害虫防治用玫烟色拟青霉分生孢子粉的干燥工艺优化

用液-固两相法生产的玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus Pfr116菌株的分生孢子粉,在高真空冷冻干燥、高真空室温抽干、35℃下烘干和低真空低热干燥条件下进行不同程序的干燥处理,以筛选适合该菌孢子粉生产的干燥工艺条件.结果表明,低真空(0.1 MPa)低热(30℃)抽干20～24 h的干燥方法最适合用于该菌孢子粉的干燥,既能保证含水量在9.0%以下,又能保证87%以上的活孢率和1130亿～1310亿/g的含孢量,而且操作简便,成本较低,可作为高纯度孢子粉生产的首选干燥工艺.高真空(15.86 Pa)条件下无论冻干还是室温抽干,虽然孢子粉的含水量(2.2%～8.7%)和含孢量(1270亿～1360亿/g)指标符合生产要求,但活孢率仅62%,说明该菌孢子不适合在高真空条件下干燥.在35℃下烘干24 h所获孢子粉含水量、24 h萌发率和含孢量分别为9.6%、82.8%和1200亿/g,该方法也可在生产中应用,但其活孢率显著低于(P<0.05)低真空低热抽干(24 h的孢子粉.

玫烟色拟青霉的形态特征和分生孢子萌发环境条件的研究

通过对玫烟色拟青霉QH-4分离株的形态特征和培养条件的观察，初步鉴定该菌株为拟青霉属；研究不同营养物质、pH值、温度及光照等条件对玫烟色拟青霉OH-4分生孢子萌发条件的影响，试验结果表明：营养条件对玫烟色拟青霉OH-4分生孢子的萌发无显著影响；分生孢子在pH值为5～11条件下都可萌发，但偏酸（pH=5）和偏碱（pH=11）的情况下，孢子的萌发率比较低，与pH值为6、7、8和9时相比有显著性差异；玫烟色拟青霉分生孢子萌发的最适温度为25～27℃；持续的光照有利于玫烟色拟青霉分生孢子的萌发。

玫烟色拟青霉孢子悬乳剂对大棚生菜粉虱的防效及其对昆虫群落的影响

对玫烟色拟青霉(Paecilomyces fum osoroseus)孢子悬乳剂1 000倍液(有效孢子含量为1.0×108孢子/mL)与3%吡虫啉对大棚生菜温室粉虱的综合防效进行了比较。结果表明:在大棚中使用2次玫烟色拟青霉对生菜上温室粉虱具有良好的防治作用。用菌后第5 d,生菜植株上粉虱数量开始下降,用菌2次后可明显控制温室粉虱对当季大棚生菜的危害,粉虱虫口密度明显低于3%吡虫啉处理区及对照,虫口减退率和相对防效均达39%和82%以上,第1次用菌剂后第25 d(第2次用菌剂后第10 d),菌剂处理区粉虱的虫口减退率及相对防效均高于95%。从处理后第10 d开始,玫烟色拟青霉制剂处理后的大棚中生菜植株昆虫群落的多样性高于3%吡虫啉处理后大棚,各处理大棚中昆虫群落多样性指数则表现为对照区>生防区>吡虫啉处理区。因此玫烟色拟青霉孢子乳悬剂可用于大棚中温室粉虱的防治。

玫烟色拟青霉和吡虫啉对烟粉虱种群的联合控制作用

利用生命表技术评价了在网室条件下玫烟色拟青霉和吡虫啉对烟粉虱种群的控制作用。在0·3%吡虫啉+1×106分生孢子/ml、0·1%吡虫啉+1×106分生孢子/ml、10%吡虫啉、1·0×106个孢子/ml菌液、1·0×106个孢子/ml菌液连续施用2次等5个不同的处理区,玫烟色拟青霉对第一代和第二代烟粉虱的种群干扰作用控制指数(IIPC)分别为0·5476、0·6836、0·3123、0·7278、0·4959和0·1566、0·1625、0·9830、0·2532、0·1349。其中,以使用0·3%吡虫啉+1·0×106分生孢子/ml处理区对烟粉虱种群的控制效果最好。玫烟色拟青霉与低浓度的吡虫啉混合使用能较好地发挥联合控制作用,对玫烟色拟青霉的累积控制效应无负面影响。

