鳞状细胞癌抗原、胃泌素释放肽前体、神经元特异性烯醇化酶对肺癌的诊断价值

目的探讨鳞状细胞癌抗原(SCCA)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)对肺癌的诊断价值。方法选取43例肺癌患者和35例肺部良性疾病患者分别作为肺癌组和良性组。采用化学发光分析仪、自动生化仪检测两组患者的血清ProGRP、NSE和SCCA水平。比较两组患者的SCCA、ProGRP和NSE水平,分析肺癌发生的影响因素和SCCA、ProGRP、NSE单独及联合检测对肺癌的诊断价值。结果肺癌组患者SCCA、ProGRP和NSE水平均明显高于良性组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。SCCA、ProGRP及NSE均是肺癌发生的独立危险因素(P﹤0.05)。SCCA、ProGRP及NSE联合检测诊断肺癌的AUC、灵敏度、特异度均高于三者单独检测。结论SCCA、NSE和ProGRP均在肺癌患者中高表达,可作为肺癌良好的血清肿瘤标志物,且联合检测对肺癌有较好的诊断价值。

前列腺癌血清前列腺特异性抗原白细胞介素-17白细胞介素-6肿瘤坏死因子-α表达水平与病理分期及预后的相关性研究

目的 分析血清前列腺特异性抗原(PSA)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平与前列腺癌患者病理分期和预后的相关性。方法 纳入2021年1月至2022年12月在我院接受治疗的120例前列腺癌患者作为研究对象,均进行血清PSA、IL-17、IL-6、TNF-α指标检测,比较不同肿瘤淋巴结转移分类(TNM)分期和前列腺癌格利森评分系统(Gleason)分级患者的血清PSA、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平,应用Spearman相关性分析法对血清PSA、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平与前列腺患者病例分期及预后的相关性进行分析。结果 不同TNM分期的血清PSA、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。不同Gleason分级的血清PSA、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。血清PSA、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平与前列腺患者T分期、N分期、M分期和Gleason分级呈正相关(P<0.05)。结论 检测前列腺癌患者的血清PSA、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平可作为病理分期和预后评估参考指标。

血清神经元特异性烯醇化酶、胃泌素释放肽前体、癌胚抗原检测对小细胞肺癌的诊断价值

目的探讨在小细胞肺癌患者中应用血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)、癌胚抗原(CEA)检测的临床价值。方法选取2023年01月-2023年12月期间收治的小细胞肺癌患者60例纳入研究组,另择取同期健康体检人员60例纳入对照组,两组均接受血清NSE、ProGRP、CEA检测,同时开展组间对比分析,探讨NSE、ProGRP、CEA单项检测及联合检测对小细胞肺癌的诊断结果及效能,并根据不同病理分期对小细胞肺癌患者进行亚组划分,比较不同亚组间患者NSE、ProGRP、CEA水平。结果较之对照组,研究组血清NSE、ProGRP、CEA水平均明显更高,P<0.05;较之NSE、ProGRP、CEA单项检测,其联合检测小细胞肺癌的漏诊率明显更少,准确度及敏感度则明显更高,P<0.05;较之研究组亚组局限期组,广泛期组血清NSE、ProGRP水平均明显更高,P<0.05。结论血清神经元特异性烯醇化酶、胃泌素释放肽前体、癌胚抗原作为小细胞肺癌病情发生发展的重要监测指标,在临床疾病诊断及病情评估方面均有重要作用。

