猪干扰素调节因子7的克隆及原核表达

为了进一步研究猪IRF7基因所编码蛋白质的生物学功能,本研究以猪十二指肠cDNA为模板扩增IRF7基因(RF区;将该基因克隆至原核表达载体pET-21b(+)中,获得pET-21b—IRF7重组质粒。经测序鉴定后,将重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达His—IRF7融合蛋白,并利用Western blot进行鉴定。结果表明:(1)成功克隆了1 461 bp IRF7 ORF区;(2)His—IRF7融合蛋白在裂解菌液的上清和沉淀中均有表达,相对分子质量为60.5ku。结果提示,运用大肠杆菌表达系统成功表达IRF7融合蛋白,为猪IRF7基因相关功能研究提供了基础材料。