猪细小病毒病灭活疫苗佐剂筛选及配苗乳化工艺研究

为了筛选制备猪细小病毒病灭活疫苗(L株,悬浮培养)的佐剂,用注射用白油和法国赛比克公司生产的MontanideTMISA 206 VG佐剂(简称206佐剂)分别配制灭活疫苗,通过对两种疫苗的配苗乳化工艺、疫苗性状、无菌检验、安全检验、效力检验和免疫期等方面进行比较。结果显示:与注射用白油配制的疫苗相比,使用206佐剂配苗乳化工艺相对简单;制备疫苗剂型为水包油包水型,易注射,吸收良好;局部和全身均无不良反应,安全性良好;免疫后第7天猪细小病毒206佐剂疫苗免疫猪产生HI抗体效价显著高于白油佐剂疫苗,免疫后第60天猪细小病毒206佐剂疫苗免疫猪HI抗体效价达到峰值;免疫期为6个月。综上,确定206佐剂作为制备猪细小病毒病灭活疫苗的佐剂。

猪细小病毒病灭活疫苗的安全性和抗体消长规律的研究

猪细小病毒病是由细小病毒科猪细小病毒（PPV）感染猪引起的胚胎感染及死亡，而母猪并不表现明显症状的猪繁殖障碍性疾病。妊娠前期的母猪易感染，主要引起母猪流产、胎儿死亡、胎儿畸形、木乃伊胎、弱胎及不孕等，同时还可引起仔猪发生皮炎和腹泻，与猪圆环病毒协同感染是导致断奶仔猪多系统衰竭综合症的主要原因之一。

猪细小病毒病灭活疫苗纯化浓缩技术研究

为了研究采用中空纤维柱对猪细小病毒液进行浓缩是否可行,同时研究浓缩纯化后的疫苗安全性是否受到影响,采用0.45μm的中空纤维柱去除细胞碎片,然后用100 ku中空纤维浓缩纯化系统对猪细小病毒原液进行20倍浓缩纯化洗滤及重悬(最终相当于2倍浓缩),用病毒原液和2倍浓缩液分别配制疫苗,对两种疫苗的安全检验、效力检验进行比较。结果显示:上述两种疫苗免疫猪后,效力检验结果均符合规定,但2倍浓缩液配制的疫苗安全性明显优于原液制备的疫苗。说明采用中空纤维浓缩纯化系统对猪细小病毒进行浓缩工艺是可行的,且浓缩纯化后疫苗安全性明显提高。

猪细小病毒病灭活疫苗

猪细小病毒病是由细小病毒引起的一种传染病,对养猪业威胁很大,为此,我厂研制出猪细小病毒灭活疫苗。 本品系用猪细小病毒接种胎猪睾丸细胞培养,收获细胞培养物,经灭活后,加入氢氧化铝胶制成。 [性状]本品静置后,上层为淡粉色澄明液体。

猪细小病毒病灭活疫苗灭活工艺研究

为了研究猪细小病毒灭活苗的灭活条件,对猪细小病毒原液用灭活剂二乙烯亚胺(BEI)进行了灭活试验,研究30℃条件下不同灭活时间及不同浓度的BEI对猪细小病毒原液的灭活效果。结果表明:以BEI终浓度为0.02%,30℃作用72 h可将病毒液灭活完全。

猪细小病毒病灭活疫苗稳定性研究报告

为了研究猪细小病毒病灭活疫苗(L株,悬浮培养)的稳定性(保存期),将3批猪细小病毒病灭活疫苗实验室制品(批号为201401、201402和201403)于2~8℃保存3、6、9、12、18、24个月后分别进行性状、无菌性和效力等检验。结果显示:3批实验室制品在2~8℃保存24个月,性状、无菌性和效力等检验结果均符合标准。根据试验结果并确保猪细小病毒病灭活疫苗的质量,暂定产品2~8℃保存有效期为18个月。

三类新兽药 猪细小病毒病灭活疫苗的特点

猪细小病毒病广泛分布于世界各地，且很难根除，给养猪业造成了很大的经济损失。近年来，大家公认使用疫苗是预防猪细小病毒病、提高母猪繁殖率的有效方法之一，目前已有10多个国家研制出了细小病毒疫苗，

瑞普生物猪细小病毒病灭活疫苗获农业部批文

近日，瑞普（保定）生物药业有限公司的猪细小病毒病灭活疫苗（BJ-2株）通过了中国兽医药品监察所的质量复核检验，获得了农业部核发的兽药产品批准文号I兽药生字（2012）030381085]。

农业部批准猪细小病毒病灭活疫苗等兽药产品为新兽药

近日，从农业部昨日发布的消息了解到，根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，经审查，批准中国兽医药品监察所等10家单位申报的牛病毒性腹泻／黏膜病、传染性鼻气管炎二联灭活疫苗（NMG株＋LY株）等2种兽药产品为新兽药，核发《新兽药注册证书》，并发布产品试行规程、质量标准、说明书和标签，自发布之日起执行。

