响应面优化猪苓菌核多糖超声辅助提取工艺及抗氧化活性分析

为提高猪苓菌核活性多糖提取效率,应用超声辅助技术提取猪苓菌核多糖,通过单因素实验结合响应面法优化考察提取时间、超声功率、提取温度和液料比对多糖得率的影响并确定最佳提取工艺,同时应用DPPH自由基清除能力和还原力测试评估抗氧化活性。结果表明,猪苓菌核多糖得率与提取温度和超声功率、提取温度和液料比、超声功率和液料比、液料比和提取时间之间的交互作用显著相关,最佳提取工艺为:提取温度72.0℃、提取功率300 W、提取时间65 min和液料比22 mL/g,最大得率为2.47%±0.03%。提取液经分级醇沉制备得到PUPF30、PUPF60和PUPF80,多糖含量分别为39.99%、58.60%、50.35%,蛋白含量分别为25.80%、14.42%、25.54%;测试浓度范围内,最大DPPH清除率分别为50.63%、83.95%、87.48%,最大总还原力(A700 nm)分别为0.828、1.433、1.525。经响应面优化的超声辅助提取工艺适合用于猪苓菌核活性多糖的有效提取制备,本研究为猪苓菌核多糖的进一步开发利用奠定了基础。

猪苓菌核林下仿野生栽培技术推广

猪苓菌核是辽宁本溪地区主要栽植经济作物之一,也是山区林农发展林下经济的优选项目。因此,从栽培技术推广视角着手,分析猪苓菌核林下仿野生栽培技术要点,包括整地、栽植、管理采收等方面,以供参考。

与蜜环菌共生过程中猪苓菌核不同部位糖类成分的含量研究

目的 通过猪苓菌核与蜜环菌共生过程中不同部位糖类成分的含量测定 ,明确蜜环菌对猪苓菌化学成分的影响 ,为进一步阐明二者的相互作用关系和指导猪苓菌核的合理采收提供科学依据。方法 采用高效液相分析法 (HPLC)。结果 蜜环菌侵染的猪苓菌核部位和 4年生菌核糖类成分含量高于其它部分。结论 蜜环菌的侵染不但促进了猪苓菌核的繁殖和生长 。

不同年龄的野生与家种猪苓菌核糖类等成分的含量测定

野生与家种猪苓菌核还原糖含量均随生长年龄的增加而递减;二年龄菌核的多糖含量最高;菌核中蛋白质含量随着年龄的增加而递增;一年龄菌核的脂肪含量最高;家种二年龄菌核的麦角甾醇含量最高,而野生菌核则与此相反。

猪苓菌核代料栽培技术初探

猪苓（Crifola umbellate Pilat），是一种药用真菌，其药用价值在我国古代早有记载，是重要的传统中药。随着医疗事业的发展，以猪苓为原料的成品药不断开发，有关猪苓人工栽培愈来愈受关注。但是，猪苓菌核生长缓慢以及缺乏有效保护，野生资源已濒临枯竭，近年来国际国内供需矛盾日益加剧。猪苓已被列人为重点保护的42种濒危中药材之一。因此保护猪苓野生资源，开展猪苓代料栽培势在必行。

猪苓菌核与猪苓菌丝体中提取多糖对小鼠免疫器官重量影响的比较研究

通过人工液体浅层培养的方法成功培养出猪苓菌丝体.用热水浸提法分别提取猪苓菌核和猪苓菌丝体中的多糖,并用3,5-二硝基水杨酸法测定其糖含量,进一步纯化处理后,用傅里叶红外吸收光谱仪进行比较分析表明,两者红外光谱图相似.通过对小鼠免疫器官重量的免疫学检测,表明从猪苓菌丝体中提取的多糖和从猪苓菌核中提取的多糖均有提高机体免疫器官重量的作用,统计学分析表明差异不显著.

