猪Hokovirus PCR检测方法的建立及其应用

猪Hokovirus(PHoV)是近年来在香港发现的一种猪细小病毒。为及时评估该病毒在我国的感染及流行情况,本研究根据GenBank中登录的PHoV核苷酸序列设计并合成一对特异性引物,建立了PHoV的PCR检测方法。研究结果表明,所建立的PCR检测方法特异性强,对其它的猪主要病毒无交叉反应;敏感性较高,最低可以检测2.4×104拷贝/μL;而且重复性较好。采用该方法对2009年～2010年我国华东地区猪场的318份临床样品进行检测,结果显示38份样品为PHoV阳性,表明我国猪群中存在PHoV感染。本研究建立的PCR方法可以作为在临床上检测PHoV的一种有效手段。

猪Hokovirus LAMP检测方法的建立及应用

为提高猪Hokovirus(PHoV)检测的敏感性和简便性,本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术,建立了一种敏感、特异、快速、简便、实用的检测PHoV的技术。针对PHoV VP1/2基因保守区设计4条引物,进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化并检测其敏感性和特异性。结果表明,所建立的方法最佳反应时间为60 min,反应温度为65℃,该方法具有良好的特异性,与其它常见动物病毒(PRRSV、PCV2、CSFV、PRV、PPV、JEV)无交叉反应,对PHoV的最低检出量为10拷贝,其敏感性是PCR方法的10倍,且通过加入荧光染料可直接判定结果。研究表明,该方法特异性强、敏感性高,且操作简便、检测成本低、检测时间短,不需要特殊的仪器,本研究建立的LAMP方法可以作为PHoV在临床上的一种检测技术。

猪Hokovirus TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用

为建立检测PHoV的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据PHoV的V P2基因序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有V P2基因的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示,该方法的检测灵敏度为10拷贝;而且该检测方法特异性较好,与猪的其他病毒核酸均无交叉反应;批内和批间的变异系数低于3.29%,表明该方法的重复性较好。对华东地区采集的225份临床样品进行检测,结果显示,PHoV的阳性率为14.2%。本研究建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,可以为PH oV的流行病学调查和发病机制等研究提供可靠的工具。

REG增强的脱细胞猪角膜/聚甲基丙烯酸羟乙酯原位一体式全层复合人工角膜

背景:目前用于全层移植的人工角膜缺乏生物活性及力学适配性,组合式人工角膜存在镜柱和周围组分间的界面问题。目的:在脱细胞猪角膜原位固化制备具有多肽增强、匹配自然角膜机械强度、良好透光性的一体式全层人工角膜。方法:使用非离子型脱细胞试剂Triton X-100与超声冻融及超级核酸酶相结合的方法制备脱细胞猪角膜,将聚甲基丙烯酸羟乙酯单体与光引发剂同时引入脱细胞猪角膜中,通过紫外滤光片遮住除中心区域以外的部分,使用275 nm紫外光引发中央区域聚合,除去未反应的单体及引发剂后得到中央光学区,同理在后板层固化隔水区,最后引入REG活性多肽,得到原位一体式全层人工角膜,表征人工角膜的物理性能、力学性能、透光性、降解性能及体内外生物相容性。结果与结论:①实验在脱细胞猪角膜的中央区域采用聚甲基丙烯酸羟乙酯原位构建了一个具有聚合物和胶原纤维共存的光学区,扫描电镜下可见人工角膜的上表面较为粗糙且轮廓不规则,具有明显的凹陷和突起结构,下表面相对光滑;该人工角膜具有接近于天然角膜的力学性能,光学区透光率达到自然角膜的80%,浸泡于含胶原酶的PBS无菌溶液中可较好地保留固化光学区和隔水区,维持角膜的基本结构;该人工角膜具有良好的细胞相容性,能够为细胞提供适宜的黏附生长环境,有利于角膜上皮细胞的迁移和黏附,促进血管内皮细胞的生长和新生血管的形成,促进上皮化过程;人工角膜植入SD大鼠皮下12周后具有良好的生物相容性和安全性,可降低植入初期的急性炎症反应;②结果表明,实验制备的一体式全层人工角膜具有作为全层人工角膜支架材料的潜力。

