猪肠源性枯草芽孢杆菌耐逆性研究

研究了猪肠源性枯草芽孢杆菌对逆性因子的耐受性。将猪肠源性枯草芽孢杆菌作如下试验处理,在pH为2.0、3.0和4.0的营养液中培养3、6和9 h,在含0.1%、0.3%和0.5%胆盐营养液中培养4和8 h,在70、80、90和100℃的营养液中处理10和20 min,在Cu和Zn离子浓度分别为0、100、200、300、400和500 mg·L-1的营养液中培养24 h,测定细菌存活率;在常规营养液中和37℃条件下培养24和48 h,测定培养液中细菌分泌的蛋白酶和淀粉酶活性。试验结果显示,猪肠源性枯草芽孢杆菌对酸和胆盐有较强的耐受性,对70～90℃的高温也有不同程度的耐受力;微量元素铜离子对枯草芽孢杆菌的增殖有促进作用,但锌离子对其有抑制作用;枯草芽孢杆菌有较强的产蛋白酶能力,但产淀粉酶性能较弱。基于试验结果推断,猪肠源性枯草芽孢杆菌对酸、胆盐、高温和铜离子的耐受性较强。

仔猪肠源枯草芽孢杆菌体外耐受性研究

研究了分离的仔猪肠源枯草芽孢杆菌体外耐受性。以枯草芽孢杆菌的存活率为考察指标,通过耐酸性、耐胆盐、耐高温试验来研究菌株的体外培养特性。结果:耐酸性试验中枯草芽孢杆菌在p H为2.0的培养基中培养3 h的存活率仍能达到64.7%;耐胆盐试验中其在0.1%和0.3%胆盐培养基中培养8 h存活率均在60%以上;耐高温试验中,70℃、90℃和100℃对其处理20 min存活率分别为70.4%、29.3%和0.2%。结果表明:仔猪肠源枯草芽孢杆菌对酸及胆盐有较强耐受性,对高温有一定耐受性,试验为进一步研制仔猪肠源枯草芽孢杆菌制剂研究提供参考。

猪肠源型枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为了筛选具有优良生物活性的猪肠源型枯草芽孢杆菌,差异化开发出功能性微生态制剂,试验以高温孵育的健康猪肠道内容物为分离基质,金黄色葡萄球菌为指示菌,通过胆盐耐受性分离、指示菌的对峙培养和产酶试验进行菌株筛选,并综合菌株形态特征及16S rDNA基因序列进行鉴定。另外,采用琼脂扩散法对菌株发酵上清液进行抑菌谱及温度、胆盐、pH值、人工胃液和肠液的耐受性及溶血性的考察。结果表明:肠道内容物中有多株可以抑制指示菌和产酶的细菌,其中有2株不仅具有较好的抑菌性能,而且同时具有蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和木聚糖酶的活性,其中N65菌株的抑菌性能和产酶活性最好。N65菌株与枯草芽孢杆菌的亲缘关系最近,综合其形态特征鉴定为枯草芽孢杆菌。N65菌株发酵上清液对金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、无乳链球菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌均有较好的抑制效果,抑菌谱广,而且具有良好的温度、胆盐、pH值及人工胃液和肠液的耐受性,并且溶血率低,无溶血风险。说明猪肠源型枯草芽孢杆菌N65具有较好的抗逆、抑菌、产酶等益生特性,具有开发为饲用抗生素替代类功能性微生态制剂的潜力。

枯草芽孢杆菌胶囊对溃疡性结肠炎患者炎症因子、氧化应激和肠黏膜功能的影响

目的探讨枯草芽孢杆菌胶囊对溃疡性结肠炎(UC)患者炎症因子、氧化应激和肠黏膜功能的影响。方法选择2022年3月至2023年3月解放军总医院京西医疗区收治的UC患者118例作为研究对象,根据治疗方案分为对照组和研究组各59例。对照组采用康复新液保留灌肠治疗,研究组在对照组基础上口服枯草芽孢杆菌胶囊治疗。比较2组患者治疗前后炎症因子、氧化应激和肠黏膜功能的改善情况。结果治疗后,研究组患者炎症因子C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-8(IL-8)水平均低于对照组,而研究组氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平高于对照组,丙二醛(MDA)水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者肠黏膜功能指标D-乳酸(D-LAC)、乳酸(LAC)、脂多糖(LPS)和二胺氧化酶(DAO)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论枯草芽孢杆菌胶囊治疗UC可调节炎症因子、氧化应激指标水平,改善肠黏膜功能。

