仔猪葡萄球菌病临床症状、诊断与综合防制

仔猪葡萄球菌病常见于7日龄左右的仔猪,主要致病原因是各种途径感染葡萄球菌。本病症无季节性特征,存在持续时间长、恢复效果差的特征,会严重影响养殖业的经济效益。因此为解决上述问题,应深入了解本病症疾病诊断与防制方法。

保育猪葡萄球菌病发生、诊断和防治方法

猪葡萄球菌病是一种由葡萄球菌感染引起的一种以渗出性皮炎为主要特征的急性传染性皮肤疾病,多发于哺乳仔猪或断奶仔猪,保育猪也可感染葡萄球菌,相对于仔猪其发病率和病死率较低,其临床特征主要表现为全身皮肤出现破损和增厚现象,并同时分泌油脂状黄色渗出物,故又称为油皮病。

猪葡萄球菌病发生、诊断与防治

金黄色葡萄球菌在猪群中的流行率存在差异性,这意味着不同的猪场可能会有不同的感染率。然而,在所有猪中,仔猪阶段对该病菌的易感性最强,临床症状也最为严重。金黄色葡萄球菌感染引发的渗出性皮炎是一种扩散性的真皮炎症,波及全身体表,给猪的健康和生产带来了极大的影响。研究表明,金黄色葡萄球菌的入侵与猪的体表健康情况密切相关。因此,保持猪的体表清洁和健康是预防感染的重要措施。本文结合实际工作经验,探讨了猪葡萄球菌病的发生特点,诊断方法与防治措施希望对更好的控制该类疾病的发生流行,确保养殖安全有一定的帮助。

一株鸡源猪葡萄球菌的分离与鉴定

为进一步研究引起蛋鸡产蛋下降的病原菌的致病机理,本研究从患有输卵管炎的蛋鸡输卵管中分离到一株革兰氏阳性球菌,通过培养形态观察和生化试验进行初步鉴定,并采用PCR扩增其16S rRNA基因序列进行测序,与GenBank中登录的已知序列进行比对分析,结果显示该菌与猪葡萄球菌(Staphylococcus hyicus)在进化关系上的距离最近,同源性达到99.5%以上,表明该分离株为S.hyicus。并通过小鼠毒力试验和蛋鸡回归试验对该分离株的致病力研究,表明该菌对小鼠无致病性,但可以引起生殖系统病变,导致产蛋能力下降。

猪葡萄球菌脱落毒素研究进展

猪渗出性皮炎是一种由猪葡萄球菌引起的哺乳或断奶仔猪的急性传染病。猪葡萄球菌产生的脱落毒素被认为是引起猪渗出性皮炎的主要因子之一,不同毒株可以产生不同的毒素,分别被命名为Ex-hA、ExhB、ExhC和ExhD 4种。论文就近年来对猪葡萄球菌脱落毒素的结构特征、生物学功能以及在诊断和免疫学方面的研究进行综述。

凝固酶阴性猪葡萄球菌的分离鉴定及耐药性研究

分离鉴定引起猪子宫内膜炎的葡萄球菌并进行致病性和耐药性研究,为临床用药提供依据。从子宫内膜炎发病猪子宫脓液中分离获得1株革兰阳性球菌,根据细菌形态、生化特性、动物实验、16SrRNA序列测定及系统进化树分析,确定该分离菌株为凝固酶阴性猪葡萄球菌,为条件性致病菌株。药敏试验和耐药基因检测发现,该菌含有氨基糖苷类、氯霉素类、磺胺类的3个耐药基因,对阿米卡星、强力霉素、青霉素等11种药物高度敏感,对庆大霉素、左氟沙星、万古霉素等6种药物中敏,对链霉素等12种药物完全耐药,说明该分离株具有多重耐药性,治疗母猪子宫内膜炎应建立在药敏试验基础上,有针对性选择高敏抗菌药物。

