺胺二甲嘧啶含量(100 mg/kg,300 mg/kg,500mg/kg)饲料的猪体组织(肝脏、肾脏、肌肉)和血浆中磺胺二甲嘧啶含量进行了检测。试验表明:饲料中磺胺二甲嘧啶添加量与组织和血浆中残留量均呈线性相关关系,随着添加浓度的增加,在组织和血浆中的残留量也随即增加,在同一浓度的磺胺二甲嘧啶添加剂中,在猪组织和血浆中的残留量分布为:血浆>肝脏>肾脏>肌肉。