血清学检测与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究

目的探究献血者血液筛查中应用血清学检测与核酸检测的相关性。方法选取本(血站)2017年4月-2018年5月期间无偿献血人员标本33,698份,均接受血清学与核酸检测。并对检测结果予以分析。结果无偿献血人员标本33,698份进行血清学与核酸检测,其中,有32,904份合格标本,794份不合格标本;酶联免疫检测双试剂反应性核酸检测无反应性显示:HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体分别有14例、26例、0例;酶联免疫检测双试剂与核酸检测同时有反应性显示:HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体分别有11例、10例、25例。46份单纯核酸反应性标本用科华试剂检测HBV、HCV、HIV、无反应性分别有5例、0例、0例、2例;46份单纯核酸反应性标本用华益美试剂检测HBV、HCV、HIV、无反应性分别有10例、0例、1例、28例。结论核酸检测在血清学阴性HBV感染的检出率较高,但对感染了HBV但病毒载量很低的献血者有漏检的可能;血液筛查中核酸检测不能取代血清学检测;科学对待核酸检测假阳性结果,有效制定献血者评估策略可使献血者流失明显减少。

血液筛查反应性献血者的归队情况分析

目的分析血液筛查反应性的献血者归队情况。方法选取2018年1月1日至2019年12月31日来浙江省血液中心申请归队的血液筛查反应性献血者进行进一步筛查,献血者标本HBsAg、抗-HCV、抗HIV、梅毒抗体检测采用ELISA和化学发光法,HBV/HCV/HIV核酸检测采用转录介导扩增技术和实时荧光PCR法。结果共461例献血者申请归队,其中男293例,女168例。申请归队献血者年龄35~45岁最多,164例,占35.6%。归队间隔时间最短180 d,最长8156 d,中位数为583 d。在418例完成归队流程者中231例允许归队、116例永久屏蔽、71例进入下一轮归队流程。按HBsAg、抗-HCV、HIV Ag/Ab、抗-TP、核酸联检原因分组,允许归队比例分别为64.2%、59.3%、74.5%、65.2%、33.1%,核酸联检组允许归队比例最低(P<0.05)。结论血液筛查反应性献血者检测后有一定比例的允许归队者,多数可能在屏蔽后的1年半左右申请归队。

献血者HIV ELISA反应性标本的结果分析及其灰区设置的探讨

目的探讨无偿献血者抗-HIV ELISA双试剂检测结合血液核酸检测(NAT)应用后ELISA(试剂)有无必要设置灰区。方法回顾性收集江苏省血液中心2010年6月—2017年8月采用2种HIV ELISA试剂(分别为第3、4代试剂)筛查反应性、并经核酸检测(NAT)和蛋白免疫印迹(WB)确证试验的585(人)份献血者标本,根据HIV ELISA初筛S/CO值和WB确证试验结果建立受试者工作特征曲线(ROC曲线),确定ELISA检测最适临界值;分析HIV ELISA检测反应性标本的NAT及WB确证结果,比较灰区临界值及厂商推荐临界值判定的反应性标本的确认阳性率。对抗-HIV不确定的8名献血者进行追踪并重新采样,根据追踪标本的检测结果确定其HIV感染状况。结果所用第3、4代HIV ELISA试剂最大约登指数对应的最适临界值分别为9.783和9.084;0.5≤S/CO<1灰区反应性标本确证试验结果均为阴性。第3、4代ELISA试剂双反应性且NAT阳性标本的WB确证试验阳性率91.24%(125/137);8例WB结果不确定标本中,有4例为ELISA单试剂反应性、NAT反应性且WB结果不确定,对其中3名献血者成功随访,随访时间3—8周,追踪检测≥2次,3人抗-HIV均转阳。结论采用第3、4代抗-HIV ELISA试剂检测不必设置灰区,第4代抗-HIV ELISA试剂检测结果结合NAT结果,可作为HIV窗口期感染和WB不确定结果献血者追踪检测的重要依据。

血清学方法检测献血者抗-HIV结果比较研究

目的了解各种血清学方法检测献血者抗-HIV的效果,探讨血清学方法的恰当及妥善应用以提高抗-HIV的准确性和检出率。方法收集广西血液中心2006年1月-2012年5月2次ELISA检测抗-HIV阳性及可疑标本972例检测结果,比较2个时间段检测结果符合性;在2次检测的基础上,再增加1次高特异性ELISA、或Determine、或明胶颗粒凝集试验（PA）、或胶体金标记法检测,以蛋白免疫印迹法（WB）做确证试验,对比与统计分析检测结果。结果献血者血液标本抗-HIV ELISA 2次检测结果的符合率为86.83%（844/972）,后阶段的检测符合率91.85%（383/417）优于前阶段83.06%（461/555）（P〈0.01）,双试剂检测符合性优于单试剂检测（P〈0.01）;2次抗-HIV ELISA检测均为阳性的标本,再使用Determine、或胶体金、或ELISA、或PA试剂检测1次并阳性,其与WB确证试验阳性的符合率可分别达100%、94.96%、77.05%和58.33%;ELISA检测抗-HIV阳性的标本相应的S/CO〉10者占87.90%（138/157）;抗-HIV阳性者确证条带gp160和gp120的阳性率为100%,gp41和p24的阳性率均为96.86%（154/159）,p55和p39阳性率为62.89%（100/159）和54.09（86/159）。结论在常规应用ELISA法检测献血者抗-HIV的基础上,恰当使用其他血清学方法可提高抗-HIV的准确性和检出率。

献血者中低水平HBsAg乙肝病毒感染者分子生物学特征研究

目的了解核酸检测初筛阴性献血者中低水平乙肝表面抗原(HBsAg)乙肝病毒(HBV)感染情况并探讨其分子生物学特征。方法从本中心2017~2018年100363(人)份无偿献血者血样中,收集HBsAg酶联免疫试验(ELISA)阳性核酸检测(NAT)阴性献血者标本,用化学发光微粒子免疫法CMIA复检HBsAg,用电化学发光免疫法(ECLI)定量检测乙肝两对半,再做NAT单人份复检,采用巢式聚合酶链反应(PCR)扩增病毒BCP/PC和S区,用荧光定量PCR(qPCR)测定病毒载量。结果本中心2017~2018年HBV DNA(-)的低水平HBsAg献血者(标本)的检出率0.054%(60/100363),其中HBsAg ELISA试剂1检出比例90%(54/60),试剂2检出比例95%(57/60);60例中有33个可做HBV基因分型的标本,B型占87.9%(29/33),其中3.4%(1/29)为血清型ayw1、96.6%(28/29)血清型adw2;C型占12.1%(4/33),均为血清型adqr+。巢式PCR扩增:在B型S基因区发现影响HBsAg检测Q101R、Q129H、T131I、M133L/T、F134L、G145R、V168A、L175S和V177A变异株,在BCP/PC区发现减少HBV复制的高频突变C1799G(87.5%,21/24)。qPCR测得病毒载量中位数49.6(0~628)IU/ml。结论ELISA检测低水平HBsAg且NAT阴性献血者标本中存在少数未能被目前ELISA方法检出的HBV。在献血者血液筛查中应用灵敏度和特异性更高的HBsAg和NAT检测方法可提高检出HBV突变株的能力。