猪葡萄球菌脱落毒素ExhC基因的克隆及原核表达

为研究猪葡萄球菌表皮脱毒素Exh C基因的分子特征及其原核表达产物的免疫学活性,利用PCR技术从猪葡萄球菌广东增城分离株(GDZC株)扩增出表皮脱落毒素Exh C基因,测序与序列比较分析显示,其编码区全长为837bp,编码279个氨基酸,与国内外猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌表皮脱落毒素Exh C基因的核苷酸同源性、氨基酸同源性均为100%。将Exh C基因克隆于pET-28a(+)表达载体中,经测序正确后,重组质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定和Western blot分析。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量大小约为32ku,与预期大小一致。Western blot分析表明,Exh C重组蛋白能与猪葡萄球菌GDZC株的阳性血清发生特异性反应,说明表达的GDZC株Exh C重组蛋白具有良好的免疫学活性。

猪葡萄球菌ExhB基因在E．coli中的表达及生物学活性分析

以猪葡萄球菌基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增ExhB基因,克隆测序鉴定后,插入质粒pET32a,构建重组表达载体pET32a-ExhB,通过大肠杆菌BL21表达重组融合蛋白,利用Ni亲和层析的方法纯化重组的融合蛋白,并用纯化的蛋白攻毒裸鼠,鉴定其生物学活性。结果显示,扩增出了猪葡萄球菌ExhB基因并纯化出了重组的融合蛋白,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白的相对分子质量约为45 000,主要以包涵体形式存在;通过ELISA和琼脂扩散试验表明,所表达的包涵体蛋白可以与用菌体制得的多克隆抗血清发生特异性结合;用复性的蛋白在裸鼠身上攻毒后可以产生皮炎病变。结果表明,成功的表达了ExhB基因的重组融合蛋白,并且鉴定出重组蛋白可与猪葡萄球菌阳性血清发生特异性免疫反应和重组蛋白在裸鼠身上的致病性,为进一步研究猪葡萄球菌的致病机理及建立该菌完备准确的防治和检测方法奠定基础。

猪葡萄球菌EXHC、SHETA基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测

为分析猪葡萄球菌脱落毒素EXHC和SHETA基因结构并预测其所编码蛋白的结构和功能,本试验根据GenBank已报道的猪葡萄球菌脱落毒素EXHC和SHETA基因序列分别设计了1对特异性引物,从猪葡萄球菌GDZC株中扩增获得EXHC和SHETA基因片段,大小分别为1007和971bp。序列分析结果表明,EXHC基因与猪葡萄球菌丹麦分离株（GenBank登录号：AF515455）及猪源松鼠葡萄球菌河北分离株（GenBank登录号：JF755400）的核苷酸序列、氨基酸序列同源性均为100.0%,而与其他葡萄球菌脱落毒素基因的核苷酸、氨基酸序列同源性分别为3.3%~53.9%和7.9%~44.2%。SHETA基因与日本分离株（GenBank登录号：AB036768）的核苷酸序列同源性为96.2%,氨基酸序列同源性为98.4%,在保守区共有31个碱基发生突变。利用DNAStar软件对EXHC和SHETA蛋白结构进行分析,结果显示EXHC基因编码的蛋白为亲水性蛋白,SHETA基因编码蛋白为疏水性蛋白,抗原性较差。本研究从猪葡萄球菌GDZC株中成功扩增获得EXHC和SHETA基因片段并对其编码的蛋白结构进行了预测,证实了中国分离的猪葡萄球菌同时携带有EXHC和SHETA2种毒素基因,为进一步研究猪葡萄球菌的致病机理及毒素之间的相互作用提供了理论依据。

猪葡萄球菌病的综合防制

葡萄球菌（Staphylococcus）是一群革兰氏阳性球菌,常堆聚成葡萄串状,多数为非致病菌,少数可导致疾病。葡萄球菌广泛分布于空气、饲料、饮水、地面及物体表面,在人及畜禽的皮肤、黏膜、肠道、呼吸道及乳腺中也有存在。猪葡萄球菌（Staphylococcus hyicus）属微球菌科葡萄球菌属成员[1],被认为是引起猪渗出性皮炎的主要原因之一,并最终从分类上确定为猪渗出性皮炎的病原[2]。

