高效液相色谱法测定大鼠口服玉米黄素双棕榈酸酯后胃肠道含量变化

目的 研究玉米黄素双棕榈酸酯经大鼠口服后在胃肠道内容物、粪便中的含量及存在形式,为功效评价提供依据。方法 24只SD大鼠分为空白组和口服玉米黄素双棕榈酸酯组(低剂量组0.1 mL/100 g、中剂量组0.2 mL/100 g、高剂量组0.4 mL/100 g),饲养90 d后分别收集大鼠粪便、胃内容物、空肠和回肠段内容物,采用高效液相色谱法(HPLC)测定玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯。结果 大鼠口服玉米黄素双棕榈酸酯后,胃内容物中含有玉米黄素双棕榈酸酯(100~300μg·g^(-1)),与给药剂量呈正比;空肠中玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯的含量是胃内容物中的2倍左右;回肠内容物中,高剂量组玉米黄素的含量是低、中剂量组的100倍;粪便中玉米黄素双棕榈酸酯的含量为玉米黄素的10倍左右。结论 玉米黄素双棕榈酸酯在胃内不易分解,受肠道内环境、肠道酶的影响在肠道内容物中部分转换为玉米黄素,剩余大量药物则以原形在粪便中被排出体外。

玉米黄素双棕榈酸酯乳液制备及其稳定性研究

为了探索适宜的玉米黄素双棕榈酸酯(ZDP)乳液制备工艺,通过高压均质方法,采用2种天然乳化剂:大豆卵磷脂(SL)和乳清分离蛋白(WPI)和4种合成乳化剂:十聚甘油单油酸酯(PGE18)、十聚甘油单月桂酸酯(PGE12)、蔗糖酯(SE15)和吐温80(T80),以及2种不同油相:大豆油(SO)和中链甘油三酯(MCT),分别制备了ZDP乳液,研究了不同乳化剂种类和质量分数以及油相种类对ZDP乳液性质和稳定性的影响。同时,在最佳乳化剂条件下,研究了ZDP添加量对乳液性质的影响。研究结果表明:天然乳化剂乳化制备所得ZDP乳液平均粒径大,且稳定性一般。小分子合成乳化剂制得的ZDP乳液平均粒径小,但稳定性差异大。其中,PGE18为乳化剂时制备的乳液各项指标较好,且在质量分数为0.8%时乳化效果最好。MCT为油相较SO为油相制备所得乳液稳定性好。因此,选择质量分数为0.8%的PGE18为乳化剂,MCT为油相,高压均质可以制得粒径小于200 nm的ZDP乳液,且在4℃下贮藏28 d仍可保留约90%的ZDP。ZDP添加量变化在4~32 nmol/g时对ZDP乳液的粒径和电位无显著影响。

枸杞子中玉米黄素双棕榈酸酯的定性与定量分析

目的建立枸杞子中玉米黄素双棕榈酸酯(ZD)定性和定量分析方法。方法采用薄层色谱(TLC)法,以石油醚∶乙酸乙酯(9.5∶0.5,V/V)为展开剂,温度选择室温25℃,湿度影响忽略不计,日光和紫外光灯(365 nm)下检视,建立ZD的定性鉴别方法;采用超高效合相色谱/二极管阵列检测器(UPC^(2)-PDA),色谱柱为HSS C_(18)(150 mm×3.0 mm,1.8μm),CO_(2)和助溶剂甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL/min,进行ZD的含量测定。结果所建立的TLC方法斑点清晰,重复性好,可实现不同产地枸杞子中ZD的快速、简便鉴别。UPC^(2)-PDA可实现绿色、高效地对该成分进行含量测定,ZD在12.5 g/mL~500.0 g/mL范围内线性关系良好(R^(2)=0.9997),平均回收率92.40%,RSD为1.15%。26批不同产地枸杞子样品中,ZD含量范围为0.929 mg/g~3.210 mg/g,不同地区枸杞子中ZD含量差异较小。结论所建立的定性、定量方法专属性强,重复性好,可用于枸杞子质量控制,可为后续枸杞子质量标准提升研究提供科学依据。