国家三类新兽药猪细小病毒病灭活疫苗

猪细小病毒病（porcine parvovirus infection，PPI）又称猪繁殖障碍病，是由猪细小病毒（PPv]引起的胚胎感染及死亡的一种猪的繁殖障碍病。以怀孕母猪发生流产、死产、产木乃伊为特征。猪细小病毒为细小病毒科细小病毒属成员。病毒对热具有较强抵抗力，56℃48小时或70℃2小时病毒的感染性和血凝性均无明显改变，但80℃5分钟可使感染性和血凝活性均丧失。病毒在40℃极为稳定，对酸碱有较强的抵抗力，在pH3．0—9．0之间稳定，能抵抗乙醚、氯仿等脂溶剂，但0．5％漂白粉、‰～1．5％氢氧化钠5分钟能杀灭病毒，2％戊二醛需20分钟，甲醛蒸气和紫外线需要相当长的时间才能杀死该病毒。短时间胰酶处理对病毒悬液感染性不仅没有影响，反而能提高其感染效价。

农业部批准猪细小病毒病灭活疫苗等兽药产品为新兽药

农业部第2422号公告称,根据,《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定,经审查,批准中国兽医药品监察所等10家单位申报的牛病毒性腹泻/粘膜病、传染性鼻气管炎二联灭活疫苗（NMG株＋LY株）、猪细小病毒病灭活疫苗（NJ株）等兽药产品为新兽药（附件1）,核发《新兽药注册证书》,并发布产品试行规程、质量标准、说明书和标签，自发布之日起执行。

猪细小病毒灭活疫苗安全性试验及佐剂的筛选

本研究以猪细小病毒(PPV)现地分离株(BQ)第30代细胞培养毒株作为灭活疫苗研究用种毒,通过优化病毒增殖条件和培养方法,获得较高滴度的病毒传代细胞培养物用于PPV灭活疫苗的制备。PPV细胞培养毒株分别用甲醛和β-丙内酯进行灭活,对2种灭活剂灭活的病毒液分别用国产铝胶佐剂、进口矿物质白油佐剂以及法国赛比克公司的MONTANIDETMISA 206、ISA15AVG、IMS251CVG 3种佐剂制备10种灭活疫苗,然后分别进行10日龄乳鼠、60日龄仔猪、不同妊娠阶段母猪的安全性试验及成年豚鼠的免疫效果对比试验。通过比较不同灭活疫苗的安全性和对成年豚鼠的免疫效果,初步确认甲醛灭活的病毒液与佐剂ISA15AVG的组合为PPV灭活疫苗的最佳灭活剂和佐剂组合。

用豚鼠效检猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗判断标准的初步研究

8批猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗共免疫PPVHI抗体阴性猪 2 3头 ,每批 2～ 3头 ;免疫阴性豚鼠2 4只 ,每批 3只。均设不免疫为对照。定期采血 ,测定PPVHI抗体 ,进行猪和豚鼠免疫后抗体比较试验。全部出现抗体反应的时间 ,猪是免疫后 1周 ,豚鼠是免疫后 4周。 2 3头免疫猪攻毒后 ,从血浆和内脏中均未分离到病毒 ,而从对照猪血浆和内脏中均分离到病毒 ,证明当免疫豚鼠HI≥ 6 4时 ,免疫猪能抵抗PPV强毒的攻击。

猪细小病毒灭活疫苗NJ株毒种分离及鉴定

为防控猪细小病毒病,进行了猪细小病毒灭活疫苗毒种研究。将南京某猪场初产母猪流产胎儿的脾、肺等组织病料处理后接种ST细胞培养,获得了1株猪细小病毒强毒,将分离毒株适当稀释接种ST细胞,经3轮蚀斑纯化获得1株纯净的猪细小病毒NJ株(PPV-NJ株),作为疫苗毒株。将NJ株接种ST细胞培养连续传15代,每代次病毒效价均不低于1 ml 107.25TCID50、血凝素效价不低于29。选择第5代病毒液,灭活后与矿物油佐剂混合乳化制成灭活疫苗,以不同剂量分别免疫豚鼠和后备母猪,用血凝抑制试验(HI)和ELISA检测抗体效价。分别用剂量0.125 ml、0.250 ml和0.500 ml疫苗免疫豚鼠28 d后,各免疫组HI抗体效价均高于28,0.5 ml组HI抗体效价高达211,ELISA抗体均显示阳性(OD630≥0.32),分别用剂量0.5 ml、1.0 ml和2.0 ml疫苗免疫后备母猪后,HI检测结果显示,3个剂量组免疫后1周HI抗体效价高于26,3周后达峰值,至免疫后4个月略有下降,2.00 ml剂量组HI效价最高(211.75)。ELISA检测结果显示,各剂量组在免疫后1周均转阳(OD630≥0.32),免疫后4～18周均维持较高水平。HI抗体效价和ELISA抗体水平与免疫剂量均呈正相关性。结果显示,利用NJ株病毒制备的灭活疫苗具有抗体产生快、效价高等特点,显示出良好的疫苗开发前景。