枯草芽孢杆菌和猪源乳酸杆菌混合饲喂对仔猪肠绒毛发育的影响

本研究主要探讨混合饲喂枯草芽孢杆菌RJGP16和猪源乳酸杆菌B1对仔猪肠道肠绒毛发育的影响,以及这两种益生菌在体内拮抗大肠埃希氏菌K88的能力。试验选取8窝新生仔猪为研究对象,分别于0、7、11和26日龄经口腔灌服枯草芽孢杆菌菌液(活菌数1.0×109 CFU·mL-1)、猪源乳酸杆菌菌液(活菌数1.0×109 CFU·mL-1)、枯草芽孢杆菌和猪源乳酸杆菌混合菌液(体积比1∶1),以及对饲喂混合菌液的试验组进行大肠埃希菌K88的攻毒试验。试验结果表明,同时饲喂枯草芽孢杆菌和猪源乳酸杆菌能显著提高十二指肠(P<0.05)和回肠(P<0.01)的肠绒毛高度,增加十二指肠(P<0.05)和空肠(P<0.01)绒毛的数量,降低空肠(P<0.05)和回肠(P<0.01)的隐窝深度,以及增加十二指肠(P<0.05)、空肠(P<0.05)和回肠(P<0.01)的绒腺比。此外,同时饲喂这两种益生菌能有效地拮抗大肠埃希菌K88对仔猪肠道上皮的损伤。笔者的研究提示枯草芽孢杆菌和猪源乳酸杆菌对肠道绒毛的发育起到了促进作用,并能有效地提高抗感染能力。

抗鸡源大肠杆菌的枯草芽孢杆菌鉴定及代谢产物理化特性研究

本试验采用鸡源大肠杆菌O2作为指示菌,对29株芽孢杆菌的发酵产物进行了抑菌效果检测,获得了4株抑菌圈在15mm以上的芽孢杆菌;在此基础上,对其代谢产物进行了抑菌谱的测定及理化稳定性试验,发现其中一株芽孢杆菌对革兰氏阳性、阴性细菌及真菌均具有良好的抑菌和杀菌效果,理化性质稳定,对鸡源大肠杆菌抑菌圈达到20mm以上;生理生化鉴定及16S rDNA测序结果显示该菌为一株枯草芽孢杆菌,命名为枯草芽孢杆菌GD株。

猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本研究旨在分离、鉴定出经过猪肠道驯化的枯草芽孢杆菌,研究其耐高温、耐酸、耐胆盐、抑菌性等生物学特性,为猪微生态饲料添加剂的研发提供候选菌株。试验以新鲜的猪粪便为材料,通过细菌培养特征、形态观察、生化鉴定、16SrDNA序列分析,分离、鉴定出5株枯草芽孢杆菌;对所鉴定的枯草芽孢杆菌进行高温处理、酸处理和胆盐处理后,比较其耐高温、耐酸、耐胆盐的能力;通过对常见病原菌的抑菌性的测定,比较其抑菌效果。结果表明:5株枯草芽孢杆菌均具有一定的生物学特性,但性能参差不齐,其中BS7菌株整体特性最好。因此该批从猪粪便中分离的枯草芽孢杆菌中BS7菌株具有较好的生物学特性,可以作为猪微生态饲料添加剂的候选菌株。