影响虫生真菌玫烟色拟青霉孢子萌发的因素探析

采用凹玻片悬滴法测定了温度、湿度、紫外照射及化学农药对玫烟色拟青霉孢子萌发的影响。结果表明,玫烟色拟青霉孢子萌发的适宜温区为20￣28℃,相对湿度在90%以上,紫外照射对该菌孢子萌发有很大影响。随紫外照射时间的延长,孢子萌发率明显降低。当照射时间为60min时,24h的孢子萌发率为54.2%,当照射时间达180min后,24h的孢子萌发率仅为5.4%,同时部分孢子的萌发时间显著被延长。不同杀虫剂及同一杀虫剂的不同浓度,对玫烟色拟青霉分生孢子萌发的影响不同。20%氰戊菊酯、22%蚜虱灵、5%的抑太保、25%灭幼脲四种供试农药的三种浓度对玫烟色拟青霉分生孢子萌发的影响均很小,因此这四种杀虫剂可作为玫烟色拟青霉混用的首选药剂;此外10%吡虫啉和绿荣的1/2常规浓度和1/4常规浓度对该菌分生孢子萌发的影响也较小,因此也可作为玫烟色拟青霉的复配药剂。

玫烟色拟青霉分离株的生物学特性及其对烟粉虱的致病力

对广州地区玫烟色拟青霉16个分离株的菌落生长速率、产孢量、分生孢子萌发率,及其对烟粉虱2龄若虫的致病性进行了比较研究。结果表明:不同分离株的菌落生长速率差异不显著,但产孢量、孢子萌发率和对烟粉虱2龄的致病力差异显著。经过综合比较,筛选出PF01 N4和PF01 N8两个优良分离株,它们具有产孢量大(2 8×109和2 95×109个孢子/ml)、孢子萌发率高(89 06%和87 7%)、致病力强(7d后对烟粉虱2龄若虫的致病力分别为99 22%和97 79%)等特点。

玫烟色拟青霉对烟粉虱种群的控制作用

在大田网室内评价了不同孢子含量的玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus对烟粉虱种群的控制效果.结果表明,各处理区玫烟色拟青霉对烟粉虱当代的种群干扰作用控制指数(IIPC)分别为0.802 0、0.673 2、0.641 3、0.538 9和0.418 6,对烟粉虱下一代的IIPC分别为0.482 6、0.346 9、0.330 8、0.134 8和0.101 7.玫烟色拟青霉对烟粉虱种群的控制作用主要表现为累积效应,连续2代都使用玫烟色拟青霉对烟粉虱的种群控制效果比只在1代上使用的效果好;同一世代内连续2次使用1.0×106mL-1的处理区对烟粉虱种群的控制效果更好.

紫外线照射对玫烟色拟青霉产孢子能力的影响

目的:探讨紫外线照射对玫烟色拟青霉产孢子能力的影响。方法:利用20W紫外灯对玫烟色拟青霉的原生质体悬浮液进行了不同照射时间、对孢子悬浮液进行了不同照射距离和时间组合的紫外线照射处理。结果:紫外灯下30cm照射原生质体90s及紫外灯下20cm照射孢子20min两个处理中,菌落直径最大菌株的菌丝生长速度显著高于出发菌株,产孢量也分别是出发菌株的1.4及1.6倍。结论:适宜的紫外线照射处理可以提高玫烟色拟青霉的产孢子能力。

菜青虫感染玫烟色拟青霉后血淋巴蛋白质含量及几种保护酶活力的变化

对玫烟色拟青霉Paecilomycesfumosoroseus侵染3、4龄菜青虫Pierisrapae后,其血淋巴中蛋白质含量、体内保护酶及谷胱甘肽S-转移酶活力进行了研究。结果表明,感病的3、4龄菜青虫血淋巴中蛋白质含量明显低于同期未感染的幼虫;感病虫体内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶的活力发生了不同程度的改变,其中对3龄菜青虫体内酶活力的影响比4龄幼虫大。此外被侵染的3、4龄菜青虫体内谷胱甘肽S-转移酶活力在感病前期显著高于同期未感染的菜青虫,而在感病后期明显低于同期未感染的菜青虫。

