白藜芦醇调控猬信号对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)减轻输尿管梗阻诱导大鼠肾间质纤维化(RIF)的分子机制。方法将48只SD大鼠随机分为假手术组(n=16)、单侧输尿管梗阻(UUO)模型组(n=16)和模型+Res组(n=16)。模型+Res组于手术当天ig给予Res 20 mg·kg-1,每天1次,分别于梗阻术后第7和14天取其梗阻侧肾组织,用HE和Masson染色观察肾小管上皮细胞形态变化和RIF程度;ELISA检测肾组织中猬信号起始蛋白猬蛋白质(SHH)含量;免疫组织化学染色检测SHH,smoothened(Smo),patched-1(Ptch1)和Gli1、增殖细胞核抗原(PCNA)以及细胞外基质(ECM)成分Ⅲ型胶原蛋白表达;实时荧光定量PCR技术检测Smo,Ptch1和Gli1 mRNA的表达。结果 HE和Masson染色显示,UUO模型大鼠术后RIF程度随着梗阻时间延长而加重,Res治疗能减轻上述纤维化病变;免疫组织化学染色结果显示,与假手术组比较,UUO模型大鼠肾组织Ⅲ型胶原的表达显著升高(P<0.05),并且与细胞增殖相关的PCNA也明显高表达(P<0.05);Res治疗后Ⅲ型胶原和PCNA表达水平降低(P<0.05);UUO模型大鼠肾组织SHH,Smo和Gli1表达升高(P<0.05),Ptch1表达降低(P<0.05),且均可被Res逆转(P<0.05)。结论 Res可有效缓解输尿管梗阻所致的RIF,其机制可能为Res下调SHH信号活性,抑制细胞增殖,阻碍ECM成分合成,进而减轻其在肾间质的累积而改善纤维化。

音猬因子信号通路在宫腔粘连纤维化中的研究进展

宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)主要机制包括子宫内膜基底层损伤、子宫内膜修复障碍和纤维化愈合,进而导致女性闭经、月经过少、复发性流产或生育能力低下。子宫内膜纤维化与IUA的发展有关,但目前对IUA的分子机制尚不清楚。音猬因子(Sonic hedgehog,SHH)信号通路在胚胎发育、组织再生和器官发生中起关键作用。越来越多的研究证明SHH信号在各种组织中参与纤维化的发生。SHH信号通路的激活参与了上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和组织纤维化的诱导,促进成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化和纤维化。最近的研究揭示了IUA疾病中SHH信号被激活,表明这种信号的异常调节与子宫内膜纤维化之间存在潜在的联系。就近年SHH信号与IUA纤维化相关研究进展进行综述。

微小RNA-92a调控音猥因子途径对心肌缺血再灌注损伤后促血管再生的影响及机制

目的探究微小RNA-92a(miR-92a)调控音猥因子(SHH)途径对心肌缺血再灌注(I/R)损伤后促血管再生的影响及机制。方法从1~3d龄SD大鼠中培养原代心肌细胞后建立心肌细胞缺氧/复氧模型,将其分成心肌细胞常氧培养组和心肌细胞I/R组。miR-92a模拟物(mimic)和拮抗剂(inhibitor)转染入大鼠原代心肌细胞,使miR-92a过表达或低表达,分成对照组、I/R组、miR-92amimic组和miR-92ainhibitor组。细胞计数法8测定各组细胞活力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,ELISA和QT-PCR测定血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和血管生成素1等血管新生因子表达,Westernblot法测定SHH信号通路蛋白表达。结果心肌细胞I/R组miR-92a表达显著高于心肌细胞常氧培养组(3.89±0.29vs1.53±0.19,P<0.01)。对照组、miR-92ainhibitor组、I/R组和miR-92amimic组SHH蛋白(0.57±0.13vs0.51±0.11vs0.24±0.03vs0.14±0.02,P<0.01)、Smoothened蛋白(0.53±0.12vs0.49±0.10vs0.14±0.04vs0.09±0.01,P<0.01)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(0.56±0.14vs0.50±0.13vs0.15±0.03vs0.08±0.01,P<0.01)和神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(0.58±0.11 vs0.49±0.12vs0.18±0.02vs0.11±0.03,P<0.01)比较差异有统计学意义。结论miR-92a在心肌I/R损伤中异常高表达,抑制miR-92a表达可激活SHH信号通路有效促进血管再生因子表达。