猪苓菌核半野生栽培技术

猪苓[Polyporus umbellatus（Pers.）Fries]属多孔菌科真菌,其地下菌核是稀有中药材,有利尿渗湿、通淋退肿等功效,主治肿胀满腹急痛。猪苓多以野生品供应市场,野生猪苓分布于海拔1 000～2 000 m的山区,

猪苓菌丝形成菌核栽培方法的研究

目的 阐明在伴生菌的作用下 ,不同栽培方法对猪苓菌丝形成菌核的影响。方法 以树棒为载体 ,粗砂为基质 ,纯猪苓菌种、纯猪苓菌丝形成菌核伴生菌和蜜环菌为供试菌株 ,采用花盆栽培方法。结果 猪苓菌种和伴生菌间隔接种于树棒鱼鳞口和晚期接蜜环菌有利于猪苓菌核的形成和生长。结论 伴生菌是猪苓菌丝形成菌核的关键生物因子 ;蜜环菌是猪苓菌核继续生长发育的主要营养来源。

药用真菌猪苓菌核无机磷酸盐转运蛋白基因的分子克隆与特性分析

目的克隆猪苓Polyporus umbellatus菌核无机磷酸盐转运蛋白基因并进行生物信息学和表达模式分析。方法采用RT-PCR技术从猪苓菌核中克隆得到1个无机磷酸盐转运蛋白(inorganic phosphate transporter)基因,利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域、信号肽和跨膜结构等分子特性;采用Clustal W2以及MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;实时荧光定量PCR分析基因表达模式。结果猪苓无机磷酸盐转运蛋白基因命名为Pu Pi T(NCBI登录号:KU179154)。该基因开放读码框全长为1 590 bp,编码530个氨基酸。Pu Pi T蛋白相对分子质量为57 552,等电点6.82。氨基酸序列分析表明,Pu Pi T蛋白具有12个跨膜区。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示Pu Pi T与Moniliophthora rorer亲缘关系最近,与Moniliophthora roreri、双色蜡蘑Laccaria bicolor、Heterobasidion irregulare有较高的同源性,荧光定量PCR结果表明,Pu Pi T在与蜜环菌共生的猪苓菌核及未与蜜环菌共生的菌核中都有表达,其中共生部分的表达量显著上调,约是未共生部位的12倍,说明其参与猪苓与蜜环菌共生过程。结论 Pu Pi T基因克隆和分子特征为进一步研究揭示其在猪苓菌核磷元素转运及与蜜环菌共生过程中的调控作用奠定基础。

猪苓菌核不同发育时期转录组学差异表达研究

药用真菌猪苓菌核的发育代谢过程一直备受关注。为了解猪苓菌核的发育历程,该研究对3个不同时期的猪苓菌核进行了转录组学分析,共得到88. 12 Gb测序数据,包含85 235条unigene。对差异基因进行深度挖掘,筛选了有关跨膜运输、防御、极性生长、形态发育、黑色素合成、细胞壁合成、药效成分麦角甾醇和猪苓多糖合成功能的DEGs,从而推测了菌核发育的分子机制。根据DEGs的通路富集注释结果和相关报道,进一步推测猪苓菌核的发育是由于非生物胁迫(温差和缺氧)和生物胁迫(共生菌蜜环菌和伴生菌的入侵)诱导所致,造成菌核的氧化应激状态,加速合成膜转运蛋白和麦角甾醇从而实现物质的跨膜运输和转换,并通过WD40蛋白实现自身的防御机制。小GTPase和细胞色素P450响应环境信号,进而调控细胞的极性生长和形态发生,期间表皮黑色素沉积,细胞壁加厚,猪苓多糖合成,最终使得猪苓菌核的发育成熟。猪苓菌核不同时期转录组的研究为今后解析其发育历程和相关代谢过程的分子机制奠定了坚实的基础。

人工诱导猪苓子实体形成的实验观察

目的观察人工诱导猪苓菌核形成子实体的过程及其相关环境因子，为猪苓孢子繁育技术研究奠定基础。方法根据多年观察猪苓菌核在自然环境下偶然形成子实体的生物学特性，模拟相关因子，按不同菌龄、菌核大小、是否伴栽密环菌等进行人工诱导猪苓形成子实体的实验观察。结票人工模拟环境下，猪苓菌核在环境温度20～25℃、土壤湿度50％以上时，易形成子实体；其中形成子实体的主要是三年或三年以上生菌核，而三年以下生菌核很少形成子实体。结论人工模拟环境可以诱导猪苓菌核产生子实体，但对菌核形成子实体的形态与菌核大小、菌龄长短等深层机理，尚需进一步研究。

