食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1的毒性研究

目的:考察食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后的体内毒性,探索安全剂量范围,为后续临床试验提供参考信息。方法:30只食蟹猴随机分成3组,包括溶媒对照组和低、高剂量(1.0×10^(8)、4.0×10^(8)pfu)组,每组10只,雌雄各半。采用肌肉注射给药,每周给药2次,连续给药6周,恢复期8周。试验期间,每天观察动物的临床症状和摄食量,每次给药后1~2天观察注射部位症状,每周称量体重。分别在检疫期、首次给药后、给药期结束、恢复期结束的不同时间点进行安全药理(体温、血压、心电图)测定、临床病理(血液学、血凝、血清生化、尿生化)检查、免疫学(T淋巴细胞、细胞因子、免疫原性)测定、组织病理学检查和脏器称重。结果:给药后,动物未见异常症状、注射部位刺激性、体重和摄食量改变,未见安全药理和临床病理指标有意义的变化。与溶媒对照组比较,第41天,低剂量会引起动物CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例升高,高剂量未见明显变化。第13至97天,低、高剂量均能引起动物产生抗载体结合抗体、抗抗体,以及个别动物检出hPD-1表达产物。证明药物在体内产生免疫活性和介导免疫原性。组织病理学检查显示,给药期结束时,低、高剂量组动物注射部位极轻度至中度混合细胞浸润,高剂量组动物坐骨神经极轻度髓鞘/轴突变性;恢复期结束时注射部位病变减为极轻度,坐骨神经病变未见恢复趋势。低、高剂量组动物未见组织脏器重量改变。结论:食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后,动物体内耐受良好,受试物未见毒性反应剂量(NOAEL)是1.0×10^(8)pfu。上述研究结果为药物开展临床试验提供了数据支持。

磁共振细胞外容积分数联合PDFF成像在NAFLD食蟹猴模型中对早期肝脏纤维化的诊断价值

目的探讨肝脏磁共振细胞外容积分数(extracellular volume,ECV)及质子密度脂肪分数(proton density fat fraction,PDFF)在非酒精性脂肪性肝病早期肝纤维化(F1期)食蟹猴中的诊断价值｡方法纳入经肝穿病理证实的早期肝纤维化食蟹猴104只(F1期组)和10只健康对照组,对比两组肝ECV和PDFF值差异及对早期肝纤维的诊断效能｡结果F1期组ECV､PDFF值均高于对照组(P<0.001)｡ECV和PDFF与肝NAS评分呈中度相关(rECV-小叶炎症评分=0.432 P<0.001,rPDFF-脂肪变性评分=0.628 P<0.001),ECV在早期肝纤维､PDFF在脂肪定量评估中均具有良好的诊断效能(AUCECV=0.884,P<0.001,AUC-PDFF=0.991,P<0.001)｡结论MRI-ECV联合PDFF成像在NAFLD食蟹猴中对早期肝纤维化及脂肪定量评估具有巨大潜力.

我国的珍稀濒危野生动物 金丝猴

金丝猴在动物分类上属于猴科仰鼻猴属(又称金丝猴属),其显著特征是鼻孔大且上翘,全球共5种。我国有4种,其中3种为我国特有:川金丝猴(约25000只,分布于川、陕、甘、鄂)、滇金丝猴(约4000只,分布于滇、藏)、黔金丝猴(约700只,分布于黔);1种为我国(约300只,分布于滇)和缅甸都有的怒江金丝猴。金丝猴主食植物,具类似反刍动物那样的胃,其肠道微生物参与消化和发酵纤维素。猴群社会组织形式具多个组成层级:由一只成年雄猴和几只成年雌猴及未成年猴组成基本社会单元,基本社会单元组成小群,小群再聚集成大群。我国的金丝猴都被列为国家一级保护野生动物,也都成为保护旗舰种,其多数生境已得到保护,种群也在缓慢恢复。