高原驻训人员返回平原前后体内氧代谢和SHH信号通路的变化及意义

目的研究平原部队官兵在高原驻训6个月后返回平原的过程中,体内氧代谢与SHH信号通路的变化情况。方法选择从平原（海拔200m）进入高原（海拔3960m）驻训的男性官兵80人,年龄20~30（22.3±2.9）岁,在高原驻训6个月后返回平原。在进驻高原前、高原居留6个月及返回平原后第2天,采集空腹静脉血标本,采用分光光度比色法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）的含量,采用ELISA法检测血清SHH的含量,实时定量PCR检测外周血白细胞中SHH mRNA的转录水平,Western blotting检测细胞内SMO和细胞核蛋白GLI2的表达。结果进驻高原后,血清SOD活性显著降低（P〈0.05）,MDA含量显著升高（P〈0.05）。外周血SHH蛋白和mRNA表达水平,以及外周血白细胞SMO和细胞核GLI2表达水平在高原驻训时显著高于进驻高原前和返回平原后,但返回平原后仍显著高于进驻高原之前（P〈0.01）。结论高原暴露对体内氧代谢及SHH信号通路具有明显影响,高原低氧环境是激活SHH信号通路的原因之一。

胰腺癌SMO靶标治疗研究启示:从中药中发现新药(英文)

跨膜蛋白Smoothened(SMO)是音猬因子(sonic hedgehog homology,SHH)信号转导通路的主要成员,在SHH通信过程里发挥桥梁作用。在多种肿瘤组织中均可以检测到SHH的异常表达,胰腺癌干细胞SHH信号的表达明显高于普通胰腺癌细胞。SHH信号与肿瘤干细胞的自我复制,肿瘤血管和基质形成密切相关。使用以环巴胺、GDC-0449等SMO拮抗剂可以抑制SHH信号的异常转导,有效阻止肿瘤的生长和转移。目前已有多种SMO拮抗剂作为抗肿瘤药物进入Ⅰ期或Ⅱ期临床试验,已经有以SMO拮抗剂治疗胰腺癌的Ⅰ期临床试验。作为经典的SMO拮抗剂,环巴胺是从传统药用植物中提取出来的生物碱,这可能为中医药研究者提供思路,从中药中研发更加有效的SMO拮抗剂。

Hedgehog信号通路在肝细胞癌发生发展中的作用

Hedgehog(Hh)信号通路存在于多种动物体内,对调节胚胎发育及胚胎形成后分化起重要作用,其异常激活参与多种恶性肿瘤的发病过程。近年来研究发现Hh信号通路传导异常可导致肝细胞癌(HCC)发生,并与肿瘤侵袭、转移相关。深入探讨Hh信号通路与HCC的关系,将有助于进一步揭示HCC的发病机制,为HCC的防治提供新的可能途径及作用靶点。

Hedgehog信号通路在非酒精性脂肪性肝纤维化进程中的作用

随着肥胖及其相关代谢综合征在全球范围内的广泛流行,非酒精性脂肪性肝病引起了国内外学者的广泛重视。非酒精性脂肪性肝纤维化是单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎进展为肝硬化的关键环节和必经阶段。阐述了Hedgehog(Hh)信号通路对非酒精性脂肪性肝纤维化进程中肝细胞的作用,并对其进行了群体研究,表明Hh信号通路的异常激活推动了非酒精性脂肪性肝纤维化的进展。对Hh信号通路的深入研究可能为非酒精性脂肪性肝纤维化的治疗提供了一条新途径。

舌上皮味蕾功能性再生方法及机制的研究进展

味觉是人类重要感官,由增龄变化、舌癌手术、放化疗等引起的味觉功能障碍可影响人生活质量,味蕾再生需求逐渐得到关注。目前,关于味觉细胞发育及更新的基础研究为味蕾再生提供了理论基础;了解味蕾再生的分子机制有助于获悉准确的作用靶点;神经再生、组织工程、细胞因子疗法等新方法试图实现味蕾的功能性再生并加速其临床转化。本文围绕舌上皮味蕾再生机制及最新的组织工程学方法进行综述,以期为味觉损伤疾病的预防和治疗提供参考,为味蕾再生提供依据。