民猪与大白猪胴体和肉质性状的比较研究

为了探究民猪和大白猪胴体和肉质性状之间的差异,试验以民猪和大白猪为研究对象,在相同的饲养方式及饲养条件下,选取大白猪(日龄180 d)、民猪(日龄180 d和240 d)各6头屠宰,分别测定活体重、活体瘦肉率、背膘厚、眼肌面积等胴体性状;测定pH值、肉色、滴水损失、剪切力、肌内脂肪含量等肉质性状。结果表明:胴体性状同体重与同日龄民猪和大白猪比较变化趋势基本一致,民猪背膘厚显著高于大白猪,眼肌面积极显著低于大白猪,活体瘦肉率和生长速度显著低于大白猪;肉质性状同体重民猪和大白猪相比,民猪肌内脂肪含量极显著高于大白猪,滴水损失和剪切力极显著低于大白猪,肉色红度显著高于大白猪,肉色黄度、亮度和pH24h值与大白猪差异不显著;同日龄民猪肌内脂肪含量和肉色a*值显著高于大白猪,滴水损失和剪切力极显著低于大白猪,肉色黄度、亮度和pH24h值与大白猪差异不显著。说明民猪和大白猪具有较大的遗传基础差异,民猪生长速度慢、瘦肉率低,但肌内脂肪含量高、嫩度和保水性好、肉色鲜红,肉质明显优于大白猪。

猪流感病毒的流行现状及疫苗研究进展

猪流感(swine influenza,SI)是猪的重要呼吸道疾病之一,其特征为发热、咳嗽、呼吸困难、食欲不振等。临床上SI感染病死率较低,但常导致饲料利用率下降,生长性能差,可与其他病原体合并感染而引起高发病率甚至死亡。猪在流感种间传播中起着复杂且重要的作用,SI的发生不仅给养猪业造成巨大经济损失,对公共卫生也造成严重威胁。论文对近10年我国猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)感染的流行病学、病毒进化、跨物种传播、疫苗研发等情况进行综述,分析了综合防控策略,为SI的风险评估和综合防控提供参考。

猪全产业链育种技术及其国内外应用现状

全产业链育种技术早在20世纪五六十年代就被动物育种学家们提出,但直到近些年才逐渐在少数国外育种企业中应用。基于元共祖、基因组选择“一步法”等理论算法,国内外学者提出了MF-ssGBLUP、MAGE等一系列不同的全产业链遗传评估模型和算法,国外育种企业荷兰托佩克公司、PIC等已经在实际育种中应用了此技术,并实现了纯种性能的进一步改良提升。我国颁布的《全国生猪遗传改良计划(2021—2035年)》将全产业链一体化育种定位为未来种业发展的重要方向。全产业链育种对我国生猪产业综合生产效率提升具有重大的行业价值,也将是未来生猪育种领域新质生产力的一个重点发展方向。本文介绍了猪全产业链育种技术在我国生猪产业的应用前景,旨在为我国加快全产业链育种的研发和技术应用提供参考和借鉴。

鉴别猪圆环病毒2型和3型双重TaqMan MGB探针FQ-PCR检测方法研究

建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法,本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因,各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,经优化各反应条件和进行敏感性、特异性、重复性和干扰性试验,建立鉴别检测PCV2/PCV3的双重FQ-PCR方法。结果显示:该方法可特异性扩增PCV2、PCV3核酸,与猪伪狂犬病病毒(PRV)等8种病原及阴性对照无交叉反应,特异性较强;对PCV2和PCV3阳性质粒标准品的最低检出限均可达10 copies/μL,敏感性较高;PCV2/PCV3批内/批间重复试验变异系数(CV)值均在3%以下,表明方法稳定性、重复性较好;干扰性试验表明在两种病毒阳性质粒起始模板相差较大时该方法不会影响对其中任一病毒核酸的检出和准确定量。对42份临床疑似PCV感染样品检测结果与PCV2、PCV3基因测序结果符合率100%。本研究建立的双重FQ-PCR方法具有敏感性高达10 copies/μL、特异性强、在同一反应体系中能同时快速鉴别检测PCV2、PCV3等优点,可用于临床PCV2/PCV3感染的快速鉴别检测。