猪细小病毒BQ株灭活疫苗免疫剂量及免疫持续期的初步研究

为确定猪细小病毒(PPV)BQ株灭活疫苗(PPV-BQ)的免疫剂量及免疫持续期,本研究与市场上销售的2种PPV灭活疫苗A和B进行了比较。试验分6组,每组免疫3头PPV抗体阴性猪,1组～3组分别免疫BQ株灭活疫苗1mL、2mL、4mL,4组～5组按照说明书免疫A、B两种PPV灭活疫苗,6组为阴性对照组(免疫油佐剂)。两周后进行二免,定期检测血清抗体水平。结果表明,注射疫苗组均产生了PPV抗体,都能持续到免疫后24周。免疫不同剂量PPV-BQ各组间抗体水平差异不显著(p>0.05),PPV-BQ与PPV-A抗体水平差异不显著(p>0.05),与PPV-B抗体水平差异极显著(p<0.01),显著优于PPV-B。PPV-BQ1mL免疫剂量即可达到或超过同类产品的免疫效果,是较为理想的PPV灭活疫苗。

猪细小病毒感染症－乙型脑炎二联油乳剂灭活疫苗研究

用猪细小病毒（ＰＰＶ）、乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）二联油乳剂灭活疫苗对猪进行免疫，接种后无异常临床反应，不产生病毒血症，不散毒，免疫猪能产生高水平的免疫应答反应，可耐受ＰＰＶ和ＪＥＶ强毒攻击。宰杀时胎儿健活，从胎儿脑组织和内脏中未回收到病毒。该二联苗的免疫期为６个月，２～８℃条件下的保存期为１２个月。试验结果表明。

猪IL-18增强猪细小病毒灭活疫苗猪体细胞免疫效果的研究

为了研究猪白细胞介素18是否增强猪细小病毒(PPV)灭活疫苗在猪体免疫效果,分别将猪白细胞介素18与自制猪细小病毒灭活疫苗和猪细小病毒灭活疫苗联合免疫仔猪,并设猪白介素18和生理盐水对照组。免疫后分别用间接ELISA方法和流式细胞技术检测仔猪抗体水平变化和仔猪外周血T淋巴细胞亚群动态变化。结果显示,免疫后猪白细胞介素18联合灭活疫苗组抗体水平与无猪白介素18灭活疫苗组相似,但免疫后猪白介素18联合PPV灭活疫苗组的CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞所占比值均高于相应的PPV灭活疫苗组,但差异不显著,且CD4^+/CD8^+在正常范围内。研究证实猪白介素18主要增强PPV油乳剂灭活疫苗的细胞免疫应答。

水溶性酵母葡聚糖对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果的影响

为研究水溶性酵母葡聚糖作为免疫佐剂对猪细小病毒(PPV)灭活疫苗免疫效果的影响,将水溶性酵母葡聚糖与PPV灭活疫苗联合免疫小鼠,采用ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠血清中的抗体水平及IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌水平,应用流式细胞仪检测免疫小鼠CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞百分比值的动态变化。结果显示,与疫苗单独免疫组相比,酵母葡聚糖对抗体水平无明显影响,CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞数量增加,且均能不同程度诱导IL-4、IL-6、IFN-γ分泌。表明,水溶性酵母葡聚糖联合PPV灭活疫苗能够有效增强机体的免疫功能,水溶性酵母葡聚糖可以作为PPV的免疫佐剂。

猪转移因子增强猪细小病毒灭活疫苗猪体细胞免疫活性的研究

为探讨猪转移因子增强猪细小病毒灭活疫苗对猪体免疫效果,从健康猪的新鲜脾脏中提取转移因子,分别与自制猪细小病毒灭活油苗和猪细小病毒商品灭活苗联合免疫仔猪,并设猪转移因子和生理盐水对照组。免疫后分别用间接ELISA方法和流式细胞技术检测仔猪抗体水平变化和仔猪外周血T淋巴细胞亚群动态变化。结果显示,免疫后猪转移因子联合灭活疫苗组能有效提高抗体水平,且免疫后猪转移因子联合PPV灭活疫苗组的CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞比值均高于相应的PPV灭活疫苗组。表明猪转移因子主要增强PPV油乳剂灭活疫苗的细胞免疫应答。