猪苓栽培中易发生的技术问题

猪苓有黑、灰、白三种颜色,分别称作黑苓、灰苓和白苓.生长一年以上的猪苓菌核,表皮为黑色有光泽,质地致密韧性强,断面白色或淡黄色,部分可萌发菌丝;灰苓表面灰或灰黄色,光泽暗,有一定的韧性和弹性,断面白色,在适温条件下萌发很快,可作药用或留作无性繁殖用种;

Discovery and Application of the Companion Fungus Related to Sclerotial Formation from Hyphae of Grifola umbellata

The companion fungus ( Grifola sp.) related to sclerotial formation from hyphae of Grifola umbellata (Pers.) Pilat was isolated from the cavity associated with sclerotia of G. umbellata in natural condition. Experimental results showed that the pure culture of G. umbellata was unable to form sclerotia, whereas sclerotia produced easily in flasks or on trunks when the companion fungus was inoculated together with strain of G. umbellata. The companion fungus is critical for sclerotium formation from hyphae of G. umbellata. Morphological differences were found in cultures of the two fungi. The companion fungus possesses thin-walled narrow hyphae, while G. umbellata is of wider hyphae which are either thick- or thin-walled.

Characterization of Sclerotial Formation from Hyphae of Grifola umbellata

Grifola umbellata (Pers.) Pilat is a fungus whose sclerotium has potent pharmaceutical values.The present study shows that its sclerotia can be reproduced from the hyphae, in addition to its traditionalmode of reproduction from sclerotia. On a culture medium, the hyphae first become swollen and enlargedfollowed by differentiation to form a highly organized structure, sclerotia. We demonstrate that at amicroscopic level, sclerotia derived from hyphae and sclerotia obtained in the field are similar, both havingcortex and medullary substances.

蘑菇家族对人类的利与弊

蘑菇家族对人类的利与弊北京延庆中学贺留荣蘑菇属于生物界中的一个类群，在其长期进化过程中，保留了它特有的、适于繁衍生息的许多特征和特性。这些特征和特性，对人类有的有利，有的有害。可食用的蘑菇我国可食用的野生蘑菇就有三百多种。如东北林区的松口蘑；元蘑、榛...

猪苓与蜜环菌化学成分研究的相关分析进展

共生的猪苓Polyporus umbellatus与蜜环菌Armillaria mellea均为药食兼用真菌,具有降血糖、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物活性。猪苓菌核经菌丝体发育而来,其生长过程与共生蜜环菌有关;受其侵染,猪苓菌丝体可形成菌核。该文通过分析猪苓菌丝体、菌核和蜜环菌的化学成分,发现三者均含有甾体和含氮杂环等化合物,且猪苓菌核与蜜环菌中还含有三萜类次生代谢产物。猪苓菌核及其菌丝体的甾体种类存在显著差异,但部分成分存在一定的相关性。此外,猪苓菌核还特有长链脂肪酸、酰胺和苯酚等多种化合物,推测这些可能是因蜜环菌入侵而形成的多种次生代谢产物;而蜜环菌自身主要产生倍半萜、二萜等物质。猪苓与蜜环菌的化合物含量、种类与其共生繁殖密切相关,目前尚需对二者的共生机制进行深入研究,为提高二者产量及质量提供科学依据。

药用真菌猪苓共生的蜜环菌种类研究

目的对国内猪苓产区与猪苓共生的蜜环菌种类进行探究。方法经PDA平板培养后长出健壮的蜜环菌根状菌索。运用IGS测序技术对分离的22株蜜环菌菌株的纯培养菌种进行分子鉴定,并基于蜜环菌的IGS序列进行核酸序列数据库Gen Bank同源序列比对、构建系统发育树。结果本实验获得的猪苓菌核组织分离的22株蜜环菌菌株为其纯培养菌种。基于IGS的系统发育分析表明,与猪苓菌核共生的蜜环菌分别属于Armillaria cepistipes,A.gallica,A.ostoyae以及A.mellea 4个种,其中A.cepistipes,A.gallica分别分离得到10株,为优势种。结论猪苓共生对蜜环菌物种专一性较低,与相关书籍及文献报道的与猪苓共生蜜环菌为单一A.mellea种的结论不符。与猪苓共生的蜜环菌多样性及不同种类蜜环菌对猪苓菌核生长发育的影响需进一步研究。