血清细胞角质蛋白19片段抗原21-1、神经元特异性烯醇化酶、组织因子水平对肺癌患者术后发生肺栓塞的预测价值

目的探讨血清细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、组织因子(TF)水平与肺癌患者凝血功能指标的关系及对术后发生肺栓塞的预测价值。方法选取80例肺癌患者和80例肺良性病变患者,分别作为肺癌组和对照组,比较两组患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平及凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)、血小板计数],依据是否继发肺栓塞,比较栓塞和未栓塞肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平。血清CYFRA21-1、NSE、TF水平与凝血功能指标的相关性采用Pearson相关分析;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估CYFRA21-1、NSE、TF单独及联合检测对肺癌患者术后发生肺栓塞的预测价值。结果肺癌组患者血清CYFRA21-1、NSE、TF、血小板计数、D-D水平均明显高于对照组(P﹤0.01),PT明显长于对照组(P﹤0.01)。80例肺癌患者中,发生肺栓塞16例,未发生肺栓塞64例,发生肺栓塞肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平均高于未发生肺栓塞患者(P﹤0.05)。Pearson相关分析结果显示,肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE、TF水平与血小板计数、PT、D-D水平均呈正相关(P﹤0.05)。ROC曲线显示,CYFRA21-1、NSE、TF联合检测预测肺癌患者术后发生肺栓塞的AUC为0.847(95%CI:0.749~0.918),高于各指标单独检测。结论血清CYFRA21-1、NSE、TF水平在肺癌患者血清中异常升高,且与凝血因子D-D、PT、血小板计数均呈正相关,CYFRA21-1、NSE、TF联合检测对肺癌患者术后发生肺栓塞具有较高的预测价值。

猪T细胞表面抗原特异性单克隆抗体的研制及其特性鉴定

用从健康猪胸腺提取的 Ｔ 淋巴细胞作抗原免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠。取免疫鼠脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 骨髓瘤细胞融合，经 ３ 次克隆，共获得 １０ 株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。以细胞反应特异性试验、 Ｗ ｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ 分析、流式细胞计数（ Ｆ Ｃ Ｍ ）等方法，确定了对猪 Ｔ 细胞表面抗原特异性反应的单抗（ Ｍ ｃ Ａｂｓ），其中 ２ Ｄ９ 、３ Ｂ１ ０ 可以识别相对分子质量 ５０ ０００ 的 Ｔ 细胞膜蛋白，能标记 ９６％ 的胸腺细胞、８９％ 的外周血 Ｔ 淋巴细胞、８７％ 的脾 Ｔ 淋巴细胞，其特性与猪 Ｃ Ｄ２ 抗原相符；另一株 １ Ｇ１ ２ 可识别相对分子质量 ６３ ０００ 的 Ｔ 细胞膜蛋白，能标记 ９８％ 的胸腺细胞、９１％ 的外周血 Ｔ 淋巴细胞、７８％ 的脾 Ｔ 淋巴细胞，其特性与猪 Ｃ Ｄ５ 抗原相符。

外周血神经元特异性烯醇化酶、癌抗原-199、癌抗原-153与非小细胞肺癌临床分期、预后的关系

目的探讨外周血神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、癌抗原-199(cancer antigen-199,CA-199)、癌抗原-153(carbohydrate antigen-153,CA-153)水平与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者临床分期及预后的关系。方法选取2018年1月至2020年1月安徽省蚌埠市第三人民医院收治的80例NSCLC患者,根据预后分为无进展组21例和进展组59例。Logistic多因素分析影响NSCLC进展的危险因素;Spearman相关性分析术前分期与外周血NSE、CA-199、CA-153的关系;Kaplan-Meier法描绘2年总生存率(overall survival,OS)和无病生存率(disease free survival,DFS)曲线。结果肿瘤TNM分期、肿瘤组织学分级和NSE、CA-199、CA-153高水平为影响NSCLC进展的独立危险因素(P<0.05);不同TNM临床分期NSCLC患者外周血NSE、CA-199、CA-153水平差异有显著性(P<0.05);NSE、CA-199与TNM分期呈正相关(P<0.05);NSE、CA-199、CA-153低水平组中位OS和中位DFS高于高水平组(P<0.05)。结论外周血NSE、CA-199与NSCLC患者临床分期有关,NSE、CA-199、CA-153高水平的NSCLC患者预后较差。