SHH蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨胚胎发育信号通路蛋白SHH在胰腺癌组织及其临床意义。方法:用免疫组化法检测45例胰腺癌组织与30例胰腺良性病变组织中SHH的表达,并分析SHH表达与胰腺癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:胰腺癌组织中的SHH蛋白阳性表达率明显高于胰腺良性病变组织(66.67%vs.0.00%,P<0.05)。胰腺癌组织中的SHH蛋白的阳性表达与是否患者的淋巴节转移、肿瘤分化程度、TNM分期明显有关(均P<0.05)。SHH表达阳性表达胰腺癌患者与SHH表达阴性患者的3年生存率及中位生存时间差异均无统计学意义(26.67%vs.20.00%;18.4个月vs.15.6个月,均P>0.05)。结论:SHH在胰腺癌组织中的阳性表达率增高,其阳性表达可能与患者的疾病进展有关,但与患者的远期预后关系尚不明确。

音猬因子在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的观察音猬因子(Shh)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法收集2008年1月至2012年12月在武汉市第五医院手术治疗的乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁正常乳腺组织各46例。采用实时荧光定量PCR法和免疫组织化学染色检测乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中Shh mRNA和Shh蛋白的表达,并探讨Shh蛋白与乳腺癌临床病理特征的关系。计数资料比较采用χ2检验,计量资料比较采用独立样本t检验或单因素方差分析。结果乳腺癌组织中Shh mRNA表达水平明显高于癌旁正常乳腺组织(1.54±0.47比0.60±0.38,t=-12.02,P=0.000),Shh蛋白阳性表达率也明显高于癌旁正常乳腺组织[69.6%(32/46)比17.4%(8/46),χ2=25.48,P=0.000],并且其表达水平与乳腺癌的临床分期密切相关,患者临床分期越晚,Shh蛋白表达水平越高[Ⅲ期+Ⅳ期∶Ⅰ期+Ⅱ期:77.8%(28/36)比4/10,χ2=5.28,P=0.022]。结论 Shh信号在乳腺癌组织中被激活。Shh异常表达可能与乳腺癌的发生、发展相关,其可以作为一个潜在的肿瘤标志物应用于临床。

HedgeHog抑制剂靶向治疗眼周基底细胞癌1例

患者女性,87岁。发现左眼内眦不规则肿物7年。患者身体状况不适合行根治性手术。手术活体组织检查确诊左眼内眦基底细胞癌。患者口服HedgeHog抑制剂靶向治疗6个月,肿瘤体积减小约90%,病情改善,肿瘤稳定,持续随访。

GLI1及Shh在卵巢型子宫内膜异位症恶变过程中的表达及其意义

目的探讨神经胶质瘤相关基因同源蛋白1(GLI1)及超音刺猬蛋白(Shh)在卵巢型子宫内膜异位症(EM)恶变过程中的表达及其临床意义。方法收集2000年4月—2018年4月在青岛大学附属医院及山东省威海市立医院行手术治疗的EM相关性卵巢上皮性癌(EAOC,即卵巢型EM恶变)患者50例(EAOC组),其年龄为(49±7)岁;另收集同期的卵巢异位子宫内膜非典型增生(aEM)患者35例(aEM组),其年龄为(44±9)岁,卵巢型EM患者50例(EM组),其年龄为(37±8)岁。实时荧光定量PCR技术及免疫组化EnVision二步法分别检测3组病变组织中GLI1、Shh mRNA和蛋白的表达,比较其在卵巢型EM恶变过程中的表达差异,分析GLI1与Shh表达的相关性,并分析GLI1及Shh表达与EAOC患者临床病理特征、预后的关系。结果(1)实时荧光定量PCR技术检测显示,EM组、aEM组、EAOC组病变组织中GLI1 mRNA的表达水平分别为1.77±0.40、3.54±0.44、7.80±0.24,Shh mRNA的表达水平分别为0.95±0.21、3.14±0.35、5.41±0.31,EAOC组GLI1、Shh mRNA的表达水平均显著高于EM组、aEM组(P均<0.01),EM组与aEM组分别比较,差异也均有统计学意义(P均<0.01)。免疫组化EnVision二步法检测显示,EM组、aEM组、EAOC组病变组织中,GLI1蛋白的高表达率分别为32%(16/50)、57%(20/35)及66%(33/50),Shh蛋白的高表达率分别为20%(10/50)、49%(17/35)、54%(27/50),3组分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。EAOC组织中,GLI1 mRNA与Shh mRNA的表达呈显著正相关(r=0.721,P<0.01),GLI1蛋白与Shh蛋白的表达也呈显著正相关(r=0.608,P=0.001)。(2)GLI1蛋白表达与EAOC患者的血清癌抗原125(CA125)水平、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移状态、铂敏感性显著有关(P均<0.05);Shh蛋白表达与EAOC患者的FIGO分期、淋巴结转移状态均显著有关(P均<0.05)。logistic回归模型多因素分析显示,FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、血清CA_(125)≥35 kU/L、GLI1蛋白高表达是影响EAOC患者预后的独立因素(P均<0.05)。Kaplan-Meier法生存分析显示,在EAOC患者中,GLI1蛋白高表达、低表达患者的5年总生存率分别为12.1%、35.3%,两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=10.73,P<0.01);Shh蛋白高表达、低表达患者的5年总生存率为11.1%、30.4%,两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=3.96,P=0.047)。结论GLI1及Shh均与卵巢型EM恶变相关,两者在促进卵巢型EM恶变方面可能有一定的作用,GLI1及Shh蛋白高表达提示EAOC患者的预后不良。