枯草芽孢杆菌对环境耐受性和产中性蛋白酶能力研究

为了探究枯草芽孢杆菌对环境耐受性及产中性蛋白酶的能力,试验模拟饲料加工温度、胃肠道酸性环境、胆盐对枯草芽孢杆菌进行环境耐受性评定,在单因素(pH值、时间、温度、接种量、碳源、碳源添加量和金属离子)试验基础上采用正交试验以中性蛋白酶活力为评定指标,对枯草芽孢杆菌培养条件进行优化。结果表明:枯草芽孢杆菌对温度、胃肠道酸性环境和胆盐均具有一定耐受性;单因素试验中最佳pH值为5,培养时间为24 h,培养温度为30℃,接种量为2%,碳源为淀粉,淀粉添加量为3%;金属离子Mg^(2+)、Fe^(2+)、Mn^(2+)、Cu^(2+)和Zn^(2+)对产酶均具有抑制作用,不在培养基中添加金属离子。正交试验优化后枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶活力最佳培养条件为pH值6,淀粉添加量3%,培养温度35℃,培养时间24 h,枯草芽孢杆菌种子菌液接种量3%,在最优条件下,酶活力可达40.05 U/mL。说明枯草芽孢杆菌可耐受动物胃肠道环境且培养条件优化后中性蛋白酶酶活力显著提高。

枯草芽孢杆菌B579对黄瓜枯萎病的防治及其诱导抗性研究

【目的】探究枯草芽孢杆菌B579对黄瓜枯萎病菌的生防效果及诱导抗性机理。【方法】采用平板对峙试验和温室盆栽试验,检测病原菌生长及形态变化、植物生长量、叶片防御酶活性、丙二醛含量、防御相关基因表达量等指标。【结果】枯草芽孢杆菌B579对黄瓜枯萎病菌具有较强的抑制作用,抑菌圈周围菌丝出现粗细不均、膨胀、断裂等现象。盆栽试验表明B579对黄瓜枯萎病的防治效果为78.80%。B579处理组黄瓜幼苗的株高、茎粗、鲜重、干重分别比对照组增加了13.87%、4.17%、15.15%、12.77%。相比单独接种病原菌(FOC)处理,接种B579再接种病原菌(B579+FOC)处理在第4天和第7天显著提高了黄瓜叶片苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,并减少黄瓜叶片丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果表明,接种B579再接种病原菌后,黄瓜叶片防御相关基因LOX、PR1、PR3和CAT表达量在第4天和第7天显著高于其他处理(P<0.05)。【结论】枯草芽孢杆菌B579能够通过直接抑制病原菌生长和使黄瓜产生诱导抗性来有效防治黄瓜枯萎病。

软枣猕猴桃不定根提取物对枯草芽孢杆菌的抑菌活性及其机制研究

为探明软枣猕猴桃不定根的实际应用,该研究调查了不定根甲醇提取物对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的抑菌活性及其机制。结果表明:提取物对枯草芽孢杆菌抑制效果良好,抑菌圈直径达到21.33 mm,最低抑菌浓度为4 mg·mL^(-1);经提取物处理后的枯草芽孢杆菌的胞外碱性磷酸酶、核酸、蛋白质和电解质水平明显提高,表明提取物破坏了菌细胞膜使其胞内物质渗漏;扫描电子显微镜观察结果显示提取物处理后的枯草芽孢杆菌菌细胞膜皱缩,并有分泌物积聚;提取物抑制枯草芽孢杆菌的呼吸,提取物与磷酸钠的呼吸叠加率(25.0%)较小,推测提取物可能通过调控磷酸戊糖途径(Hexose Monophosphate Pathway,HMP)抑制菌呼吸。进而,对HMP中关键酶之一的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose 6-phosphatedehydrogenase,G6PD)的活性进行了检测,发现提取物处理后G6PD活性降低,从而证明了提取物参与调控HMP。该研究结果可以为今后利用软枣猕猴桃不定根生产抑菌相关产品提供参考。