癌胚抗原与神经元特异性烯醇化酶等肿瘤标志物联合检测对肺癌的诊断价值

目的探究肿瘤标志物用于肺癌临床诊断的价值。方法研究时间为2020年12月到2024年01月,选择对象是肺癌、肺部良性病变、健康体检者,例数均是86例,设为肺癌组、肺部良性病变组、健康体检组;汇总肺癌组患者的各项临床资料与检查结果,基于疾病类型(腺癌23例、鳞癌23例、小细胞癌40例)、病理特征【分化程度(低中分化40例、高分化46例)、淋巴结转移情况(转移52例、未转移34例)、TNM分期(Ⅰ-Ⅱ期36例、Ⅲ-Ⅳ期50例)】将肺癌患者分类。患者均遵从医嘱提供空腹血样,完成多项肿瘤标志物【癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原(CA153)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)】检测,统计比较结果,并分析肿瘤标志物和肺癌病理特征的相关性。结果比较四项肿瘤标志物,肺癌组、肺部良性病变组、健康体检组比较有差异(P<0.05);疾病类型不同、分化程度不同、淋巴结转移情况不同、TNM分期不同肺癌患者的比较有差异(P<0.05)。肺癌患者肿瘤标志物与疾病类型、分化程度、淋巴结转移情况、TNM分期存在相关性(P<0.05)。结论通过肿瘤标志物可辅助临床尽早诊断肺癌,与肺部良性病变鉴别,明确肺癌具体类型,还可分析患者的病理特征,为临床展开针对性治疗提供充足诊断依据。

荧光素标记检测乙型肝炎病毒表面抗原特异性杀伤性T淋巴细胞方法的探讨

用绿色荧光前体化合物CalceinAM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。通过对一系列标记条件的研究:不同浓度CalceinAM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度、不同洗涤次数、不同裂解液配方,确定CalceinAM荧光素标记法的最佳条件。用该方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的DNA疫苗免疫Balb/c小鼠对P815S细胞的CTL效应,E/T比为10时,杀伤效率接近饱和,达到65%。通过荧光显微镜直接观察杀伤后的P815S细胞,细胞破裂程度与计算出的杀伤效率有一定相关性。

B细胞受体(BCR)抗原特异性的研究进展

B细胞受体(BCR)是B细胞特异性识别和结合抗原产生适应性体液免疫应答的关键分子。B细胞分化过程中的基因重排和体细胞高频突变是形成BCR多样化的主要机制。BCR极大的多样性和独特的分子结构决定了抗原识别的多样性和特异性,形成了具有广泛抗原特异性的复杂B细胞库。因此,BCR抗原特异性信息是理解不同疾病适应性免疫特征的关键。随着B细胞相关研究技术的发展,如单细胞分选技术、高通量测序(HTS)技术、 B细胞受体与抗原特异性结合测序(LIBRA-seq)等,提高了将BCR序列与抗原特异性联系起来的能力。这有助于更好地理解体液免疫反应、探索疾病发病机制、监测疾病进展、设计疫苗、研发治疗性抗体和药物。我们主要总结了感染、疫苗接种、自身免疫性疾病及肿瘤的抗原特异性BCR相关研究,并以SLE为例对其自身抗体序列进行分析,其序列特征使自身抗原的识别成为可能。

前列腺特异性膜抗原表达水平对原发性肝细胞癌预后的预测价值

目的探讨前列腺特异性膜抗原(PSMA)表达水平与原发性肝细胞癌(HCC)临床病理特征和预后的关系。方法回顾性分析2014年1月—2015年12月中南大学湘雅医学院附属海口医院收治的100例HCC患者的临床资料,采用免疫组织化学染色(IHC)法检测HCC组织中PSMA和血管标记蛋白CD31的表达,根据PSMA表达水平将患者分为PSMA低表达组(n=72)和PSMA高表达组(n=28),分析HCC组织中PSMA表达水平与临床病理特征及预后的关系。采用Cox比例风险模型对HCC患者的预后影响因素进行单因素和多因素分析。结果HCC组织中PSMA表达水平与分化程度、T分期、淋巴结转移、TNM分期、Ki-67、随访期间远处转移、BCLC分期有关(P<0.05)。单因素、多因素Cox回归分析结果显示,PSMA高表达、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、Ki-67≥10%、BCLC分期Ⅲ-Ⅳ期是HCC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,PSMA低表达患者5年生存率较PSMA高表达患者显著延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PSMA高表达不利于HCC患者的预后,其或可作为HCC的预后指标和血管治疗靶点。