Shh在散发性甲状腺髓样癌中的表达及其临床意义研究

目的通过检测SonicHedgehog信号通路关键分子Shh在散发性甲状腺髓样癌表达情况，探讨其与散发性甲状腺髓样癌临床病理特征的关系及临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测11例甲状腺髓样癌患者癌组织及其癌旁组织病理蜡块标本中Shh的表达情况，分析其与临床病理特征的关系。结果Shh蛋白主要表达于细胞膜与细胞质中。甲状腺髓样癌组织中Shh阳性表达率72．7％（8／11）明显高于癌旁组织的9．1％（1／11）。癌组织中Shh的表达与患者性别及年龄均无关（P〉0．05），而与肿瘤的TNM分期有关（P〈0．05）。Shh在肿瘤直径≥1cm和直径〈1cm的表达阳性率分别为100％和20％。差异有统计学意义（P〈0．01）。Shh在有淋巴结转移的肿瘤组织中和无淋巴结转移的肿瘤组织中的表达阳性率分别为100％和40％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Shh信号通路的主要配体Shh蛋白在散发性甲状腺髓样癌中表达升高，并与肿瘤发生、分期及淋巴结转移有关，提示Shh信号通路的异常激活在散发性甲状腺髓样癌中发挥一定的作用，Shh蛋白为散发性甲状腺髓样癌预后判断指标及潜在的治疗靶点。

Hedgehog信号通路异常对人结肠腺癌多药耐药性的影响

目的:探讨Hedgehog(Hh)信号通路与人结肠腺癌细胞多药耐药的关系。方法:以结肠腺癌敏感细胞株HCT-8和多药耐药细胞株HCT-8/VCR为研究对象,采用Hh信号通路激动剂SAG及抑制剂GANT61进行干预。实验分为4组:HCT-8组、HCT-8/VCR组、HCT-8+SAG组(3nmol/L SAG干预48h)以及HCT-8/VCR+GANT61组(5μmol/L GANT61干预48h)。采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞耐药性及存活率。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别从基因和蛋白水平检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及Hedgehog信号通路相关蛋白Smo和Gli1的表达。结果:HCT-8/VCR组Smo、Gli1和P-gp基因及蛋白表达高于HCT-8组(P<0.05);HCT-8+SAG组24和48h时的细胞存活率及Smo、Gli1、P-gp基因和蛋白表达水平均高于HCT-8组(P<0.05);HCT-8/VCR+GANT61组24和48h时的细胞存活率及Smo、Gli1、P-gp基因和蛋白表达均低于HCT-8/VCR(P<0.05)。结论:人结肠腺癌细胞多药耐药性与Hh信号通路异常激活有关。

大鼠神经病理性痛时脊髓Sonic hedgehog信号通路与炎症反应的关系

目的评价大鼠神经病理性痛时脊髓Sonic hedgehog(Shh)信号通路与炎症反应的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠48只,8周龄,体重250~300g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)、二甲基亚砜组(D组)和Shh信号通路特异性抑制剂环巴明组(CP组)。NP组、D组和CP组采用坐骨神经分支选择性损伤法制备大鼠神经病理性痛模型。分别于造模前1d、造模后1和7d时测定机械缩足反应阈(MWT)。造模候7dMWT测定结束后处死大鼠,取L4-6脊髓组织,采用Western blot法测定Shh、Patched(Ptch)、Smoothened(Smo)及锌指转录因子(Gli1)的表达;采用ELISA法测定TNF-α及IL-1β的含量。结果与S组比较,NP组、D组和CP组MWT降低,脊髓组织Shh、Ptch、Smo和Gli1表达上调,TNF-α和IL-1β含量升高(P<0.05);与NP组比较,CP组MWT升高,脊髓组织Shh、Ptch、Smo和Gli1表达下调,TNF-α和IL-1β含量降低(P<0.05),D组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论Shh信号通路参与大鼠神经病理性痛形成和维持的机制与抑制脊髓炎症反应有关。

