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人源中国Ⅲ型刚地弓形虫分离株在终末宿主内的发育研究
被引量:
2
1
作者
赵桂华
代莉莎
+7 位作者
朱进进
张丽新
徐超
徐昊志
肖婷
沈继龙
余莉
尹昆
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2022年第2期174-179,共6页
目的建立人源中国Ⅲ型弓形虫LHG株体外感染猫肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IECs)体系及体内感染开启有性生殖实验动物模型,观察其在不同感染条件下在终末宿主细胞内的发育情况。方法人源中国Ⅲ型LHG弓形虫分离株经口感染昆...
目的建立人源中国Ⅲ型弓形虫LHG株体外感染猫肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IECs)体系及体内感染开启有性生殖实验动物模型,观察其在不同感染条件下在终末宿主细胞内的发育情况。方法人源中国Ⅲ型LHG弓形虫分离株经口感染昆明KM小鼠42d成囊后,采用Percoll梯度离心法纯化脑组织包囊,经0.25%m/v胰酶消化释放缓殖子后体外感染猫IECs(1∶10,虫株:IECs)。取含有弓形虫包囊的KM鼠脑组织显微镜下计数,按600个包囊/只经口感染5只3月龄健康家猫,每天收集猫粪便,分别采用镜检及PCR扩增弓形虫特异性529bp重复序列及B1基因检测弓形虫卵囊排泄情况,采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和免疫荧光(immunofluorescence assay,IFA)鉴定感染猫小肠内裂殖子的发育,分析中国Ⅲ型虫株的体内有性生殖规律。结果LHG弓形虫分离株缓殖子在体外条件下可成功黏附、入侵猫IECs,在细胞内形成“玫瑰花”样结构,4~5d细胞破裂释放虫体,完成无性生殖过程,但未检测到与有性生殖相关的裂殖体、雌雄配子体及合子,且其体外黏附入侵宿主细胞效率显著低于Ⅰ型RH株;但其感染5只猫后,4~6d猫粪便内均检测到弓形虫卵囊,其小肠经IHC和IFA检测在IECs内均出现裂殖体样结构,说明成功开启了有性生殖过程,且效率高于自然条件下的既往报道数据。结论成功建立了中国Ⅲ型弓形虫LHG株体外感染猫IECs体系及高效开启有性生殖实验动物模型,证实该虫株是我国猫科动物的易感虫株,为研究弓形虫有性生殖机制及研制阻断弓形虫卵囊排泄传播药物及疫苗奠定基础。
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关键词
弓形虫
人源中国Ⅲ型弓形虫分离株
猫iecs
生长发育
卵囊排泄
原文传递
题名
人源中国Ⅲ型刚地弓形虫分离株在终末宿主内的发育研究
被引量:
2
1
作者
赵桂华
代莉莎
朱进进
张丽新
徐超
徐昊志
肖婷
沈继龙
余莉
尹昆
机构
山东省寄生虫病防治研究所(山东第一医科大学
病原生物学安徽省重点实验室(安徽医科大学)
人畜共患病安徽高校省级重点实验室(安徽医科大学)
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2022年第2期174-179,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.81702026,81871671)
山东省医药卫生科技发展计划项目(No.202101050261,202101050270)
+1 种基金
山东省泰山学者项目工程(tsqn202103186)
山东第一医科大学学术提升计划(No.2019QL005),山东省医学科学院创新工程。
文摘
目的建立人源中国Ⅲ型弓形虫LHG株体外感染猫肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IECs)体系及体内感染开启有性生殖实验动物模型,观察其在不同感染条件下在终末宿主细胞内的发育情况。方法人源中国Ⅲ型LHG弓形虫分离株经口感染昆明KM小鼠42d成囊后,采用Percoll梯度离心法纯化脑组织包囊,经0.25%m/v胰酶消化释放缓殖子后体外感染猫IECs(1∶10,虫株:IECs)。取含有弓形虫包囊的KM鼠脑组织显微镜下计数,按600个包囊/只经口感染5只3月龄健康家猫,每天收集猫粪便,分别采用镜检及PCR扩增弓形虫特异性529bp重复序列及B1基因检测弓形虫卵囊排泄情况,采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和免疫荧光(immunofluorescence assay,IFA)鉴定感染猫小肠内裂殖子的发育,分析中国Ⅲ型虫株的体内有性生殖规律。结果LHG弓形虫分离株缓殖子在体外条件下可成功黏附、入侵猫IECs,在细胞内形成“玫瑰花”样结构,4~5d细胞破裂释放虫体,完成无性生殖过程,但未检测到与有性生殖相关的裂殖体、雌雄配子体及合子,且其体外黏附入侵宿主细胞效率显著低于Ⅰ型RH株;但其感染5只猫后,4~6d猫粪便内均检测到弓形虫卵囊,其小肠经IHC和IFA检测在IECs内均出现裂殖体样结构,说明成功开启了有性生殖过程,且效率高于自然条件下的既往报道数据。结论成功建立了中国Ⅲ型弓形虫LHG株体外感染猫IECs体系及高效开启有性生殖实验动物模型,证实该虫株是我国猫科动物的易感虫株,为研究弓形虫有性生殖机制及研制阻断弓形虫卵囊排泄传播药物及疫苗奠定基础。
关键词
弓形虫
人源中国Ⅲ型弓形虫分离株
猫iecs
生长发育
卵囊排泄
Keywords
Toxoplasma gondii
human ChineseⅢgenotype strain
cat intestinal epithelial cells
development
oocyst excretion
分类号
R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人源中国Ⅲ型刚地弓形虫分离株在终末宿主内的发育研究
赵桂华
代莉莎
朱进进
张丽新
徐超
徐昊志
肖婷
沈继龙
余莉
尹昆
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2022
2
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