玫瑰红链霉菌336质粒（pSR336）DNA的分离及特性研究

从葡萄糖异构酶产生菌──玫瑰红链霉菌３３６中分离得到质粒ｐＳＲ３３６。经电泳检测和电镜观察证实，存在共价闭合超螺旋和开环两种分子构型，分子量约为６．３５ｋｂ，拷贝数约为１３０。采用高温（４０℃），吖啶橙、溴化乙锭和ＳＤＳ等物理、化学因素消除ｐＳＲ３３６，均未获得质粒消除株，表明ｐＳＲ３３６质粒是非常稳定的。用变铅青链霉菌ＴＫ２１作受体，进行平皿杂交以检测ｐＳＲ３３６的接合转移能力，未观察到麻点（ｐｏｃｋ）的形成。用ＨｉｎｄⅢ分别酶切ｐＳＲ３３６和ｐＩＪ４８６，连接得到一个嵌合质粒ｐＩＲ３０，检测玫瑰红链霉菌３３６（ｐＳＲ３３６）、变铅青链霉菌ＴＫ５４（ｐＩＲ３０）、变铅青链霉菌ＴＫ５４（ｐＩＪ４８６）及变铅青链霉菌ＴＫ５４这４株菌的葡萄糖异构酶活性及对硫链丝菌肽等２１种抗生素的抗性，结果表明ｐＳＲ３３６与葡萄糖异构酶的产生没有明显的联系；该质粒不含有硫链丝菌肽等１６种抗生素的抗性，是否含有庐山霉素、洋红霉素、莫能菌素、春雷霉素这４种抗生素和乳链菌肽的抗性尚需进一步加以确定。

葡萄糖异构酶产生菌——玫瑰红链霉菌336质粒pSR336限制酶图谱的建立

开发新的克隆载体依然是链霉菌基因克隆的一项重要基础工作。我们首次从葡萄糖异构酶产生菌——玫瑰红链霉菌(Streptomyces roseoru-her)336中分离到质粒pSR336。