枸杞子中玉米黄素双棕榈酸酯及枸杞酸的测定

目的:建立枸杞子中脂溶性活性成分玉米黄素双棕榈酸酯及水溶性活性成分枸杞酸(AA2βG,即2-O-(β-葡糖苷)-抗坏血酸)的液相含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件为Luna C_(18)(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相丙酮:甲醇=55:45,等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长450 nm;枸杞酸检测:UPLC,Waters二醇基柱Torus TM Diol Column(3 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-66.7 mmol/L醋酸铵(体积比85:15),等度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温40℃,检测波长260 nm。结果:玉米黄素双棕榈酸酯在0.01~0.1 mg/mL范围内线性关系良好,r为0.9990;平均回收率为99.44%,RSD为4.04%。枸杞酸在3.125~100μg/mL范围内线性关系良好,r为1.0000;平均回收率为96.30%,RSD为3.61%。22批枸杞样品中,玉米黄素双棕榈酸酯含量最高可达0.51%,枸杞酸含量最高可达1.33%。结论:该方法均准确可靠,重现性良好,可用于枸杞子的质量控制。

枸杞玉米黄素双棕榈酸酯脂质体的制备及其体外抗氧化活性

为提高枸杞玉米黄素双棕榈酸酯的稳定性和生物利用度,本文采用超声波法制备枸杞玉米黄素双棕榈酸酯脂质体,并通过DPPH清除力、还原力和抗脂质过氧化能力考察其抗氧化活性。结果表明,当玉米黄素双棕榈酸酯,胆固醇,吐温80与卵磷脂的比例分别为1∶6,1∶4和2∶10,以弱酸性磷酸缓冲盐(p H=6.6)为水化介质时,玉米黄素双棕榈酸脂质体的包封率最高,为97.99%。体外抗氧化活性实验结果表明,低包封率的脂质体清除DPPH自由基的能力较小,随着脂质体包封率的增大,其清除DPPH自由基的能力和抗脂质过氧化能力均显著提高(p <0.05),但对于还原力没有显著性影响。本文对玉米黄素双棕榈酸酯脂质体的制备方法及抗氧化活性进行了初探,为其可行性研究提供理论指导。

玉米黄素双棕榈酸酯平衡溶解度及油水分配系数的测定

目的:对玉米黄素双棕榈酸酯(ZDP)在不同有机溶剂与pH缓冲液的平衡溶解度(S)与不同pH缓冲液内的油水分配系数(lgP)进行考察。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定玉米黄素双棕榈酸酯在不同有机溶剂、pH缓冲液的平衡溶解度,结合摇瓶法、正辛醇-水系统测定玉米黄素双棕榈酸酯的油水分配系数。结果:玉米黄素双棕榈酸酯在水中的平衡溶解度极低,且随着pH的变化溶解度的影响变化不明显,在二氯甲烷中溶解度最大,为(1502.26±130.73)μg·mL^(-1)。玉米黄素双棕榈酸酯的油水分配系数受pH的影响较小,在pH=2.0时,lgP最大,达到1.02。结论:HPLC法测定玉米黄素双棕榈酸酯的平衡溶解度、油水分配系数操作简便、准确性良好。

VLC法分离纯化枸杞子中类胡萝卜素的研究

采用真空液相色谱（VLC）法，快速、简易、高效地分离、纯化了枸杞子中类胡萝卜素及其脂肪酸酯；采用薄层色谱法，对比了氧化镁和硅胶两种吸附剂的分离、纯化效果。结果表明，依次用氧化镁和硅胶为吸附剂进行的两次真空柱色谱分离，可有效去除脂溶性杂质并分离类胡萝卜素各组分，是类胡萝卜素分离、纯化的可靠方法。

枸杞HPLC指纹图谱的建立及3种成分测定

目的建立枸杞HPLC指纹图谱,并测定3种成分的含有量。方法枸杞石油醚-丙酮提取物的分析采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-甲醇-正己烷-二氯甲烷(40∶15∶20∶20);体积流量1 mL/min;柱温25℃;检测波长450 nm。结果 12批样品指纹图谱中有9个共有峰,相似度均大于0.9。玉米黄素、β-胡萝卜素、玉米黄素双棕榈酸酯分别在0.42~20.80、0.09~4.26、36.80~1 840.00μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率96.5%~103.2%,RSD 2.71%~3.73%。结论该方法稳定可靠,可用于枸杞的质量控制。