2020—2022年安徽省猪圆环病毒2型和3型流行情况调查

为了解安徽省猪圆环病毒病(PCVAD)流行情况,2020—2022年于安徽省13个定点监测点采集950份病原学样品和650份血清学样品,采用荧光PCR方法进行猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病原检测,采用间接ELISA方法进行PCV2抗体检测。结果显示:安徽省PCV2抗体阳性率逐年升高,大型养殖场的抗体阳性率显著高于中、小型养殖场(P<0.05);PCV2病原阳性率呈下降趋势,PCV3呈上升趋势,且同一年份的PCV2病原阳性率均显著高于PCV3(P<0.05);屠宰场的PCV2和PCV3病原阳性率均显著高于养殖场(P<0.05);大型养殖场的PCV2和PCV3病原阳性率均显著高于小型养殖场(P<0.05)。结果表明:安徽省PCVAD防控取得一定成效,但是PCV2仍存在广泛感染,PCV3愈加流行,屠宰场和大型养殖场感染风险高。建议持续做好PCV2免疫工作,加强屠宰场的风险监测及大型养殖场的饲养管理和生物安全管理,严防PCV2和PCV3在养殖和屠宰环节流通传播。

大蒜素对育肥猪生长性能、屠宰性能及肉品质的影响

试验探讨了不同水平的大蒜素对育肥猪生长性能、屠宰性能及肉品质的影响,确定大蒜素在育肥猪生产中的最适添加水平。试验选择体重相近的健康的“杜×长×大”三元杂交育肥猪250头,随机分成5组,每组5个重复,每个重复10头猪。对照组育肥猪饲喂基础饲粮,大蒜素组育肥猪分别饲喂含有50(试验组1)、100(试验组2)、200(试验组3)、400 mg/kg(试验组4)大蒜素的试验饲粮。预试验1周,正式试验期42 d。结果显示,与对照组比较,试验组3和试验组4育肥猪末重显著提高(P<0.05),试验组3的平均日增重提高了11.60%(P<0.05),试验组2和试验组3育肥猪的料重比降低了8.64%和11.96%(P<0.05)。试验组3组育肥猪的宰前活重显著高于对照组(P<0.05);试验组2、试验组3和试验组4育肥猪的胴体重显著高于对照组(P<0.05),背膘厚度显著低于对照组(P<0.05)。试验组3和试验组4育肥猪的背最长肌pH值显著高于对照组(P<0.05),滴水损失显著低于对照组和试验组1(P<0.05),肌苷酸含量显著高于对照组(P<0.05);试验组3背最长肌的红度显著高于对照组和试验组1(P<0.05),试验组2、试验组3和试验组4背最长肌的剪切力显著低于对照组(P<0.05)。试验组3和试验组4育肥猪背最长肌中的总氨基酸、总必需氨基酸及鲜味氨基酸含量显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,在育肥猪饲粮中添加适量的大蒜素可以提高生长性能和屠宰性能,改善肌肉品质,大蒜素的最适添加水平为200 mg/kg。

复方中药添加剂对新吉林黑猪生产性能、肉品质、免疫及抗氧化性能的影响

试验旨在研究日粮中添加复方中药添加剂对新吉林黑猪生产性能、肉品质、免疫及抗氧化性能的影响。选用体重(75.68±3.28)kg、约4月龄的新吉林黑猪育肥猪40头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复4头黑猪。对照组饲喂基础日粮,试验组在日粮基础上添加0.5%复方中草药(由黄芪、人参须、党参、山楂、陈皮和红枣配制而成),饲喂体重达到115 kg时屠宰。结果表明:与对照组相比,试验组新吉林黑猪平均日增重增加、耗料增重比降低(P<0.05),胴体斜长、宰前活重、胴体重、屠宰率增加(P<0.05),血清总抗氧化能力增强、免疫球蛋白A水平升高(P<0.05),肉色红色度加深、肌肉剪切力下降和肌内脂肪含量升高(P<0.05)。由此可见,由黄芪、人参须、党参、山楂、陈皮和红枣所配制而成的复方中药添加剂,能够提高新吉林黑猪育肥猪的生产性能,增强抗氧化能力和免疫能力,改善肉色和嫩度。

芽孢杆菌在母猪、仔猪生产中应用的研究进展

芽孢杆菌益生菌是常见的微生态制剂,其孢子对温度、压力、养分等均具有高度抵抗力,能够耐受多种饲料的加工工艺,已在畜禽生产中广泛使用。芽孢杆菌益生菌的作用机制包括:分泌抑菌物质或通过群体感应直接抑菌;调节肠道环境,使其利于共生菌和非致病菌在肠道内的定植;调节免疫,使其利于宿主适应性免疫系统的发育;产酶产酸,促进营养物质的消化吸收。在饲粮中添加芽孢杆菌可减少母猪哺乳期失重和背膘损失,降低母猪围产期代谢综合征的发生概率,同时增加仔猪初生重、断奶重和平均日增重。文章就近些年芽孢杆菌益生菌作用机制的研究进展及其对母猪和仔猪生产性能和健康的影响展开综述,为芽孢杆菌在畜禽生产实践中更好地使用提供参考。