艾滋病合并猴痘临床病理分析

本文分析了近期确诊的3例艾滋病合并猴痘患者临床表现和皮损组织学特征。3例患者均为青年男性,生殖器周围皮疹为首发表现,后扩散至全身,2例伴发热、1例有腹股沟淋巴结肿大,外周血HIV抗体阳性。咽拭子、皮疹拭子及肛拭子等标本猴痘病毒PCR检测均阳性;活检皮肤病理组织学表现一致:局部表皮全层及真皮浅层碎屑状坏死,坏死周围表皮细胞水肿及气球样变、多量中性粒细胞浸润伴核尘,表皮细胞胞质见嗜酸性小体,真皮层多量淋巴细胞、中性及嗜酸性粒细胞浸润。

非典型猴痘一例

本文报道一例24岁非典型猴痘男性患者,3天前包皮及龟头出现环状丘疹,无发热、咽痛等系统症状,发病前有无保护男男性行为。皮肤科查体:包皮、龟头可见数个绿豆、黄豆大小的环状丘疹,中央凹陷可见结痂,躯干、四肢及头面无明显皮疹。猴痘病毒检测阳性。对症治疗后皮疹逐渐消退。本例猴痘患者仅出现生殖器皮损,与常规猴痘表现不相同,在临床中容易误诊。

南京市猴痘感染状况分析

目的:分析南京地区猴痘患者的临床特征及实验室指标,为猴痘疫情的防控提供依据。方法:对南京市2023年7~9月88例就诊患者的人口学资料和实验室指标进行回顾性分析。结果:88例排查患者中有45例确诊为猴痘感染,其中男44例,女1例。36例(81.82%)男性近期有同性性行为。25例(55.56%)合并HIV感染,17例(37.78%)合并梅毒。39例(86.67%)患者有皮疹表现,主要分布于会阴部及肛周(29/39);27例(60.00%)有发热;12例(26.67%)有淋巴结肿大。33例(73.33%)患者C反应蛋白升高,39例(86.67%)降钙素原升高,41例(91.11%)白介素6升高。就诊患者筛查样本以肛拭子的阳性率最高(63.49%),猴痘患者的样本以疱液拭子阳性率最高(79.71%)。结论:南京地区主要感染对象为男男性行为者,高危人群筛查时可优先采集肛拭子,确诊患者监测病情可优先采集血液标本或疱液拭子。

梵净山同域分布黔金丝猴与藏酋猴的肠道微生物结构差异

肠道微生物与动物的健康密切相关,动物肠道微生物伴随宿主进化并与胃肠道构成复杂的微生态系统。为探究梵净山同域分布的黔金丝猴(Rhinopithecus brelichi)和藏酋猴(Macaca thibetana)的肠道微生物组成和功能差异,本研究采集两个物种冬季粪便样本进行16S rRNA基因高通量测序。结果显示,藏酋猴肠道微生物Chao1和Shannon指数都显著高于黔金丝猴(P<0.05),基于bray-curtis距离矩阵的β多样性分析发现两者的肠道微生物群落结构存在一定相似性和差异性。门水平,厚壁菌门(Firmicutes)占两者肠道微生物的绝对优势,且藏酋猴相对丰度高于黔金丝猴;属水平,除相对丰度较高的不动杆菌属(Acinetobacter)和颤螺旋菌属(Oscillospira)外,其他优势菌属类群均不相同。LEfSe分析发现粪球菌属(Coprococcus)、布劳特氏菌属(Blautia)、阿克曼菌属(Akkermansia)等与代谢通路功能相关的微生物在两者之间差异显著。PICRUSt功能预测分析表明,两者肠道微生物与新陈代谢、基因信息处理、环境信息处理和细胞过程等功能相关,Level 2水平,有3类代谢通路具有显著性差异(P<0.05)。黔金丝猴与藏酋猴肠道微生物组成和群落特征差异较大,可能是由于同域觅食灵长类的种类、数量及食物来源不同。同时,PICRUSt功能预测揭示了两者肠道微生物功能基因丰度的显著差异,表明两者可以通过调整自身肠道微生物组成来适应外界食物资源变化带来的挑战。该结果可为生态位高度重叠的两种灵长类肠道微生物的深入研究提供一定科学依据,也对两者开展野外人工保护干预措施的建立具有一定参考价值和现实意义。