枸杞子中4种类胡萝卜素成分含量测定一测多评法的建立

目的 建立同时测定枸杞子中玉米黄质、β-胡萝卜素、β-隐黄素棕榈酸酯、玉米黄素双棕榈酸酯含量的方法。方法 枸杞子药材经正己烷-无水乙醇-丙酮-甲苯(10∶6∶7∶7,V/V/V/V)超声提取后,采用高效液相色谱法进行测定。以YMC C30为色谱柱,以甲醇-乙腈-水(81∶14∶5,V/V/V)为流动相A、二氯甲烷为流动相B进行梯度洗脱,柱温为20,流速为1.0 mL/min,检测波长为450 nm,进样量为20μL。以玉米黄质为参照物,计算β-胡萝卜素、β-隐黄素棕榈酸酯、玉米黄素双棕榈酸酯的相对校正因子,再以此计算上述成分的含量,并与外标法测定结果进行比较。结果 玉米黄质、β-胡萝卜素、β-隐黄素棕榈酸酯、玉米黄素双棕榈酸酯检测质量浓度的线性范围分别为0.119 4~2.983 8、0.121 7~1.521 6、0.285 9~5.718 8、8.460 5~211.513 3μg/mL(R^(2)均大于0.999);精密度、重复性、稳定性(16 h)试验的RSD均小于4%;平均加样回收率分别为103.34%、107.37%、105.64%、96.16%(RSD<5%,n=9)。β-胡萝卜素、β-隐黄素棕榈酸酯、玉米黄素双棕榈酸酯的平均相对校正因子分别为1.109、1.390、1.158;一测多评法与外标法所测上述成分含量的相对误差均在±1%之内。结论 本研究所建立的高效液相色谱法联合一测多评法准确、稳定,可用于枸杞子中4种类胡萝卜素成分的含量测定及质量控制。

枸杞色泽与其类胡萝卜素含量和组成的相关性

类胡萝卜素是枸杞的一类主要特征性功效成分。常规的分析测定方法为有机溶剂提取后用比色法和高效液相色谱法分别进行总含量和组分分析,该方法步骤繁琐、周期长、成本较高。本研究旨在以枸杞表面不同颜色特征值为指标,通过对枸杞类胡萝卜素组成与枸杞色泽的相关性分析,建立一种枸杞类胡萝卜素含量和组成的快速判断方法。以9份不同种质枸杞材料果实为样本,采用CM-5分光测色仪分别对其颜色进行量化分析,并进行枸杞颜色特征值与类胡萝卜素及各组分含量的相关性分析。结果表明:不同种质枸杞表皮颜色特征值差异显著,果皮红度(a)和类胡萝卜素总含量呈显著性正相关(P<0.05),色度角(h)和类胡萝卜素总含量呈极显著负相关(P<0.01)。与各组分的相关性分析发现枸杞果皮亮度(L)、h和玉米黄素含量呈显著性正相关,a值和饱和度(c)与玉米黄素双棕榈酸酯的含量呈显著性正相关(P<0.05)。故可采用测色仪检测枸杞的色泽并对比枸杞中类胡萝卜素和各组分的含量高低,较便捷地分析评价枸杞类胡萝卜素含量及组分。本方法具有零有机溶剂、简单、便捷的优势,可为枸杞优质选育及质量评价提供理论依据和技术参考。

贮藏温度对鲜枸杞类胡萝卜素和氨基酸的影响及调控机制

本研究探讨了4和−4℃贮藏对鲜枸杞类胡萝卜素水平、类胡萝卜素合成、存储、降解相关基因以及氨基酸代谢相关基因表达的调控作用.结果表明,–4℃贮藏的枸杞果实中β-胡萝卜素、玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯含量显著高于4℃,贮藏末期玉米黄素双棕榈酸酯含量比4℃贮藏高42.14%.枸杞果实低温贮藏过程中类胡萝卜素合成、存储和降解相关基因普遍上调表达,特别是类胡萝卜素裂解酶基因LbCCD4在贮藏过程中表达量升高超过70倍.4℃贮藏枸杞果实类胡萝卜素合成基因表达显著高于–4℃,但是存储蛋白基因LbHSP21、LbOR2表达极显著低于–4℃,降解酶基因LbNCED6、LbCCD1、LbCCD4则极显著高于–4℃,可能是导致其类胡萝卜素含量低于–4℃的主要原因.另一方面,4℃贮藏上调脯氨酸合成相关的LbOAT表达、维持脯氨酸降解相关的LbProDH在较低水平,从而有利于脯氨酸的积累.上述结果说明,–4℃贮藏更有利于枸杞类胡萝卜素的积累、保持较好的营养品质,并延缓果实衰老劣变.

皂化对枸杞类胡萝卜素组成的影响

类胡萝卜素是枸杞中最重要的功效成分之一,在枸杞中大多以酯化的形式存在,其中80%以上都是玉米黄素双棕榈酸酯。以宁杞1号为例,用超声波辅助溶剂法提取枸杞类胡萝卜素,经过皂化处理后用高效液相色谱(HPLC)检测分析,研究不同皂化条件对枸杞类胡萝卜素的影响。结果表明,将所提取的类胡萝卜素经过皂化,玉米黄素双棕榈酸酯会部分转化成玉米黄素,但是皂化会破坏枸杞类胡萝卜素,使其总含量降低,因此皂化不适合用于枸杞类胡萝卜素样品。