猪精液常温保存的影响因素及抗氧化剂的应用

猪的人工授精技术发展促进了养猪业规模扩大和专业化程度提升,提高猪精液的保存效果是推进人工授精技术发展的关键。目前,大部分猪精液为常温保存,但这一保存方法容易导致精液内活性氧过度积累,降低精液质量。稀释剂中加入适量的抗氧化剂,能够改善猪精液的质量并延长保存期限。本文综述了猪精液常温保存的主要影响因素和抗氧化剂在猪精液常温保存稀释剂中的应用进展,以期为抗氧化剂在猪精液常温保存中的应用提供理论支持,并为开发新型猪精液稀释剂提供参考。

江西地方猪种质资源保护现状及发展对策

江西地方猪种质资源丰富,特征明显,具有繁殖力高、耐粗饲、适应性强、肉质好等特性,是良好的育种素材。该文阐述了江西省地方猪种质资源现状、存在问题及发展建议,以期为地方猪种质资源保护提供参考,更好地推动江西地方猪可持续发展。

黄芩苷对多杀性巴氏杆菌感染猪巨噬细胞后炎症因子表达及信号通路影响的研究

为研究不同浓度黄芩苷对多杀性巴氏杆菌(Pm)HN-13株感染的猪巨噬细胞(HD11)内炎症因子表达的影响及与炎症信号通路的相互作用关系,本研究采用western blot检测HN-13株感染(0、30 min、60 min、90 min)HD11细胞中促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路3个关键蛋白(p-ERK/ERK、p-p38/p38、p-JNK/JNK)的表达水平;采用ELISA和荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)分析检测低浓度剂量黄芩苷(L组,20μmol/L)、中浓度剂量黄芩苷(M组,40μmol/L)和高浓度剂量黄芩苷(H组,60μmol/L)对Pm感染的猪巨噬细胞内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β分泌水平及其m RNA转录水平的影响,同时设置对照组(Control)和模型组(HN-13);利用抑制剂SCH772984阻断ERK通路,采用ELISA和RT-qPCR检测黄岑苷对Pm感染的HD11细胞内炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β表达及m RNA转录水平的影响,同时设置对照组(Control)、模型组(HN-13)、抑制组(HN-13+抑制剂)。结果显示:与HN-13株处理0 min组相比,随着感染时间的延长,HN-13株感染HD11细胞中p-ERK/ERK的蛋白表达量逐渐升高(P<0.01),而p-p38/p38和p-JNK/JNK蛋白表达量均未发生显著变化(P>0.05),表明,HN-13株可使HD11细胞炎症相关ERK通路蛋白表达增强,且与作用时间呈正相关。与模型组(HN-13)相比,3个浓度剂量的黄芩苷均显著抑制TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌水平及m RNA转录水平(P<0.05),且抑制作用随着黄芩苷浓度升高而增强。与抑制组相比,黄芩苷与抑制剂共处理组可以显著抑制HN-13感染的HD11细胞中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌及m RNA转录水平(P<0.05)。综上所述,黄芩苷可以抑制Pm感染的HD11细胞中ERK通路相关蛋白的表达和分泌,进而发挥抗炎作用。本研究为研制防治Pm引起的猪肺疫的新药提供了思路。

白藜芦醇的生物学功能及其在养猪生产中的应用

随着饲料中抗生素的禁用,天然植物成分作为饲料添加剂替代抗生素逐渐受到广泛关注和研究。白藜芦醇作为一种具有多种生物活性的天然多酚化合物,主要存在于葡萄、虎杖等植物中,具有抗氧化、抗炎、抗菌和抗癌等特性。在饲料中添加白藜芦醇可改善猪的肠道健康,促进肠道微生物的平衡和生长发育,增强猪的免疫力和抗病能力。此外,白藜芦醇还可以改善线粒体功能和抗氧化能力,提高能量代谢和利用效率,进而提高猪的生长性能和繁殖性能。文章总结了白藜芦醇在养猪生产中的应用现状,并探讨其潜在的作用机制,为更好地了解其在猪生产中的应用效果和潜力以及今后的研究提供参考。