猴痘抗病毒药物及疫苗研究现状

猴痘(Mpox)是一种由猴痘病毒(MPXV)感染引起的疾病,目前国际上没有针对猴痘病毒的特异性治疗药物,应用的抗病毒药物及疫苗既往主要用于治疗和预防天花等正痘病毒属相关疾病,抗病毒药物主要包括特考韦瑞、西多福韦、布林西多福韦等;疫苗主要使用ACAM2000、MVA-BN、LC16等,能够较好治疗和预防猴痘疾病的发生与发展。在无特效药物且无更有效、更安全疫苗的前提下,这些药物与疫苗可在早期治疗及预防中应用,以缓解猴痘病毒带来的临床症状,降低重症率和死亡率。本文从作用机制、临床试验、安全性等方面对抗病毒药物及疫苗进行论述,以期为我国猴痘的治疗和预防提供参考。

猴痘来袭,我们应该怎么做

猴痘是一种新发传染病,由猴痘病毒(MPXV)感染所致的一种人兽共患病,这意味着它可以从动物传播给人类,也可以在人与人之间传播。潜伏期为5~21天,多为6~13天。猴痘为自限性疾病,大多数病例症状会自行消失,但部分患者可出现并发症,包括皮损部位继发细菌感染、脑炎等。

贵州省兴义市猕猴种群现状及人猴冲突分析

【目的】研究兴义市猕猴(Macacamulatta)种群分布特征,分析猕猴栖息地存在的人猴冲突原因,为解决人猴矛盾提供理论依据。【方法】野外调查采用样带(样线)调查、定点观测与结构化问卷调查相结合的研究方法,数据分析采用描述性统计分析法。【结果】兴义市猕猴种群数量从1989年的110只左右增长到2022年的3240只左右;30余年的时间,猴群分布范围已从马岭河峡谷下游的小区域扩散至相邻10个乡镇(街道)的31个行政村。【结论】猕猴种群增长过快、数量基数过大以及人猴生存空间的高度重叠是造成人猴冲突剧增的主要原因。建议在对种群开展长期监测的基础上,科学区划猕猴种群分布的核心区并采取科学的种群调控措施,同时,建立健全野生动物危害补偿机制等,以进一步控制猴群过快增长和缓解人猴冲突问题。

野生藏酋猴的体重及其影响因素

体重是体现灵长类动物生活史和生长发育特征的重要指标,可反映其生理状况、行为变化和生态适应等信息。本研究以安徽黄山野生猴谷YA1群的48只藏酋猴为对象,使用地磅秤对群内个体进行连续11个月(2022年7月至2023年5月)的体重监测。研究结果显示,雄性藏酋猴的平均体重为(18.71±2.33)kg,显著高于雌性(11.79±1.97)kg。未成年雄性藏酋猴体重的快速发育期为3~5岁,雌性为2~3岁。成年雌雄体重与个体社会等级间均存在显著的正相关关系(P<0.001)。成年藏酋猴体重存在显著的季节变化(P<0.05),雌雄个体体重均在秋季最高,但是雄性个体在冬季最低,雌性个体春季最低。未怀孕个体体重在不同季节无显著性差异,而怀孕个体的体重从冬季到春季显著降低(P<0.05)。本研究表明,藏酋猴的体重具有显著的雌雄性二型现象,未成年雌雄个体体重的快速发育期存在明显分化,季节和社会等级对藏酋猴体重均具有显著影响。

野生藏酋猴理毛行为与肠道寄生虫感染的关系

理毛行为是灵长类动物群体中普遍存在且频繁发生的行为模式,越来越多的研究证实,对理毛者来说为其他个体理毛不再是一种低代价的投资,其主要原因是理毛行为能够增加寄生虫感染的潜在风险。然而,理毛行为感染何种类型寄生虫及其感染风险如何仍值得进一步研究。本研究以栖息于安徽黄山的野生藏酋猴(Macaca thibetana)为研究对象,采集动物个体的粪便样品并检测其中寄生虫的种类,通过分析理毛行为与寄生虫感染的关系,探讨理毛者在理毛投资过程中的潜在风险。结果显示,野生藏酋猴共感染了11种寄生虫,感染线虫(Capillaria spp.,Trichostrongylus spp.)和结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)的风险最高(均为93%),感染鞭虫(Trichuris trichura)的风险次之(54%)。基于两两个体之间的理毛关系,研究发现,发起理毛行为时间越长感染结肠小袋纤毛虫的概率越高;接收理毛行为时间越长,感染蛔虫的概率越低。基于理毛行为网络的分析发现,理毛网络中节点强度较高的个体感染结肠小袋纤毛虫的概率最高。本研究不仅有助于认识和理解野生藏酋猴寄生虫感染状况,也为深入理解理毛行为的风险代价及其功能结果提供更多科学依据。