饲粮添加枯草芽孢杆菌影响实验性感染致病性大肠杆菌的断奶仔猪肠道健康

背景:越来越多的证据支持补充可直接饲喂的微生物(DFM)对断奶仔猪的生产性能、健康状况和免疫反应的有益作用。因此,本研究的目的是研究日粮中添加枯草芽孢杆菌(DSM 25841)对实验感染病原性F-18大肠杆菌(E.coli)的断奶仔猪的生长性能、腹泻、肠道通透性和免疫力的影响。结果:与非刺激的对照组相比,F18大肠杆菌感染降低了(P<0.05)生长性能和肠绒毛高度,而,空肠中的腹泻和空肠细胞通透性和细胞旁通遗性增加(P<0.05)。枯草芽孢杆菌的补充线性增加了木肠杆菌感染接种后第0-5 d(PI)(P<0.05)和d0-11 PI(P=0.058)仔猪的平均日增重。与饲喂对照日粮的大肠杆菌感染仔猪相比,,补充高剂量枯草芽孢杆菌在d5和PI后的第11 d后降低了跨细胞和旁细胞通透性(P<0.05)。大肠杆茴感染上调(P<0.05)SLCSA10(可溶性载体家族5成员10)和MUC2(粘蛋白2)在PI后的第5 d后的mRNA表达,但是在饲喂对照日粮的仔猪空肠黏膜第11天PI下调SLC5A10、MUC2和CLDNI的表达(P<0.05)。补充枯草芽孢杆菌线性上调被大肠杆菌感染的仔猪空肠黏膜PI后的第5d后的CFTR和Z01以及PI后的第11 d的SLC5A10和MUC2的mRNA表达(P<0.05)。此外,大肠杆菌感染增加了断奶仔猪回肠粘膜中几种免疫基因(IL 1A,IL1B和IL7在PI后的第5 d,ILIB,lL,1L7和TNF在PI后的第5 d)的mRNA表达(P<0.05)。在对照组日粮中添加枯草芽孢杆菌线性下调大肠杆菌感染仔猪回肠粘膜中PI后的第5d的ILIA(P=0.07)和PI后的第11 d的IL6(P<0.0S)。结论:补充枯草芽孢杆蔺(DSM 25841)可提高实验感染致病性大肠杆菌的断奶仔猪的生长速度并改善其肠道屏障功能。

枯草芽孢杆菌Czk1诱导橡胶树抗病性相关防御酶系研究

【目的】研究生防枯草芽孢杆菌Czk1对橡胶树体内防御酶活性的影响,探讨其诱导橡胶树抗病性机理,为Czk1在生物防治领域的应用打下基础。【方法】以过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)5种防御酶作为植物抗病性反应指标,用Czk1菌株发酵液1倍原液及10、100倍稀释液喷洒处理橡胶叶片,以喷洒LB液体培养基为对照,于不同时段测定各防御酶活性;按照生防菌与炭疽病菌接种顺序的不同,测定橡胶树炭疽病菌及生防菌对橡胶植株抗性相关酶活性的影响。【结果】经Czk1发酵液10倍稀释液处理的橡胶树叶片中CAT、POD、PAL和PPO 4种酶活性最高,诱导植株抗病性效果最佳,各酶活峰值分别达4264.62、28946.18、186.67和53.70 U/g,为对照组的5.24、6.34、3.19和3.38倍;而叶片中SOD活性最高的为Czk1发酵液1倍原液处理组,酶活峰值为1344.53 U/g,为对照组的5.19倍。先喷洒Czk1发酵液后接种病原菌的处理组,橡胶树叶片CAT、SOD、POD、PAL和PPO活性均显著高于其他处理组,各酶活峰值分别为4129.02、640.96、7416.94、173.35和71.59 U/g,为对照组的4.20、2.08、2.50、2.56和7.64倍。【结论】喷施生防菌Czk1稀释液可促使橡胶树抗病相关酶活性升高,诱导橡胶植株产生系统抗性。诱导抗性可能是枯草芽孢杆菌防治橡胶树真菌病害的重要机制之一。

生防枯草芽孢杆菌L1特性的初步研究

通过对峙培养，测定出枯草芽孢杆菌L1的抑菌谱较宽，特别是对水稻纹枯病菌、大豆菌核病菌、禾谷镰孢菌、辣椒灰霉病菌、玉米小斑病菌抑菌效果明显；枯草芽孢杆菌L1不同发酵时间经湿热灭菌处理后，5d发酵液中抑菌活性物质含量最高，对水稻纹枯病菌菌丝生长抑制率达83．23％，发酵液随时间延长抑菌效果不再增加；枯草芽孢杆菌L1抑菌活性物质对温度不敏感；枯草芽孢杆菌L1发酵液用硫酸铵梯度沉淀法提取粗蛋白在硫酸铵饱和度达60％～70％（不含60％）沉淀的活性物质抑菌效果最好，对水稻纹枯病菌平均抑菌半径达1．15；枯草芽孢杆菌L1对玉米、大豆、小麦、番茄、菜豆、黄瓜、水稻无致病性，而且还有保鲜和促生作用。