血清神经元特异性烯醇化酶、胃泌素释放肽前体、组织多肽抗原检测对非小细胞肺癌的诊断价值

目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、组织多肽抗原(TPA)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)检测对非小细胞肺癌的诊断价值。方法选取80例非小细胞肺癌患者作为肺癌组,另选取80例肺良性疾病患者作为对照组。比较两组患者血清NSE、ProGRP、TPA水平,比较血清NSE、ProGRP、TPA单独及联合检测对非小细胞肺癌的诊断效能。结果肺癌组患者血清NSE、ProGRP、TPA水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。血清NSE、ProGRP、TPA联合检测诊断非小细胞肺癌的灵敏度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为88.75%、79.78%、87.32%、0.662,均高于血清NSE、ProGRP、TPA单独检测。结论血清NSE、ProGRP、TPA联合检测可提高非小细胞肺癌的诊断效能。

阿来替尼治疗间变性淋巴瘤激酶阳性非小细胞肺癌疗效及患者血清糖类抗原125和神经元特异性烯醇化酶表达水平对疗效的预测分析

目的:探究阿来替尼治疗间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性非小细胞肺癌(NSCLC)疗效及患者血清糖类抗原125(CA125)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达水平对效果的预测作用。方法:收集接受阿来替尼靶向治疗的60例ALK阳性NSCLC患者为研究对象。评估患者持续治疗8周后的临床效果,测定比较不同疗效患者血清CA125和NSE水平,分析血清CA125和NSE与阿来替尼治疗效果的关系,受试者工作特征(ROC)曲线明确血清CA125和NSE预测阿来替尼治疗效果欠佳的价值。结果:60例患者临床客观控缓解率(ORR)为56.67%,疾病缓解率DCR为76.67%。与治疗前比较,完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)患者血清CA125和NSE水平均明显下降,疾病进展(PD)者显著升高(均P<0.05)。PD患者治疗前和治疗后的血清CA125和NSE水平>SD>PR>CR(均P<0.05)。疗效欠佳者治疗前血清CA125和NSE水平明显高于疗效良好者(均P<0.05),是影响患者阿来替尼治疗效果的危险因素(均P<0.05)。ROC显示,治疗前血清CA125和NSE水平均对阿来替尼治疗效果欠佳均有一定预测价值,灵敏度和特异度分别为65.4%、91.2%和69.2%、88.2%,两者联合能明显提高阿来替尼治疗效果欠佳的预测灵敏度(96.2%)。结论:阿来替尼对于ALK阳性NSCLC具有一定治疗效果。治疗前患者血清CA125和NSE是影响治疗效果的危险因素,持续治疗后疾病得到缓解和稳定者血清CA125和NSE明显下降,疾病进展者会进一步升高,两者联合测定对预后不良具有良好预测价值。