成年食蟹猴视网膜结构和功能参数

目的测量成年食蟹猴视网膜结构和功能参数,探讨非人灵长类动物与正常人视网膜结构和功能参数的相似度。方法对3只5岁龄成年食蟹猴的6只眼进行彩色眼底照相、视网膜光学相干断层扫描(OCT)、视网膜电图(ERG)等在体的眼科学检查,测定猴眼视网膜黄斑中心凹区及距黄斑中心凹鼻侧、颞侧、上方、下方各1000μm、2000μm处的内外层视网膜厚度、视网膜神经纤维层(RNFL)厚度以及视盘面积、视杯面积、杯盘面积比等视盘参数和闪光ERG的生物学参数。比较不同眼别间各参数差异。参照既往已发表文献,比较各参数与正常人的相似度。结果正常成年食蟹猴的视网膜黄斑中心凹处厚度为(252.31±4.79)μm,视盘面积为(1.89±0.05)mm2,杯盘面积比为0.14±0.01,RNFL平均厚度为(103.53±0.58)μm。暗适应0.01 ERG b波振幅为(66.75±7.29)μV,暗适应3.0 ERG a、b波振幅分别为(57.15±15.01)、(122.10±25.51)μV,暗适应10.0 ERG a、b波振幅分别为(72.98±20.14)和(131.67±13.78)μV,振荡电位振幅为(49.98±10.08)μV,峰时为(30.02±5.76)ms。明适应3.0 ERG a、b波振幅分别为(9.16±2.75)和(40.43±5.57)μV。明适应闪烁光反应峰时为(26.61±1.19)ms,振幅为(24.72±5.10)μV。左、右眼各参数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。食蟹猴中心凹区视网膜厚度、平均RNFL厚度、ERG的波形和振幅等结果与正常人的视网膜参数相近。结论成年食蟹猴视网膜结构和功能与正常人相近,其作为临床前药物研究的实验动物,可参考健康人群的视网膜参数。

猴痘病毒A5L蛋白的原核表达及其免疫原性评价

【目的】获取高纯度猴痘病毒(Monkeypox virus, MPXV)A5L蛋白,制备小鼠抗A5L高效价抗血清,为MPXV A5L蛋白功能研究及相关诊断试剂的研发提供材料。【方法】构建重组质粒pET-28a-A5L,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,通过分析不同IPTG诱导浓度、诱导温度、诱导时间条件下重组蛋白A5L表达情况,筛选最佳表达条件。通过Western blotting鉴定重组蛋白A5L表达,利用SDS-PAGE分析重组蛋白可溶性。A5L蛋白经His-Bind镍柱亲和层析纯化后免疫小鼠,通过ELISA法检测抗体效价。【结果】双酶切和测序结果显示,原核表达载体pET-28a-A5L构建成功。Western blotting结果显示重组蛋白A5L在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中成功表达;A5L蛋白在诱导温度42℃、诱导剂(IPTG)浓度为1.6 mmol/L、诱导16 h后表达量最高,大小为40 ku。SDS-PAGE分析结果显示,A5L蛋白主要以包涵体形式存在,最佳咪唑洗脱浓度为50 mmol/L。ELISA结果显示,制备的鼠抗A5L蛋白抗体最高效价达1∶205 440。【结论】本研究成功构建了重组质粒pET-28a-A5L,并在原核表达系统中成功表达重组蛋白A5L,制备的A5L多克隆抗体具有较好的免疫原性,研究结果为进一步探究MPXV A5L蛋白的生物学功能奠定基础。

猴痘一例

患者,男,29岁。阴茎疱疹伴疼痛4天。查体见生殖器及肛周疱疹,伴有瘙痒、疼痛,腹股沟处有肿大的淋巴结。辅助检查显示患者咽拭子、疱疹涂抹及血液样本猴痘病毒核酸均为阳性。患者发病3周前有男男高危性行为史。诊断:猴痘。患者转定点传染病医院治疗。

