玉郎伞查尔酮对异丙肾上腺素致小鼠心室重构的保护作用

目的研究玉郎伞查尔酮对异丙肾上腺素(ISO)致小鼠心室重构的保护并探讨其机制。方法 50只小鼠随机分为空白对照组,模型组,卡托普利组,玉郎伞查尔酮低、高剂量组,每组10只。除空白对照组外其他组采用连续7 d皮下注射ISO 1 mg·kg-1诱导小鼠心室重构模型。卡托普利组灌胃给予卡托普利65 mg·kg-1,玉郎伞查尔酮低、高剂量组尾静脉注射玉郎伞查尔酮2.5,5.0 mg·kg-1,给药10 d。实验结束时计算小鼠心脏、双肾、肺质量指数,观察心肌病理形态学改变,比色法测定血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,心肌组织羟脯氨酸(Hyp)含量。苏木精-伊红(HE)和Masson’s染色,分析系统测量心肌细胞横截面积(CSA)、心肌间质胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)的变化。结果与空白对照组比较,模型组小鼠心脏、双肾、肺质量指数明显升高,血清SOD活性下降,血清MDA含量升高。与模型组比较,玉郎伞查尔酮组的心脏、双肾和肺质量指数明显降低,MDA含量明显降低(P<0.01或P<0.05)、SOD活性明显升高(P<0.01)、心肌组织中Hyp含量明显降低(P<0.01)。心肌胶原含量半定量分析显示,CVF和PVCA显著降低(P<0.01)。结论玉郎伞查尔酮对ISO诱导的小鼠心室重构具有保护作用,其机制可能与清除氧自由基,提高机体的抗氧化能力有关。

玉郎伞查尔酮对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌缺血的保护作用

目的研究玉郎伞查尔酮(YLSC)对异丙肾上腺素所致的小鼠心肌缺血的影响及可能机制。方法60只雄性KM小鼠随机分为正常组、模型组、普萘洛尔组(1 mg/kg)、YLSC低、中、高剂量组(3,6,12 mg/kg)。各组尾静脉注射药物15 d,随后腹腔注射异丙肾上腺素(10 mg/kg)3 d建立小鼠心肌缺血模型。实验结束后,测定血清心肌肌钙蛋白(cTn)T、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18含量。取心肌组织,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠心肌病理变化,并测定心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;Western印迹测定心肌NOD样受体蛋白(NLRP)3、凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1的蛋白表达量。结果与模型组比较,YLSC可明显减轻心肌病理损伤,提高SOD、CAT、GSH-Px水平,降低MDA、cTnT、CK-MB、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平(P<0.05,P<0.01),抑制心肌NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达(P<0.05,P<0.01),并呈剂量-效应关系。结论YLSC可减轻异丙肾上腺素所致的小鼠心肌缺血损伤,机制可能与减少氧化应激,抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18的产生和NLRP3炎症小体的表达有关。

玉郎伞查尔酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤后炎性反应的影响

目的观察玉郎伞查尔酮(YLSC)对大鼠心肌缺血再灌注后炎性反应的影响。方法将60只12周龄的SPF级SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(等体积生理盐水),模型组(等体积生理盐水),阳性组(葛根素注射液12.00mg/kg),YLSC低剂量组(2.50mg/kg)、中剂量组(YLSC5.00mg/kg)和高剂量组(YLSC10.00mg/kg),每组10只,雌雄各半。缺血1h再灌注3h复制大鼠缺血再灌注模型。假手术组只穿线不结扎。采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清MB型肌酸激酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。伊文思蓝和2,3,5-三苯基氯化四氮唑双重染色确定心肌梗死面积。Westernblot法检测心肌高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)和核转录因子κB(NF-κB)。结果与模型组比较,YLSC能减少心肌酶CK-MB、cTnI的漏出(P<0.05或P<0.01),缩小心肌梗死面积(P<0.05或P<0.01),降低血清炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的释放(P<0.05或P<0.01),并抑制心肌HMGB1、TLR4、NF-κB的蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论YLSC能减少大鼠缺血再灌注损伤,其心肌保护作用可能与减轻炎性反应,抑制心肌HMGB1、TLR4、NF-κB的蛋白表达有关。

玉郎伞查尔酮调控PI3K/Akt信号通路抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制研究

目的探讨玉郎伞查尔酮(YLSC)调控PI3K/Akt信号通路抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制。方法 40只♂SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、YLSC组、YLSC+PI3K抑制剂wortmannin组(YLSC+WM组)、PI3K抑制剂wortmannin组(WM组),每组8只。除假手术组外,其它各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支制备心肌缺血模型,缺血30 min,再灌注120 min。实验结束后,采用比色法测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及一氧化氮(NO)水平,ELISA法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,Western blot法检测心肌组织中总Akt(t-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达,FQ-PCR法分析内皮型一氧化氮合酶(eN OS)、凋亡因子caspase-3及自噬相关基因Beclin1的表达量变化。结果与I/R组比较,YLSC组CK-MB、LDH以及TNF-α血清含量明显降低,NO水平升高,Beclin1、caspase-3及LC3-Ⅱ的表达量均明显下降,同时Akt的磷酸化水平与eN OS mR NA表达增加,上述各项指标差异具有统计学意义(P<0.05),而上述变化能够被PI3K/Akt信号通路的特异性阻断剂wortmannin所阻断,且其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 YLSC通过激活PI3K/Akt信号通路抑制缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡和过度自噬,从而发挥对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。

JAK2/STAT3信号通路介导玉郎伞查尔酮后处理对大鼠离体心脏的保护作用

目的:探讨玉郎伞查尔酮(YLSC)后处理对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤(I/R)的保护作用及相关信号传导通路机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,YLSC组(5μmol·L^(-1)),AG490组(2μmol·L^(-1)),YLSC+AG490组(YLSC 5μmol·L^(-1)+AG490 2μmol·L^(-1)),每组12只。采用停灌30 min,再灌注120 min的方法制备大鼠离体心脏缺血/再灌注模型。再灌注前10 min给予AG490或YLSC。记录心率(HR),左心室舒张末压(LVEDP)和左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)。收集冠脉流出液,测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。再灌结束后处死大鼠,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定心肌梗死面积,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织磷酸化Janus激酶2(phosphorylated janus kinase 2,p-JAK2),磷酸化信号转导和转录激活子3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3,p-STAT3),B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达量。结果:与模型组比较,YLSC后处理可明显改善心功能,缩小心肌梗死面积,减少LDH含量,减少凋亡及Bax表达水平,上升p-JAK2,p-STAT3及Bcl-2表达水平(P<0.05,P<0.01)。而同时给予YLSC和AG490处理后,血流动力学改善作用减弱,心肌梗死面积,LDH及Bax表达较YLSC组回升,p-JAK2,p-STAT3,Bcl-2的表达较YLSC组降低(P<0.05,P<0.01)。结论:YLSC后处理能减轻大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤,其机制可能与激活JAK2/STAT3通路有关。