白细胞介素-22在猪螺杆菌感染的肥胖小鼠胃黏膜相关淋巴组织中的表达及意义

目的探讨白细胞介素-22(IL-22)在猪螺杆菌(Helicobacter suis,H.suis)感染的肥胖小鼠胃黏膜相关淋巴组织(mucosa associated lymphoid tissue,MALT)中的表达及意义。方法 40只雌性C57BL/6小鼠随机分为4组,每组10只,即正常对照组(NC组)、高脂饮食组(HFD组)、感染组(HS组)与感染+高脂饮食组(HS+HFD组)。NC组与HS组给予普通饮食,HFD组与HS+HFD组自感染后第3周开始给予高脂饮食;差异性饮食24周后处死小鼠(实验过程中无小鼠死亡),取其胃组织行HE染色检测各组小鼠胃黏膜淋巴滤泡的数量与大小;Real-time PCR检测各组小鼠胃黏膜IL-22及其受体IL-22R1与B细胞趋化因子CXCL13 mRNA表达水平。结果 H.suis感染可诱导小鼠胃黏膜淋巴滤泡的形成;与HS组相比,HS+HFD组小鼠胃黏膜淋巴滤泡的数量与大小明显增加,胃黏膜IL-22、CXCL13 mRNA表达水平也明显增加。结论高脂饮食诱导的肥胖可促进H.suis感染后胃MALT的形成,其机制可能与肥胖时胃黏膜中IL-22的表达上调有关。

人畜共患病病原——猪螺杆菌及其研究进展

猪螺杆菌(Helicobacter suis,H.suis),革兰氏阴性菌,具有典型螺旋状外形,菌体末端因有平均4-10个鞭毛而具有高度的活动性。猪螺杆菌是一种重要人畜共患病病原,近些年才被比利时科学家分离并成功体外培养。猪螺杆菌不同于主要感染人的幽门螺旋杆菌,猪螺杆菌主要感染大部分的猪,处于屠宰年龄的猪的感染率约在60%-95%。猪螺杆菌感染主要导致猪发生胃炎,胃部不适和降低猪的体重增加率。更重要的是,猪螺杆菌也感染部分人,造成患者发生各种胃部不适、胃病甚至胃癌(如粘膜相关淋巴组织淋巴瘤)。猪螺杆菌感染后虽然引发了机体强烈的先天免疫和适应性免疫应答,但是该菌进化了数种毒力因子用来逃避免疫系统的监控,最终可以持续地定植在宿主胃内,破坏胃上皮细胞稳态,引发慢性炎症,甚至胃癌。目前科学家对于猪螺杆菌的传播途径还不是很清楚,猪肉和相关制品,唾液,粪便可能是造成细菌传播的途径。猪、小鼠和蒙古沙鼠是目前常用的研究猪螺杆菌致病机理的动物模型。虽然猪螺杆菌对猪的健康、生产性能和动物福利乃至人的健康有重要影响,但是由于猪螺杆菌分离培养比较困难,细菌体外培养需要微需氧环境(85%N2,10%CO2和5%O2),国内对猪螺杆菌研究相对较少,一般主要涉及细菌的检测方面。目前,关于猪螺杆菌致病机理的资料比较少。通过分析猪螺杆菌基因组结合已知发现,大家推测该菌可能通过以下几个机制来干扰或逃避宿主防御应答:鞭毛的高度运动性和对酸的中和能力、对胃上皮细胞的较高黏附性、对氧化应激压力的解毒能力、诱导细胞死亡和免疫调节等。鉴于此,本文作者结合多年猪螺杆菌研究经历以及文献资料从猪螺杆菌的研究历史、细菌的基本特征和培养条件、流行现状、致病机理和国内外研究现状等几个方面进行了详细综述,旨在提高国内对猪螺杆菌及其致病性的认识和重视程度,也为猪螺杆菌未来的研究和防控提供重要的参考和指导。

瘦素在猪螺杆菌感染后胃黏膜相关淋巴样组织形成中的作用

目的研究瘦素在猪螺杆菌(Helicobacter suis,H.suis)感染后胃黏膜相关淋巴样组织(mucosa-associated lymphoid tissue,MALT)形成中的作用及其可能的机制。方法 C57BL/6野生型小鼠、瘦素缺陷(Ob/Ob)小鼠各20只随机分为以下四组:正常小鼠未感染组(WT组)、正常小鼠H.suis感染组(WT+HS组)、Ob/Ob小鼠未感染组(Ob组)、Ob/Ob小鼠H.suis感染组(Ob+HS组),每组10只,感染12周后处死,收集小鼠血清与胃组织。采用HE染色检测各组小鼠胃黏膜淋巴滤泡的数量与大小;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组小鼠血清中瘦素的浓度;实时荧光定量PCR检测各组小鼠胃黏膜中瘦素及其受体Ob-R、炎症因子IFN-γ及趋化因子CXCL13 mRNA表达水平。结果正常小鼠感染H.suis后可见胃黏膜淋巴滤泡形成;与WT+HS组相比,Ob+HS组小鼠血清及胃黏膜中均未检测到瘦素的表达,胃黏膜中未观察到淋巴滤泡形成,且IFN-γ与CXCL13 mRNA表达水平明显降低;体外实验结果发现,瘦素可刺激淋巴瘤B细胞分泌表达IFN-γ。结论瘦素可能通过促进H.suis感染后胃黏膜IFN-γ的表达参与了胃MALT的形成。