猪葡萄球菌分离鉴定及药敏试验

为查明猪场仔猪渗出性皮炎的致病菌及确定其有效治疗药物,对病料进行细菌分离鉴定和药敏试验。从肺脏、心脏及病变皮肤等部位分离细菌后进行纯化,通过镜检、生化反应、细菌鉴定仪鉴定确定该致病菌为猪葡萄球菌;药敏试验结果表明,该菌对青霉素类、林可酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类药物均耐药,对头孢类药物较敏感,建议用作仔猪渗出性皮炎的治疗。

猪葡萄球菌引起新生儿眶内脓肿继发骨髓炎1例

患儿,男,23 d,以＂发热10 d,右眼球突出7 d＂代诉入院。患儿生后13 d出现不明原因发热、鼻塞等症状,当地医院给予＂喜炎平、水溶性维生素＂等治疗（具体不详）,2 d后体温正常。1 d后出现右眼睑红肿,眼球突出,渐加重。外院眼部B型超声超示：右眶内低回声肿物,考虑为炎性反应包块。于我院查WBC 27.8×10~9/L。眼眶CT示：右侧眼睑肿胀,眼眶临近右侧壁可见形态不规则、密度不均匀的软组织包块,其边缘模糊、累及内直肌。右侧筛窦外侧壁骨质结构模糊,可见软组织密度影延伸入右侧鼻前庭,右侧鼻道堵塞。右眼球、肌椎内侧壁受压,眼球向外前方突出。

猪葡萄球菌临床分离株感染仔猪渗出性皮炎模型的建立

为建立研究仔猪渗出性皮炎发病机制及治疗制剂的动物模型,本研究采用PCR及BLAST序列比对方法对猪葡萄球菌437-2株毒素基因型进行鉴定,采用纸片扩散法检测其耐药性,通过不同浓度菌液人工感染仔猪试验分析该菌株的临床致病力、最小致病浓度、发病周期及组织病理学变化。结果显示,该分离菌株为ExhD毒素基因型,其毒素基因与德国分离株(GenBank登录号:AM94662.1)和俄罗斯分离株(GenBank登录号:AM950188.1)的ExhD基因同源性达99%;药敏试验结果显示,该菌株为多重耐药菌株,对青霉素、磺胺异噁唑、链霉素、阿奇霉素、红霉素、四环素、杆菌肽及诺氟沙星耐药;仔猪致病性试验结果显示,低剂量组在整个试验周期内仅注射部位表现出皮炎症状,而中、高剂量组在耳后皮下注射2d后均出现显著的渗出性皮炎症状,病猪表现为耳后出现油皮,全身被毛粗糙,皮肤呈深褐色厚皮痂,有大片蜕皮和黄色液体渗出;感染仔猪的脏器和皮肤病理切片结果显示,低剂量组仔猪脏器无异常,耳部皮肤角质层角化过度,炎性细胞浸润,无棘皮层细胞分离,而中、高剂量组感染仔猪脏器具有一定程度的损伤,皮肤表皮棘细胞层出现明显的细胞分离。上述试验结果说明,利用猪葡萄球菌437-2株可成功建立仔猪渗出性皮炎模型,所需的最小攻菌浓度为1×10^9 CFU/mL。

保育猪葡萄球菌病诊治一例

浙江省嘉兴市某规模化商品猪场的一批保育猪发病,发病率和死亡率分别为10.97%和27.94%,经细菌学、病毒学和寄生虫病学检验,非洲猪瘟病毒、经典猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株病原为阴性,猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、猪圆环病毒、猪伪狂犬病病毒野毒株为阳性,对分离到的菌株进行药敏试验,发现对头孢噻呋、强力霉素、氟苯尼考敏感。经隔离、敏感抗生素治疗,再配合猪舍消毒以及环境温度、湿度调控等综合性技术措施,成功控制疫情。