泛素特异性肽酶22、滋养层细胞表面抗原-2表达与鼻咽癌临床病理特征的关系及对预后的影响

目的探讨泛素特异性肽酶22(USP22)、滋养层细胞表面抗原-2(Trop2)表达与鼻咽癌(NPC)病人临床病理特征的关系及对预后的影响。方法选取2014年1月至2016年6月安阳市眼科医院NPC病人及其组织标本92例作为观察组,另选取同期慢性鼻咽炎病人及其组织标本95例作为对照组,检测对比两组USP22、Trop2蛋白表达水平及USP22、Trop2诊断价值。比较不同临床病理特征病人USP22、Trop2蛋白表达水平及其与NPC临床病理特征关联性。并对比不同USP22、Trop2表达水平病人3年无进展生存期及总生存期。结果观察组USP22(59.78%比12.63%)、Trop2(66.30%比15.79%)蛋白阳性表达率高于对照组(P<0.05);logistic回归显示:TNM分期、淋巴结转移、分化程度等3个因素均为USP22、Trop2蛋白表达的影响因素或关联因素(P<0.05);USP22、Trop2联合诊断准确性、敏感性高于二者单一诊断;TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、淋巴结转移的NPC病人组织标本中USP22、Trop2蛋白阳性表达率高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移者(P<0.05);USP22、Trop2蛋白水平与TNM分期、淋巴结转移呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05);USP22、Trop2蛋白阳性表达病人3年总生存率、无进展生存率低于阴性表达病人(P<0.05);USP22蛋白、Trop2蛋白高危组、低危组生存率对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Trop2、USP22蛋白表达水平在NPC病人中呈异常高表达状态,与TNM分期、分化程度、淋巴结转移存在一定关联性,加强Trop2、USP22蛋白表达水平联合检测,对早期识别NPC、评估预后具有重要指导意义。

两种白血病细胞抗原负载DC的体外诱导特异性CTL应答的比较

目的: 比较树突状细胞(DC)与白血病细胞融合及白血病细胞冻融抗原负载DC两种白血病DC疫苗诱导抗原特异性CTL应答的能力.方法: 采用羟乙基淀粉-Ficoll两步法分离外周血单个核细胞(PBMC), 通过贴壁2 h获得黏附的单核细胞, 用GM-CSF加IL- 4诱导培养5 d收获细胞.将细胞分为4组: A组将K562细胞或原代慢性粒细胞白血病(CML)细胞在500 g/L PEG-100 mL/L DMSO诱导下与DC融合; B组加入相应细胞数量的白血病细胞冻融抗原; C组将K562细胞或CML细胞与DC共培养; D组: 单独DC培养组.融合前以红色荧光染料PKH26标记K562细胞, 采用流式细胞仪(FCM)检测PKH26/FITC-抗HLA-ABC抗体双标细胞并评估融合率.培养的第6天, 加入TNF-α诱导DC成熟, 然后分别与自体T细胞共培养, 用MTT比色法检测各组CTL对靶细胞的杀伤活性.结果: GM-CSF加IL- 4和TNF-α依次诱导成熟的DC具有经典的DC的形态和表型特征, 在PEG-DMSO的介导下, DC与白血病细胞的融合率为(17.33～29.94)%.两种抗原负载方案激活的CTL均对表达K562抗原的细胞具有特异性的细胞毒作用.在效靶比相同时, 融合组诱导CTL的杀伤活性强于冻融抗原致敏DC组.结论: 与冻融抗原致敏的DC相比, DC与白血病细胞融合细胞递呈抗原的效率更高, 体外诱导的CTL特异性杀伤靶细胞的作用更强, 有可能用于白血病的免疫治疗.

巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1在大鼠2型星形胶质细胞中的表达

目的观察1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)是否表达神经干细胞的标志物、是否具有神经干细胞的特性。方法取新生大鼠脑皮质,体外培养纯化的O-2A祖细胞、T1A和T2A,应用激光共焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达;观察O-2A祖细胞、T1A和T2A在碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)的培养液中生长方式的改变。结果巢蛋白在O-2A祖细胞和T2A中表达,T1A不表达;SSEA-1仅在T2A中表达。在干细胞培养基中培养10d,T2A形成能增殖和连续传代的细胞球,细胞球巢蛋白标记阳性,贴壁后分化细胞具有神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞样形态;但相同培养条件下的O-2A祖细胞和T1A生长方式无改变。结论巢蛋白和SSEA-1在两型星形胶质细胞中的表达存在差异,T2A具有神经干细胞的某些生物学特性。