肥胖对猪螺杆菌感染后胃黏膜相关淋巴样组织形成的影响

目的：研究高脂饮食诱导的肥胖对猪螺杆菌（ Helicobacter suis, H. suis）感染后小鼠胃黏膜相关淋巴样组织（ mucosa associated lymphoid tissue,MALT）形成的影响及其可能的机制。方法将40只雌性C57BL/6小鼠随机分为4组,每组10只,即正常对照组（NC组）、高脂饮食组（HFD组）、H. suis感染组（ HS组）和H. suis感染＋高脂饮食组（ HS＋HFD组）。 NC组与HS组给予普通饮食,HFD组与HS＋HFD组自感染后第3周开始给予高脂饮食；差异性饮食24周后处死小鼠,取其胃组织行HE染色检测各组小鼠胃黏膜淋巴滤泡的数量与大小；real-time PCR检测各组小鼠胃黏膜瘦素（ leptin）及其受体Ob-R、炎症因子IFN-γ与趋化因子CXCL13、CCL2的mRNA表达水平。结果 H. suis感染可诱导小鼠胃黏膜滤泡的形成；与HS组相比,HS＋HFD组小鼠胃黏膜淋巴滤泡的数量与大小明显增加,胃黏膜leptin及其受体Ob-R,IFN-γ、CXCL13、CCL2的mRNA表达水平亦明显增加。结论高脂饮食诱导的肥胖可促进H. suis感染后胃MALT的形成,其机制可能与肥胖时脂肪因子leptin及相关炎症因子与趋化因子的表达上调有关。

布拉氏酵母菌对猪螺杆菌感染后胃黏膜相关淋巴样组织形成的影响

目的：研究布拉氏酵母菌对猪螺杆菌（ Helicobacter suis, H. suis）感染后该细菌在胃内定植与胃黏膜相关淋巴样组织（MALT）形成的影响。方法 C57BL/6野生型小鼠60只随机分为6组：A、B两组小鼠分别给予无菌蒸馏水、布拉氏酵母菌灌胃2次后感染H. suis 1周；C、E两组小鼠给予无菌磷酸盐缓冲液灌胃1周后分别给予无菌蒸馏水和布拉氏酵母菌灌胃,D、F两组小鼠感染H. suis 1周后亦分别给予无菌蒸馏水和布拉氏酵母菌灌胃,均为每周2次,共处理12周；收集各组小鼠血清与胃组织。结果B组小鼠胃黏膜中 H. suis的数量较 A组明显减少；在血清与胃组织分泌型 IgA（sIgA）含量及胃黏膜IFN-γmRNA的表达水平方面,两组无显著差异；D、F组小鼠胃黏膜中均检测到H. suis 16S rRNA的表达与胃淋巴滤泡的形成,且血清与胃组织中sIgA含量及胃黏膜IFN-γmRNA、CXCL13 mRNA的表达水平分别较C、E两组明显增高；与D组相比,F组小鼠胃黏膜H. suis的数量及单位长度胃黏膜MALT的数量明显减少,血清及胃组织中sIgA的含量显著增加,胃黏膜中IFN-γ mRNA与CXCL13 mRNA的表达水平亦明显减少。结论布拉氏酵母菌可抑制H. suis感染后该细菌在胃内的定植与胃MALT的形成。

