基于代谢组学探讨玄参-苍术联合二甲双胍治疗2型糖尿病大鼠作用机制

目的:采用代谢组学方法分析玄参-苍术联合二甲双胍治疗2型糖尿病大鼠的作用机制。方法:采用高脂饮食联合链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,分为空白组、模型组、阳性组和治疗组。治疗后6周,检测各组大鼠体质量、血糖、丙氨酸氨基转移酶、空腹血清胰岛素、核转录因子(NF-κB)、大鼠隐热蛋白(NLRP3)等指标水平,初步评价玄参-苍术联合二甲双胍对2型糖尿病大鼠的治疗作用。进一步采用UPLC-MS/MC非靶向代谢组学揭示各组之间的代谢谱,筛选差异代谢物并进行鉴别。结果:与阳性组比较,治疗组改善临床症状及降低餐后高血糖的作用更为明显(P﹤0.05),且可显著降低NF-κB和NLRP3水平(P﹤0.01)。通过代谢组学筛选出36种差异代谢物作为玄参-苍术联合二甲双胍治疗糖尿病作用机制的相关血清潜在生物标志物。D-谷氨酰胺和D-谷氨酸是玄参-苍术联合二甲双胍治疗糖尿病涉及的相关的代谢通路。结论:玄参-苍术联合二甲双胍治疗糖尿病有效,推测其机制是通过调节D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢通路基因的表达以维持“谷氨酰胺-谷氨酸”动态平衡,抑制NF-κB/NLRP3通路激活,进而提高机体对胰岛素敏感性、调节糖脂代谢紊乱、减轻炎症反应。

不同配比苍术-玄参药对中4种成分溶出率的变化规律

目的采用HPLC法研究不同配比苍术-玄参药对中哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、苍术素溶出率的变化规律。方法分析采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长210 nm(哈巴苷)、280 nm(哈巴俄苷、安格洛苷C、苍术素);柱温25℃。结果当药对配伍比例为2∶1时,4种成分的总溶出率最高,而为1∶2时最低。结论哈巴苷和安格洛苷C的溶出率随苍术比例的增加而升高,而哈巴苷的溶出率和哈巴俄苷可能成反比关系。

苍术-玄参有效部位配伍对糖尿病模型小鼠的治疗作用研究

目的:研究苍术-玄参药对有效部位配伍后对小鼠糖尿病的治疗作用,探讨其可能的降糖作用机制。方法:将苍术-玄参药对2个主要有效部位(多糖部位、正丁醇部位)按配比分为:1∶1、1∶2、2∶1,共3组。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高脂饲料建立小鼠糖尿病模型,以空腹血糖(FBG)为考察指标,考察有效部位最优配比。通过测定肝脏组织中的丙二醛(MDA)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,探讨可能的降糖机制。结果:经多元统计分析,多糖-正丁醇部位2∶1配伍时,对糖尿病小鼠降糖效果最佳。多糖和正丁醇部位配伍可以显著降低MDA水平,明显增强GSH-Px和SOD活性。结论:苍术-玄参药对中多糖和正丁醇部位按照2∶1比例配伍降糖作用最为显著,其降糖机制可能与提高小鼠机体抗氧化能力有一定的相关性。

苍术-玄参药对对糖尿病小鼠降糖作用有效部位筛选

目的:考察苍术-玄参药对不同溶剂提取部位对糖尿病模型小鼠空腹血糖(FBG)和血脂的影响,筛选苍术-玄参药对降糖作用有效部位。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料法建立糖尿病小鼠模型。以二甲双胍作为阳性对照药物。药物组分别ig给予苍术-玄参药对的多糖、挥发油、正丁醇、乙酸乙酯、二氯甲烷提取部位。观察小鼠基本状态和饮食饮水量,测定空腹血糖以及血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量。结果:与对照组比较,苍术-玄参药对中多糖和正丁醇部位能显著降低糖尿病小鼠空腹血糖含量(P<0.05;P<0.01)。二者对糖尿病小鼠血脂中TC、TG、LDL-C水平降低明显,对HDL-C水平升高显著(P<0.05;P<0.01)。结论:多糖和正丁醇部位是苍术-玄参药对降糖作用的有效部位。

苍术-玄参药对HPLC指纹图谱的建立及指标性成分研究

建立了10批苍术-玄参药对的HPLC指纹图谱,共确定了18个共有峰,13个来源于苍术,5个来源于玄参。通过聚类分析将样品分为3类。同混合对照品比对,指认了其中8个指标成分。通过研究配伍前后指标性成分含量变化,结果显示药对配伍后毛蕊花糖苷、安格洛苷C、白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素含量增高,而哈巴俄苷、肉桂酸、白术内酯Ⅰ含量有所降低。所建立的苍术-玄参药对HPLC指纹图谱和定量分析方法,能快速、准确地对药对进行质量评价。

Box-Behnken效应面法优化苍术-玄参药对提取工艺

目的:通过Box-Behnken效应面法优化苍术-玄参药对的提取工艺。方法:以提取时间、溶媒比、浸泡时间为自变量,以总评"归一值"(包括安格洛苷C、哈巴俄苷、哈巴苷、苍术素的含量及浸膏率)为因变量,对自变量各水平进行二项式拟合,采用Box-Behnken效应面法对提取工艺优选,最后预测分析。结果:确定的最优提取工艺为:浸泡时间50 min,溶媒比11倍,提取2次,每次提取85 min。二项式拟合复相关系数较高(r=0.964 9),回归模型的预测值与实际测定值的偏差率为-2.81%。结论:Box-Behnken效应面法优选的苍术-玄参药对提取工艺,操作简便,合理可行。