玫烟色拟青霉对小菜蛾幼虫的侵染过程及接菌方法对其致病力的影响

采用扫描电镜观察玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)分生孢子在小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫体表的萌发和侵染过程及玫烟色拟青霉孢子粉、孢子悬浮液和孢子培养液对小菜蛾幼虫的致病力。结果表明:小菜蛾幼虫体表嵴状突起结构区附着的孢子较多,刺状突起结构区附着的孢子较少;刺状突起结构区附着的孢子萌发较早,多数孢子在接菌后16h开始萌发,而嵴状突起结构区附着的孢子多数在20h开始萌发,在平缓结构区孢子萌发最迟。在嵴状突起结构区和刺状突起结构区,多数孢子萌发后产生芽管,直接以芽管侵入幼虫体壁,少数形成附着胞侵染寄主。此外玫烟色拟青霉3种不同接菌方法对小菜蛾幼虫的侵染速率和致病力大小明显不同,其中孢子培养液比孢子悬浮液和孢子粉对小菜蛾幼虫的侵染速率快,接菌44h虫体表现出明显的感病症状,致死中时为3.18d;孢子悬浮液和孢子粉处理的小菜蛾幼虫,60h虫体出现感病症状,致死中时分别为4.20d和4.34d;而且致病力大小也存在明显差异,接孢子粉的处理明显高于孢子悬浮液和孢子培养液,小菜蛾幼虫6d的死亡率达76.2%,而其他两种处理小菜蛾幼虫6d的死亡率仅为59.8%和58.5%。本研究结果表明,小菜蛾幼虫的体表结构影响玫烟色拟青霉孢子在寄主体表的附着、萌发和侵入,玫烟色拟青霉孢子粉对小菜蛾幼虫的致病力最强,明显高于孢子悬浮液和孢子培养液。

玫烟色拟青霉对菜青虫的侵染及致病作用

采用扫描电镜和组织切片方法研究了玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)对3龄菜青虫的侵染和致病作用。结果表明:玫烟色拟青霉可通过体壁侵染虫体。3龄菜青虫在接菌8h后,附着在虫体表面的孢子开始萌发,24h后菌丝即可穿透体壁进入血腔,48h后可见虫体内有部分菌丝体。侵入虫体内的菌丝对寄主组织没有选择性。菌丝首先在入侵的血腔中生长,然后侵入邻近的脂肪体和肌肉,随菌丝在虫体内的增殖,中肠、丝腺等相继被侵染。受侵的各组织器官均发生明显的病变,如体壁分离、脂肪体变形、溶解,肌纤维排列松散,中肠上皮细胞脱落并出现许多空泡等。

玫烟色拟青霉亚致死浓度对小菜蛾取食和成虫生殖的影响

在室内测定了玫烟色拟青霉菌株SCAU-PFCF01的亚致死剂量对小菜蛾幼虫取食量、蛹重、化蛹、羽化、成虫寿命和雌蛾产卵量的影响。结果表明,用玫烟色拟青霉1×102和1×103孢子/ml处理小菜蛾2龄幼虫后,其幼虫期的总取食量较对照相比分别降低29.3%和54.1%。处理4龄幼虫后,玫烟色拟青霉导致其化蛹率、蛹重、羽化率、成虫寿命及成虫产卵量显著下降,1×103孢子/ml处理4龄幼虫后小菜蛾的平均蛹重、雌成虫寿命、雄成虫寿命、成虫的产卵量分别为4.3mg、15.3d、17.2d和135.1粒/雌,显著低于对照。

虫生真菌玫烟色拟青霉培养条件研究

对玫烟色拟青霉9867菌株培养条件进行了研究,试验结果表明:液体菌种最佳培养时间为65 h,其菌丝生物量最高,达20.62g/L;固体培养最佳时间为20.液体菌种接种量为4%,初始pH为6～7,最佳培养温度为26℃.