猪圆环病毒2型疫苗及其效力评价方法比较研究

为探索对不同猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)疫苗产品进行统一质量评价的可行性,对国内该类疫苗产品及其现有效力评价方法进行了归纳和比较研究。结果发现,目前猪圆环病毒2型疫苗类产品种类有25个,且疫苗毒株数量多达10余个,效力检验方法包括传统的免疫攻毒法、血清学方法和多种不同的替代方法,但尚没有统一的效力评价体系。本研究可为进一步完善PCV2疫苗效力评价方法、统一评价疫苗效力、提高产品质量提供参考。

2023年猪病流行情况与2024年流行趋势及防控对策

2023年,我国生猪养殖产能有所增长。据国家统计局2024年1月17日发布的数据显示:2023年猪肉产量5 794万t,增长4.6%;全年生猪出栏72 662万头,增长3.8%;2023年年末生猪存栏43422万头,下降4.1%。受到多种因素的叠加,全年猪价持续低迷,生猪养殖行业严重亏损。非洲猪瘟流行严重,猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)和猪流行性腹泻偏重发生,对生猪养殖企业的生产成绩和经济效益影响极大,特别是非洲猪瘟对生猪产业的实际危害与影响呈加重态势。

液态饲喂杂粕型饲粮对生长猪生长性能、养分消化率、血清炎性因子及粪便短链脂肪酸含量的影响

本试验旨在研究液态饲喂杂粕型饲粮对生长猪生长性能、养分消化率、血清炎性因子及粪便短链脂肪酸(SCFAs)含量的影响。选取平均体重为(30.00±4.26)kg的“杜×长×大”三元杂交猪126头,随机分为3组,每组7个重复,每个重复6头猪。试验Ⅰ组饲喂豆粕型颗粒饲粮;试验Ⅱ组饲喂杂粕型颗粒饲粮(由双低菜籽粕、玉米胚芽粕、喷浆玉米皮及米糠替代部分豆粕和玉米组成);试验Ⅲ组饲喂杂粕型液态饲粮,即在杂粕型饲粮的基础上加入2.7倍的水,混合均匀后饲喂。各组饲粮营养水平基本一致。试验期56 d。结果表明:1)试验全期,与试验Ⅰ组相比,试验Ⅱ组平均日采食量和平均日增重分别降低了2.29%和5.33%(P>0.05),料重比提高了3.40%(P>0.05);与试验Ⅱ组相比,试验Ⅲ组平均日采食量和平均日增重分别提高了7.04%(P<0.05)和6.32%(P>0.05)。2)试验Ⅱ组和试验Ⅲ组干物质、总能和粗蛋白质消化率极显著低于试验Ⅰ组(P<0.01),粗脂肪、磷和粗灰分消化率显著低于试验Ⅰ组(P<0.05)。试验Ⅱ组和试验Ⅲ组间各养分消化率均无显著差异(P>0.05)。3)试验Ⅲ组粪便丁酸含量显著高于试验Ⅱ组(P<0.05),与试验Ⅰ组差异不显著(P>0.05)。4)与试验Ⅰ组相比,试验Ⅱ组和试验Ⅲ组血清抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)含量极显著提高(P<0.01),试验Ⅱ组血清促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著提高(P<0.05);与试验Ⅱ组相比,试验Ⅲ组血清IL-1β含量显著降低(P<0.05),血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-2(IL-2)和TNF-α含量有一定程度降低但未达到显著水平(P>0.05)。综上可知,与豆粕型颗粒饲粮相比,杂粕型颗粒饲粮会降低生长猪采食量和养分消化率,提高血清炎性因子含量,而通过液态方式饲喂杂粕型饲粮可改善饲粮适口性,提高生长猪采食量,降低血清促炎因子IL-1β含量,对养分消化率无改善作用。

2021-2023年河南部分地区猪场猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病抗体检测与分析

为了解河南省猪场主要病毒性疾病抗体水平,于2021-2023年共采集8014份血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对所采集的样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒gE(PRV-gE)、猪伪狂犬病病毒gB(PRV-gB)的抗体水平进行检测。结果显示,CSFV抗体的总阳性率为85.70%(6868/8014),PRRSV抗体的总阳性率为81.83%(6558/8014),PRV-gE抗体的总阳性率为11.08%(888/8014),PRV-gB抗体的总阳性率为83.10%(6660/8014)。研究表明,CSFV总体疫苗免疫抗体水平良好,能够有效地控制该病在猪场的发生与流行,但猪群仍存在PRRSV和PRV的感染风险,需要完善免疫方案、加强防控。研究结果可为猪场制定合理的免疫程序提供参考,促进养猪行业的健康发展。