枯草芽孢杆菌B1514可湿性粉剂的研制及其对小麦纹枯病的防效

以对小麦土传病原菌有拮抗作用兼具秸秆降解作用的枯草芽孢杆菌B1514为功能菌株,通过对发酵载体、润湿剂、分散剂和稳定剂进行筛选,确定枯草芽孢杆菌B1514可湿性粉剂的最佳配方,并测定其拌种对小麦幼苗生长及纹枯病发生的影响。结果表明,该可湿性粉剂最佳配方为摇瓶发酵液70%、硅藻土18%、CMC-Na 4.8%、PEG8000 7.2%。以此配方制备的菌剂芽孢含量达1.70×10^9cfu/g,悬浮率为72%,p H值为6.8,润湿时间为135 s,细度（≤44μm）通过率为95%,水分含量为3.8%,各指标均符合商品制剂的标准。盆栽试验结果显示,每100 kg种子用500 g、600 g和700 g B1514可湿性粉剂拌种均可显著提高小麦发芽率、发芽指数和简易活力指数;试验第19天时,每100 kg种子用500 g可湿性粉剂拌种处理的小麦株高、发根力和植株干质量均显著高于对照药剂30 g/L苯醚甲环唑悬浮种衣剂和2%戊唑醇干粉拌种剂拌种处理,提高幅度分别在10.23%-23.65%和7.29%-31.24%,同时该处理对小麦苗期纹枯病的防效达71.61%。初步确定枯草芽孢杆菌B1514可湿性粉剂的最佳拌种剂量为每100 kg种子用500 g药剂。

枯草芽孢杆菌CS16诱导香蕉抗病性相关防御酶系的研究

以多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、β-1,3-葡聚糖酶等5种防御酶作为植物抗病性反应指标,研究枯草芽孢杆菌CS16发酵液及其上清液对香蕉体内防御酶活性的影响,探讨其诱导香蕉抗病性机理。结果表明:CS16发酵液和上清液处理香蕉苗后,均能诱导香蕉叶片中PPO、POD、SOD、PAL、β-1,3-葡聚糖酶等5种防御酶活性变化。CS16发酵液处理可诱导香蕉植株防御酶出峰数目多、持续时间长。说明CS16菌株及其胞外代谢物在一定程度上能够诱导香蕉抗病性,推测CS16菌株诱导香蕉抗病性是其生防机制之一。

侧孢短芽孢杆菌碱性蛋白酶基因BLG4在枯草芽孢杆菌WB600中的高效表达

侧孢短芽孢杆菌G4菌株在侵染线虫的过程中可以分泌蛋白酶,降解线虫体壁,从而帮助细菌侵入宿主体内.在本文中,侧孢短芽孢杆菌的胞外蛋白酶BLG4基因经克隆后插入到改造后的枯草芽孢杆菌表达载体pWT22中,构建重组表达质粒pWT22-BLG4.构建成功的重组质粒通过化学转化法转入枯草芽孢杆菌蛋白酶缺失菌株WB600中,转化子pWT22-BLG4/WB600在IPTG(1.0 mmol.L-1)的诱导下,发酵液上清中的蛋白酶活可达到620 U.mL-1,高于出发菌株G4的BLG4酶活(240 U.mL-1).经SDS-PAGE分析,重组子pWT22-BLG4/WB600产生了一条分子质量约为30 ku的条带,该条带的大小与侧孢短芽孢杆菌G4上清发酵液中BLG4条带的大小一致.而未经IPTG诱导的重组子pWT22-BLG4和经IPTG诱导的WB600则未出现该条带.结果证明侧孢短芽孢杆菌G4的碱性蛋白酶基因BLG4已在枯草芽孢杆菌WB600中获得了成功表达.重组蛋白酶具有与侧孢短芽孢杆菌G4产生的BLG4蛋白酶同样的酶学性质.同时,重组蛋白酶具有明显的杀线虫和体壁降解能力,表明其在线虫生物防治中将有广泛的应用前景.