组织多肽特异性抗原在肝癌的表达及与癌细胞增殖状态的关系

为探讨组织多肽特异性抗原 (TPS)在肝癌的表达及其血清水平与癌细胞增殖活性的关系 ,选择 96例肝癌手术病人 ,ELISA法测定术前血清TPS水平 ,术后肝癌组织切片做角蛋白 18(CYK18)、增殖细胞核抗原 (PC NA)的免疫组化 (IHC SABC)染色 ,并比较血清TPS水平与PCNA阳性的关系。结果见所有肝癌组织切片CYK18、PCNA染色均为阳性 ,其中PCNA染色 +6 0例 (6 2 5 % ) , 2 5例 (2 6 0 % ) , 8例 (8 3% ) , 3例 (3 1% ) ;各组中位TPS血清水平随PCNA染色阳性强度的增加而增高 (P <0 0 1)。表明肝癌细胞膜上高度表达CYK18。

基于HBV核心抗原CTL表位的治疗性多肽在体诱导抗原特异性细胞免疫应答的研究

目的 探讨基于表位的治疗性多肽抗原组分、结构与诱导免疫应答之间的关系。方法 用分子设计的理论和方法 ,设计基于HBV抗原免疫优势性CTL、Th及B细胞表位的 3种治疗性多肽候选疫苗分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,并经HPLC纯化、鉴定。以BALB c(H 2 d)纯系小鼠为实验对象 ,进行体内免疫学功能研究。结果 所设计治疗性多肽分子可在体诱导较强的抗原特异性CTL应答和适度的抗体反应。Th、B细胞表位的引入可增强CTL表位肽的效应。结论 提示在治疗性表位多肽疫苗的分子设计中 ,引入B -、Th表位可显著提高CTL表位肽的免疫原性。

结核杆菌抗原特异性激发人γδT细胞活化信号涉及Ras/Erk途径

目的 :探讨Ras Erk通路是否参与结核杆菌低分子多肽抗原 (Mtb Ag)启动的γδT细胞活化信号转导途径。方法 :分离获取PBMC ,用佛波醇酯 (PMA)和离子霉素 (IM) ,CD3mAb或Mtb Ag刺激不同时间 ,或PBMC先经PD980 5 9处理后再刺激培养 ;用荧光单抗染色后在流式细胞仪测定细胞CD6 9分子的表达 ;计数培养扩增 10天的细胞数量。结果 :PBMC用PMA +IM刺激 6小时 ,总T细胞和γδT细胞中的CD6 9表达均达高峰 (均 >99% ) ,用CD3mAb刺激 2 4小时 ,均达高峰 (均在 5 5 %左右 ) ,用Mtb Ag刺激 2 4小时 ,亦均达高峰 ,但总T细胞和γδT细胞中CD6 9分别为 16 .0 %和 75 2 % ;用PD980 5 9预处理PBMC ,可明显抑制Mtb Ag激活的γδT细胞CD6 9表达和γδT细胞的增殖。结论 :Mtb Ag可特异性激活γδT细胞 ,其活化信号转导需通过Ras Erk通路。

猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白在干酪乳杆菌中的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定

将分别编码猪瘟病毒T细胞表位E290多肽和猪细小病毒主要保护性抗原VP2蛋白的重组基因插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2-E290,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白的乳酸菌共表达系统,经2%乳糖在MRS培养基中的诱导表达,对诱导表达的菌体及培养上清液进行SDS-PAGE检测表明,有约70kDa蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符。Western blot分析结果表明所表达的蛋白具有与天然病毒蛋白一样的抗原特异性。以诱导表达上清液作为抗原进行的间接ELISA实验也表明,重组的目的蛋白获得了分泌表达。将该重组干酪乳杆菌经口服接种途径免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品检测小鼠产生抗PPV的特异性sIgA抗体,采集血液样本检测血清中抗PPV及抗E290的特异性IgG。结果表明分泌型的重组菌pPG-VP2-E290/L.casei 393免疫小鼠能够产生明显的抗体水平,为重组猪瘟与猪细小病毒乳酸菌口服活菌疫苗的研制奠定了重要的物质基础。