脊髓神经元sonic hedgehog吗啡耐受中的作用信号通路在小鼠

目的评价脊髓神经元sonic hedgehog（SHH）信号通路在小鼠吗啡耐受中的作用。方法清洁级健康雌性昆明小鼠，体重20～25 g，8～10周龄。采用皮下注射吗啡10 mg/kg，2次/d，连续7 d的方法制备吗啡耐受模型。实验Ⅰ 小鼠48只，采用随机数字表法分为2组：正常对照组（C组，n＝8）和吗啡耐受组（M组，n＝40）。于吗啡注射前1 d和注射结束后1、3、5、7和14 d时测定热痛阈。M组注射结束后各时点热痛阈测定后2 h时、C组于最后一次热痛阈测定后2 h时随机处死8只小鼠，取L4-6脊髓组织。实验Ⅱ 小鼠48只，采用随机数字表法分为6组（n＝8）：SHH抑制剂环巴胺＋吗啡耐受组（CP＋M组）、环巴胺溶媒＋吗啡耐受组（D1＋M组）、SHH激动剂SAG＋吗啡耐受组（SAG＋M组）、SAG溶媒＋吗啡耐受组（D2＋M组）、吗啡耐受＋环巴胺组（M＋CP组）、吗啡＋环巴胺溶媒组（M＋D1组）。于吗啡注射前15 min时，CP＋M组腹腔注射环巴胺10 mg/kg，SAG＋M组腹腔注射SAG 5 mg/kg。M＋CP组吗啡给药结束后1～3 d时腹腔注射环巴胺10 mg/kg，1次/d。于吗啡注射前、每天第1次吗啡注射后30 min、吗啡给药结束后1～3 d时测定热痛阈。最后一次热痛阈测定结束后2 h时处死，取L4-6脊髓组织。采用Western blot法检测脊髓SHH信号通路相关蛋白SHH、ptch1、smo、gli1和gli3的表达水平。结果实验Ⅰ 与C组比较，M组热痛阈于吗啡注射结束后1、3 d时降低（P〈0.05），5～14 d时差异无统计学意义（P〉0.05），吗啡注射结束后1～5 d时脊髓SHH、smo和gli1表达上调，1和3 d时ptch1表达上调，7 d时gli3表达上调（P〈0.05）。实验Ⅱ 与D1＋M组比较，CP＋M组热痛阈升高，脊髓SHH、ptch1、smo、gli1表达下调，gli3表达上调（P〈0.05）；与D2＋M组比较，SAG＋M组热痛阈降低，脊髓SHH、ptch1、smo、gli1表达上调，gli3表达下调（P〈0.05）；M＋CP组与M＋D1组上述指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）。与首次吗啡注射后30 min时比较，CP＋M组热痛阈于吗啡注射第3～7天及吗啡给药结束后1～3 d时热痛阈降低（P〈0.05）。结论小鼠吗啡耐受形成的部分机制与脊髓神经元SHH信号通路激活有关，而维持机制与其无明显关系。

缺氧状态下人视网膜色素上皮细胞中音猥因子与血管内皮生长因子表达的关系

目的观察缺氧状态下人视网膜色素上皮（hRPE）细胞中音猥因子（Shh）与血管内皮生长因子（VEGF）表达的关系。方法传代培养hRPE细胞，取对数生长期3～6代细胞用于实验。将hRPE细胞分为正常对照组、缺氧实验组及环巴明抑制组。缺氧实验组加入100gmol／LCoCl2，环巴明抑制组于制作缺氧状态前1h加入20μmol／L的环巴明进行预处理。3组细胞培养4、8、12、24h。采用荧光定量聚合酶链反应检测3组hRPE细胞中Shh、VEGFmRNA表达。采用酶联免疫吸附法检测正常对照组、缺氧实验组细胞培养上清液中Shh、VEGF蛋白表达。采用Pearson相关性分析法分析缺氧实验组hRPE细胞中Shh、VEGFmRNA表达与蛋白表达之间的关系。结果正常对照组可见少量Shh、VEGFmRNA及蛋白表达。缺氧实验组Shh、VEGFmRNA及蛋白表达较正常对照组明显增加，差异有统计学意义（F=178．364、183．732、77．456、91．572，P〈0．01）。环巴明抑制组Shh、VEGFmRNA表达较缺氧实验组明显降低，差异有统计学意义（F=68．745、121．834，P〈0．01）。相关性分析结果显示，缺氧实验组hRPE细胞中Shh蛋白表达与VEGF蛋白表达呈正相关（r=0．942，P〈0．05）；ShhmRNA表达与VEGFmRNA表达呈正相关（r=0．970，P〈0．01）。环巴明抑制组hRPE细胞中ShhmRNA表达与VEGFmRNA表达无相关性（r=0．915，P〉0．05）。结论缺氧状态下hRPE细胞中Shh与VEGF表达呈正相关。