腹腔注射白细胞介素22抗体对猪螺杆菌感染后小鼠胃黏膜相关淋巴样组织形成的影响

目的研究腹腔注射白细胞介素（interleukin，IL）22抗体对猪螺杆菌（Helicobacter suis，H.suis）感染后小鼠胃黏膜相关淋巴样组织（mucosa associated lymphoid tissue，MALT）形成的影响及其可能的机制。方法40只雌性C57BL/6小鼠随机分为4组，每组10只，即正常对照组（normal control，NC组），H.suis感染组（HS组），抗体干预组（antibody treated，Ab组）与H.suis感染＋抗体干预组（HS＋Ab组）。Ab组与HS＋Ab组自感染后第2天开始给予50 μg小鼠IL-22单克隆抗体腹腔注射；NC组与HS组给予等量的同型对照抗体腹腔注射，每周1次，共12周后处死小鼠，取其胃组织行HE染色检测各组小鼠胃黏膜淋巴滤泡的数量与大小；分别采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）与Western blot检测各组小鼠胃组织中IL-22与趋化因子CXCL （CXC-chemokine ligand）13的表达水平；体外培养人脾脏成纤维细胞株，加入IL-22在100 ng/mL的浓度下分别刺激24与48 h后分别检测细胞与培养液中CXCL13的表达水平；分离获得H.suis感染小鼠的胃组织免疫细胞，加入IL-22分别在50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL的浓度下刺激24 h，检测细胞与培养液中CXCL13的表达水平。结果H.suis感染可诱导小鼠胃黏膜滤泡的形成；与HS组相比，HS＋Ab组小鼠胃黏膜淋巴滤泡的数量明显减少且变小[（0.12±0.03）比（0.09±0.02）；（71.34±11.25）比（28.75±7.46）]，胃组织中IL-22与CXCL13的表达水平亦明显下降[（1.39±0.25）比（0.48±0.08）；（1.61±0.27）比（0.45±0.09）]。人脾脏成纤维细胞在体外经IL-22刺激后，其细胞中与培养液中CXCL13的表达水平均较未经刺激的相应对照组明显增加[（1.52±0.29）比（0.22±0.08）；（1.97±0.27）比（0.24±0.11）；（47.4±5.21）比（8.3±0.97）；（69.7±7.95）比（8.9±1.13）]，且刺激48 h后的CXCL13表达水平要显著高于刺激24 h后；小鼠胃组织免疫细胞在体外经不同浓度的IL-22刺激后，其细胞中与培养液中CXCL13的表达水平均较未经刺激的相应对照组明显增加[（4.83±0.67）比（0.98±0.23）；（6.35±0.86）比（1.03±0.21）；（8.84±1.12）比（1.07±0.25）；（25.31±3.61）比（4.33±0.62）；（41.33±5.18）比（4.47±0.58）；（58.35±6.26）比（4.54±0.65）]，且CXCL13表达水平随着IL-22刺激浓度的增加也相应增加。结论IL-22可能通过促进CXCL13的表达在H.suis感染后胃MALT的形成过程中发挥重要作用。

25味常用清热解毒药提取物对猪源幽门螺杆菌的体外抑菌活性

采用乙醇回流、超声波等方法提取金果榄等25味常用清热解毒中药的抗菌活性成分,分别测定它们对猪源幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),筛选出对猪源Hp具有良好体外抑菌效果的几味中药,并评价其体外联合抑菌效果。结果显示,黄连和青果的提取物对猪源Hp的MIC范围为1.56~3.12 mg·m L^(-1)。金银花、金果榄、大青叶、玄参、山豆根、白头翁、紫花地丁、大黄和蒲公英提取物的MIC范围为12.50~25.00 mg·m L^(-1)。大血藤、虎杖、射干、忍冬藤、菊花、鱼腥草、连翘、板蓝根、益母草、诃子和白蔹提取物的MIC范围为50.00~100.00 mg·m L^(-1)。升麻、绵马贯众、柴胡提取物的MIC≥200.00 mg·m L^(-1)。两两联合抑菌试验结果表明,青果和金果榄的联合抑菌指数(FICI)≤0.5,青果或金果榄分别与黄连联合的0.5<FICI≤1,黄连、青果、金果榄分别与金银花联合的FICI>2。本研究表明,黄连、青果、金银花、金果榄对猪源Hp均有很强的体外抗菌活性,青果与金果榄为协同作用,青果或金果榄分别与黄连联合时为相加作用,黄连、青果、金果榄分别与金银花联合时均为拮抗作用。

非幽门螺杆菌螺杆菌致胃黏膜病变研究进展

非幽门螺杆菌螺杆菌(Non-Helicobacter pylori Helicobacter,NHPH)是一类形态不同于幽门螺杆菌的、较长的、呈紧密螺旋形态的螺杆菌。NHPH自然宿主为哺乳动物,也可感染人,可见于约0.2%~6%的人体胃黏膜活检标本,与胃炎、胃溃疡、胃MALT瘤等有关。人体胃内NHPH包括猪螺杆菌(H.suis)、猫螺杆菌(H.felis)、毕氏螺杆菌(H.bizzozeronii)、扎氏螺杆菌(H.salomonis)、海尔曼螺杆菌(Candidatus H.heilmannii)。新近研究通过动物模型证实从人体胃黏膜分离H.suis致病性,从动物宿主胃黏膜分离的H.felis,H.bizzozeronii致病性也得到研究证实。本文对NHPH致胃黏膜病变相关研究进行总结。