湖南岳阳猪葡萄球菌分离鉴定及耐药性分析

为确定湖南岳阳某猪场仔猪渗出性皮炎致病原,从该场发病仔猪组织(心脏、皮肤和肺脏)分离并纯化得到一株革兰氏阳性球菌,通过生化试验和分子生物学方法最终将其诊断为猪葡萄球菌,且该分离菌对昆明小鼠具有致病性,感染可引起其皮肤出现脱毛、炎性渗出等,但不致死。进一步药敏试验结果显示,该菌株对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢哌酮、阿莫西林、氟苯尼考、万古霉素、多西环素和磺胺异噁唑敏感;对诺氟沙星、环丙沙星中敏;对林可霉素耐药。表明该场仔猪发生渗出性皮炎是由猪葡萄球菌感染引起,研究结果为该病的防治提供科学参考。

猪葡萄球菌感染的防治

猪葡萄球菌感染是由猪葡萄球菌引起的细菌性疾病，以断奶仔猪多发，有明显的接触性传染性，无明显的季节性，与环境因素关系密切。若不及时确诊并给予妥善治疗，会给养猪场带来一定的损失。

一株猪葡萄球菌的分离鉴定

从患有渗出性皮炎的仔猪分离到1株革兰阳性球菌,生化试验、形态学观察进行初步鉴定,然后进行16 S rRNA基因片段的扩增和测序,将测序结果与GenBank上的已知序列进行同源性比较,结果与猪葡萄球菌的核酸序列同源性达到99.6%,综合可见该分离菌株为猪葡萄球菌,并将其命名为GDSH1。

猪葡萄球菌毒素致死小鼠的初步研究

为观察猪葡萄球菌毒素对小鼠的致病性,用一株能引起猪渗出性皮炎的猪葡萄球菌于24~72 h肉汤培养物和经80℃、30 min灭活的肉汤培养物,肌肉注射小鼠。将77只小白鼠称重标记,随机分为7组,每组11只,1~6组为试验组,依次为第1组肌注培养24 h不灭活的菌液,第2组肌注培养24 h经灭活处理的菌液,第3组肌注培养48 h不灭活的菌液,第4组肌注培养48 h经灭活处理的菌液,第5组肌注培养72 h不灭活的菌液,第6组肌注培养72 h经灭活处理的菌液,每只鼠肌注菌液量为0.5 mL;第7组为对照组,肌注0.5 mL灭菌生理盐水。结果表明,未经灭活处理的培养液均可致小鼠死亡,培养48~72 h经灭活处理的培养物仍可致小鼠死亡。

一例猪圆环病毒2型和猪葡萄球菌混合感染导致仔猪渗出性皮炎的诊断与防控

2020年9月初,湖南岳阳市某规模化猪场仔猪出现皮炎、气喘等症状,且发病严重仔猪最终死亡。对病死仔猪进行剖检,发现其淋巴结肿大,肾脏有出血点,且肺脏出现严重实变。取病变组织提取核酸基因组,通过PCR/RT-PCR分别检测猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)等;同时对病料中的细菌进行分离与鉴定。结果发现,在组织病料中检测出PCV2核酸阳性,同时分离出猪葡萄球菌;进一步药敏试验结果表明,该菌株对多种抗生素耐药,如头孢克肟、氨苄西林、青霉素和氨曲南等,但对头孢唑林、万古霉素和新生霉素等敏感。表明此次发病是由PCV2与猪葡萄球菌混合感染所致,其结果为该场相关疫病防控提供依据。

猪葡萄球菌病发生、诊断和防治方法

猪葡萄球菌病是生猪养殖过程中常见的急性传染病,主要侵害哺乳仔猪。由于葡萄球菌是一种广泛存在于生猪活动空间的细菌,当猪群日粮营养失衡、卫生环境较差、饲养管理粗放、自身抗病力较低时等均可发病。本文首先描述了猪葡萄球菌病病原体特征,并对其传播途径、流行特点、不同发病症状及病理变化进行分析,然后对临床相似的猪疥螨病、猪锌缺乏症、猪湿疹病进行鉴别诊断,提出药物治疗和预防措施,供同行参考。