脊髓Sonic hedgehog信号通路在大鼠神经病理性痛中的作用

目的评价脊髓Sonichedgehog（Shh）信号通路在大鼠神经病理性痛中的作用。方法健康雄性SD大鼠72只，8周龄，体重250—300g，采用随机数字表法，将其分为2组（n=36）：假手术组（S组）和神经病理性痛组（NP组），采用坐骨神经分支选择性损伤法制备大鼠神经病理性痛模型。分别于术前、术后1、4、7、14、21d时采用up-down法测定机械缩足反应阈（MWT）。于术后1、4、7、14、21d时MWT测定结束后处死大鼠，取L4-6脊髓组织，采用Westernblot法测定Shh、Patched（Ptch）、Glil及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达；采用实时荧光定量PCR法测定Shh、Ptch及Glil的mRNA表达；采用免疫组化法测定术后7d时脊髓组织Shh及GFAP表达。结果与S组比较，NP组术后各时点MWT降低，脊髓组织Shh、Ptch、Glil及其mRNA表达和GFAP表达上调（P〈0．05）。Shh主要表达于脊髓背角神经元的胞质及星形胶质细胞周围间隙。结论脊髓Shh信号通路参与了大鼠神经病理性痛的形成和维持。

异氟醚后处理对大鼠脑缺血再灌注时血管生成的影响及Shh信号通路在其中的作用

目的评价异氟醚后处理对大鼠脑缺血再灌注时血管生成的影响及Shh信号通路在其中的作用.方法清洁级健康雄性SD大鼠32只,6~8周龄,体重220~280g,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I∕R组)、异氟醚后处理组(ISO组)和异氟醚后处理+Shh信号通路特异性抑制剂环巴胺组(ISO+CYC组).采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,缺血1.5h,再灌注24h.再灌注24h时,行神经功能缺陷评分,然后处死大鼠取脑组织,TTC染色法测量脑梗死体积,尼氏染色法观察病理学变化,Westernblot法测定脑皮质神经胶质瘤相关癌基因同源物(Gli1)、血管内皮生长因子(VEGF)和抗人原始造血细胞抗原(CD34)的表达水平.结果与Sham组比较,I∕R组和ISO组神经功能缺陷评分和脑梗死体积升高,脑皮质Gli1、VEGF和CD34的表达上调(P<0.05);与I∕R组比较,ISO组神经功能缺陷评分和脑梗死体积降低,脑皮质Gli1、VEGF和CD34的表达上调(P<0.05),脑组织病理学损伤减轻,ISO+CYC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与ISO组比较,ISO+CYC组神经功能缺陷评分和脑梗死体积升高,脑皮质Gli1、VEGF和CD34的表达下调(P<0.05).结论异氟醚后处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与激活Shh信号通路,促进血管生成有关.

谷氨酸激活神经干细胞SHH通路机制的研究

目的探讨谷氨酸通过N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)激活SHH通路促进神经干细胞增殖的机制。方法将5只3日龄SD大鼠断头取脑分离神经干细胞(NSC);将NSC分为5组:正常组、谷氨酸刺激组、Conantokin-R组、SHH-shRNA组和shRNA对照组;通过Real-time RCR、Western Blotting、CCK-8检测NSC在NMDAR1受到抑制及SHH被shRNA下调情况下受到谷氨酸刺激后SHH、Nestin的表达变化及细胞增殖能力的变化;采用单因素方差分析中的LSD法进行统计分析。结果与正常组相比,谷氨酸刺激组和shRNA对照组SHH和Nestin的mRNA和蛋白表达明显上升(均P<0.05),Conantokin-R组SHH和Nestin的mRNA和蛋白表达无明显变化(均P>0.05)。SHHshRNA组SHH的mRNA和蛋白表达明显下调(均P<0.05),Nestin的mRNA和蛋白表达无明显变化(均P>0.05)。结论谷氨酸通过NMDAR1介导激活SHH通路。