通过玉米茎尖转化耐草甘膦基因2mG2-epsps及抗性鉴定

以X2211、78599等10个优良玉米自交系的茎尖为受体材料,采用农杆菌介导和真空负压法将抗除草剂基因2mG2-epsps转入玉米茎尖生长点分生组织细胞,转化后的茎尖经共培养3 d,植入花盆,3叶1心经除草剂（glyphosate,草甘膦）筛选,产生耐草甘膦1‰~1.25‰植株,移栽大田。从种子萌发准备茎尖到转化苗喷施除草剂筛选、移栽大田,整个周期只需30 d左右。同时,经特异PCR检测表明：2mG2-epsps基因已整合进部分植株。

不同玉米自交系中导入SAMS基因的转化与检测

以优良玉米自交系丹598、郑58、昌7-2、掖478的茎尖为受体,采用农杆菌介导法将抗旱基因SAMS转入玉米,对转化植株进行PCR检测,共获得阳性植株35株,表明SAMS基因已经整合到玉米基因组中。同时对影响茎尖转化效率的主要因素进行研究。结果表明,侵染时间、菌液浓度、共培养时间和乙酰丁香酮对转化率影响显著。菌液OD600值为0.5～0.7,侵染15min,共培养3d,乙酰丁香酮浓度为100μmol/L时,有利于提高玉米茎尖转化率,其中昌7-2转化率最高。