枯草芽孢杆菌Tpb55抗烟草普通花叶病毒(TMV)活性研究

利用三生-NN烟测定Tpb55菌悬液对烟草普通花叶病毒(TMV)钝化、预防和治疗作用,结果表明,Tpb55菌悬液对TMV具有较好的钝化、预防和治疗效果,枯斑抑制率分别为96.15%、79.72%和65.71%。选用易感TMV烟草品种K326为试验材料,测定Tpb55对TMV控病作用,结果表明,先接种Tpb55菌液再接种TMV的烟株,发病程度明显低于接种TMV再接种Tpb55菌液的烟株;不论在烟株接种TMV前或后,用Tpb55菌液处理烟株的叶片与只接种病毒烟株相比,叶片内过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均显著提高,以接毒前Tpb55菌液处理的烟株活性水平最高。从本试验结果来看,Tpb55具较强的抗TMV活性,可通过直接接触钝化作用及诱导烟草抗病性来抑制TMV侵染。

枯草芽孢杆菌液体生物被膜形成中对镉离子耐受性研究

生物膜法被广泛用于污水处理领域,而污水中含有的重金属离子会严重影响生物被膜的稳定性,降低污水处理效率。该研究以污水处理系统中常见的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为研究对象,分析了菌体在液体生物被膜形成过程中对镉离子的耐受性。结果表明,枯草芽孢杆菌胞外基质合成的抑制因子Sin R缺失后,突变株耐受Cd2+离子的能力明显增强,说明胞外基质能够提高菌体对Cd2+的耐受性;△eps G突变株比△tas A突变株对Cd2+更敏感,说明胞外多糖比胞外蛋白起到更显著的保护作用;同时发现△eps G突变株和△tas A突变株可以共享分别产生的胞外蛋白和多糖;该研究还首次发现硬水软化剂EDTA-2Na能够提高菌株形成生物被膜过程中对Cd2+的耐受性。该研究对于提高污水处理系统中生物被膜的初始驯化速度和生物被膜稳定性具有一定的理论指导和实践意义。

枯草芽孢杆菌生物学特性的研究

从饲料应用的角度研究了1株枯草芽孢杆菌的生长曲线及耐酸性、耐高温和耐胆盐能力。结果表明:枯草芽孢杆菌的菌体质量浓度在34 h时达到最高值。在pH 2处理6 h后存活率超过76%,90℃处理10 min后存活率约为80%。研究表明:枯草芽孢杆菌具备良好的饲料学特性,是优良的益生菌菌株。

枯草芽孢杆菌Tpb55抗烟草普通花叶病毒活性研究

利用三生-NN烟测定Tpb55菌悬液对烟草普通花叶病毒(TMV)钝化、预防和治疗作用结果表明,Tpb55菌悬液对TMV具有较好的钝化、预防和治疗效果,枯斑抑制率分别为96.15%、79.72%和65.71%。为进一步揭示Tpb55抗毒机理,选用易感TMV烟草品种K326为实验材料,研究以Tpb55对烟草花叶病毒(TMV)进行预防和治疗处理,测定烟草中与抗病毒性相关的部分生理生化指标的变化。结果表明,先用Tpb55菌液再接种毒液处理的烟株,对TMV的抑制作用优于先接种毒液再接种菌悬液处理,说明Tpb55对TMV的预防具有积极效果;不论在烟株接种毒液前或后,用Tpb55菌液处理烟株的叶片与只接种毒液的相比,叶片内过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均显著提高,以接毒前Tpb55菌液处理的烟株活性水平最高。从本试验结果来看,Tpb55具较强的抗TMV活性,可通过直接接触钝化作用及诱导烟草抗病性提高来抑制TMV侵染。