四株玫烟色拟青霉作为桃蚜微生物防治因子的潜力评价

从美国引入4 株杀粉虱、木虱的玫烟色拟青霉(Paecilom yces fum osoroseus), 通过培养产孢制成不同浓度孢子悬浮液(104,105,5×105,106,5×106, 107 孢子/m L),接种桃蚜(Myzus persicae Sulzer)的无翅成蚜,以评价不同菌株的杀蚜潜力。4 个菌株在所用最高浓度下接种后第7 日累计杀蚜 78% ～100% 。所获逐日观察结果用时间-剂量-死亡率模型进行模拟分析,拟合良好。由此估计出剂量效应参数β,Pfr116 为1.87,Pfr612 为1.28,Pfr153 为1.42,Pfr2157 为1.09。4 个菌株第7 日的LC50分别为8.51×105,7.41×105,2.82×106 和1.08×106 孢子/m L。在5×106 孢子/m L的浓度下各菌株的LT50分别为3.2,3.5,5.0 和5.7 d。综合考虑各菌株杀蚜的剂量效应和时间效应,Pfr116 与Pfr612 大大优于Pfr153与Pfr2157,尤其Pfr116 菌株作为蚜虫的微生物防治因子值得深入研究。

几种农药对玫烟色拟青霉致病力的影响

玫烟色拟青霉孢子粉与8种常用农药相容性的测定结果显示:普力克、啶虫脒、高效氯氰菊酯和吡虫啉4种农药与玫烟色拟青霉的相容性较好,在常规使用浓度下孢子的萌发率均在75%以上;随着培养液中三唑酮、百菌清和阿维菌素浓度的增加,玫烟色拟青霉分生孢子的萌发率下降.在第10 d,农药与玫烟色拟青霉的3种混合物中高效氯氰菊酯对3龄小菜蛾、啶虫脒对3龄蚜虫和吡虫啉对2龄烟粉虱的致死率分别为90.43%、92.34%和93.72%,但阿维菌素与玫烟色拟青霉的混合物对3龄小菜蛾的致死率仅为64.24%,与单独使用玫烟色拟青霉的致死率87.35%相比差异显著.因此,啶虫脒、高效氯氰菊酯和吡虫啉3种农药在常规使用浓度下可与玫烟色拟青霉混合使用.在使用玫烟色拟青霉3 d后喷施普力克和百菌清对2龄烟粉虱的防治效果没有影响,但喷施杀毒矾与三唑酮对2龄烟粉虱的致死率分别为39.37%和43.31%.

玫烟色拟青霉最适液体培养条件的研究

通过对不同营养和不同培养夺件下玫烟色拟青霉菌丝生物量和产孢量的研究，结果表明：葡萄糖为玫烟色拟青霉液体培养的最适碳源，蛋白胨为该菌生长的最适氮源，C／N为10：1～20：1最适于玫烟色拟青霉菌丝生长和产孢；25℃、24h全光照夺件，对该菌生长和产孢均有利。接种后144～168h时，菌丝生物量和产孢量均达到高峰，分别为31．72mg／mL、24．62孢子／mL，为黑暗备件下的15倍和18．3倍，因此玫烟色拟青霉液体发酵终点应选择在接种后144～168h为最好。

玫烟色拟青霉的培养及固体培养基筛选

本文记述了玫烟色拟青霉 (Paecilomyces fumosoroseus)在 6种不同固体培养基上进行三级扩大培养的方法及培养性状 ,其中以麦麸和米糠混合的固体培养基产孢量可达 2 83亿 / g。该菌在这种培养基上产孢量大 ,容易生长 ,且该培养基经济实用 ,容易得到。判断该培养基为优良培养基。

玫烟色拟青霉生物学特性的研究

对玫烟色拟青霉PF9606与温度、pH、营养条件及光照的关系进行了研究，结果表明，菌丝生长的温度范围为10～32℃，最适温度为25～28℃；最适pH值为6～7；产孢的温度范围为10～30℃，最适温度为20～25℃；最适培养基为SDA和SMA。

玫烟色拟青霉营养需求及培养条件研究

通过平皿中测定碳源、氮源、微量元素、温度和pH值对玫烟色拟青霉 986 7菌株生长和产孢的影响 ,结果表明 :最佳碳源、氮源、微量元素分别为玉米粉、酵母膏、铜 ;最适温度为 2 6℃ ;最适pH为 6～ 7。