猴痘病毒感染的神经系统表现研究进展

在过去的一年内,猴痘的爆发已成为全球关注的问题。猴痘是猴痘病毒感染引起的人畜共患病,除典型的皮疹症状以外,猴痘病毒感染还可引起一系列神经系统表现,潜在的机制可能包括感染后免疫介导的神经系统损伤,以及病毒直接侵入神经系统。本文围绕猴痘病毒感染的神经系统表现进行综述,以促进早期识别、诊断猴痘病毒感染神经系统并发症,及时采取相应的防治措施。

广西实验猴资源现状的调查研究

为推进广西实验猴生产和使用许可单位的标准化、规范化建设,完善实验动物管理体系,开展广西实验猴资源现状的调查研究。采用文献研究、现场调查和调查问卷相结合的方法,对广西17家实验猴的生产和使用许可单位的生产经营现状进行调查,2022年广西共生产实验猴15 110只,使用实验猴1 783只,实验动物从业人员为496人,实验猴生产设施面积为126 449.73 m2,实验猴使用设施面积为10 412.66 m2。文章开展的调查获得了实验猴生产与使用、实验猴产业从业人员和设施建设等方面的详细资料,摸清了广西实验猴资源及产业现状,发现了广西实验猴产业存在的问题,并提出了相应的发展建议,以期助力广西实验猴产业发展。

艾滋病合并淋病、猴痘患者一例的护理

本文报告了一例艾滋病病毒(human immunodeficiency virus,HIV)合并淋病、猴痘患者的护理经过,护理措施包括:消毒隔离管理(病房的准备、患者的准备以及医务人员的防护、正确采集标本及安全运送、病房环境的管理)、加强生活基本需求护理、病情观察等基础护理、全程人性化护理(入院前专人接诊、告知居住注意事项、帮助患者解决基本生活需求、提供同伴教育及心理疏导,直至出院后的随访管理),以及缓解患者的焦虑情绪,帮助患者建立治疗康复信心。经过精心治疗及护理,患者好转出院,参与治疗护理的医务人员未发生职业暴露。

猴痘病毒B20R蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备

【目的】构建猴痘病毒B20R蛋白原核表达系统,并评价原核表达获得的融合蛋白免疫原性,为后续的猴痘病毒检测及新型治疗方法开发提供技术支撑。【方法】参照GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列,按照大肠杆菌密码子偏好性对B20R基因DNA序列进行优化,人工合成B20R基因并将其分别克隆至表达载体pET-28a和pET-32a以构建原核表达载体;以构建的2种原核表达载体分别转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达后使用SDSPAGE和Western blotting检测融合蛋白B20R的表达情况。通过控制变量法优化融合蛋白B20R的诱导表达条件,使用Ni柱亲和层析进行纯化;以纯化的融合蛋白B20R经腹腔注射免疫昆明小鼠,定期采集昆明小鼠血样,采用ELISA检测血清抗体效价。【结果】将B20R基因克隆至表达载体pET-32a能成功构建原核表达载体pET-32a-B20R,经IPTG诱导后,可在大肠杆菌BL21感受态细胞中表达出融合蛋白B20R,且主要以不可溶的包涵体形式进行表达。融合蛋白B20R最佳诱导表达条件为37℃下以0.6 mmol/L IPTG诱导12 h,Ni柱亲和层析纯化的最佳咪唑洗脱浓度为40 mmol/L。以纯化的融合蛋白B20R接种免疫昆明小鼠,可在短时间内引起昆明小鼠产生强烈的体液免疫,且至免疫第42 d仍然维持较高的抗体水平,抗体效价高达1∶409600。【结论】构建的猴痘病毒B20R蛋白原核表达载体可在大肠杆菌BL21细胞中以包涵体形式成功表达出融合蛋白B20R,且融合蛋白B20R具有良好的免疫原性,可在短时间内引起昆明小鼠产生强烈的体液免疫。

猴痘合并HIV感染一例

患者,男,21岁。10天前有男男高危性接触史。4天前出现发热,3天前肛周出现脓疱、溃疡,伴瘙痒。皮肤科查体:肛周见多发溃疡面。HIV感染2年。实验室检查:溃疡面组织液检查MPXV-qPCR(+)。诊断为猴痘。