玉米环二肽(组氨酸-脯氨酸)的分离纯化、结构鉴定及其生物活性

环二肽(组氨酸-脯氨酸)(cyclo(His-Pro),CHP)是一种活性环二肽,在降血糖、抗氧化方面具有显著效果。实验通过DE-52阴离子交换层析、Sephadex G-25凝胶层析、半制备型高效液相色谱等方法,对高温高压环化后的玉米蛋白水解物进行分离纯化研究,得到CHP。采用超高效液相色谱、傅里叶变换红外光谱、核磁共振氢谱和碳谱对产物的结构进行鉴定,并通过体外降血糖和抗氧化实验初步测定了其生物活性。结果表明:采用本研究的分离纯化方法制备得到的CHP的纯度为97.36%,傅里叶变换红外光谱和核磁共振波谱的测定表明该肽的结构与预期结构相符,初步的生理活性鉴定结果表明,玉米CHP经分离纯化后对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性具有很强抑制能力,半抑制浓度(IC_(50))分别为1.1、1.9 mg/m L;且具有很强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除活性(IC_(50) 67μg/m L)和还原力。

环(组氨酸-脯氨酸)二肽的高温高压辅助合成工艺优化（英文）

将高温高压技术应用于环(组氨酸-脯氨酸)二肽(cyclo(His-Pro),CHP)的制备。以二肽甲酯盐酸盐为原料,采用高温高压辅助环化法在水中制备CHP,通过单因素试验考察了各种反应变量如压力、时间、溶液p H值以及底物质量浓度对CHP产率的影响,采用正交试验对高温高压辅助环化工艺条件进行优化。采用超高效液相色谱法和电喷雾质谱技术对产物中的CHP进行定量和定性分析。结果表明,最佳的反应条件为:反应压力0.20 MPa、反应时间3.5 h、溶液p H 6.0、底物质量浓度15 mg/m L。在此条件下可以得到较高产率(91.35%)的CHP,并且反应中没有观察到消旋。与传统的甲醇回流法相比,本研究的环化方法省时、高效、环保,并且能够得到较高的产率,同时产物没有发生消旋。

响应面试验优化高温高压制备玉米环(组氨酸-脯氨酸)二肽关键工艺

将高温高压技术应用于玉米环(组氨酸-脯氨酸)二肽(cyclo(His-Pro),CHP)的制备,以玉米蛋白水解物为原料,在水相溶液中采用高温高压法对其进行环化,合成CHP。通过单因素试验考察反应温度、底物质量浓度、反应时间和KHCO_3浓度对CHP提取量的影响,应用响应面试验设计对高温高压环化反应条件进行优化。结果表明最佳反应条件为反应温度125.9℃、反应压力0.25 MPa、底物质量浓度20.5 mg/m L、KHCO_3浓度0.16 mol/L、反应时间5.3 h,此条件下CHP提取量可达6.58 mg/g。采用超高效液相色谱-串联质谱法对水解物中的CHP进行进一步鉴定,结果表明制备的玉米CHP与预期结构相符。

玉米蛋白环(组氨酸-脯氨酸)二肽前体的制备及其鉴定（英文）

以玉米蛋白为原料,制备活性环（组氨酸-脯氨酸）二肽（cyclo（His-Pro））前体——His-Pro和Pro-His二肽。分别采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对提取的玉米γ-醇溶蛋白进行单酶和双酶分步水解,筛选出最佳酶解工艺。采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的水解产物中cyclo（His-Pro）前体的含量比其他水解产物要高。采用响应面和L16（4-5）正交试验对碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解γ-醇溶蛋白的工艺进行了优化,最佳水解条件为：底物质量浓度32 mg/m L,先加入12 100 U/g的碱性蛋白酶水解6.5 h,再加入17 000 U/g的风味蛋白酶于p H7.5、55℃条件下水解6 h。采用超高效液相色谱法和电喷雾质谱法对cyclo（His-Pro）前体进行定量和定性分析,结果表明水解产物中含有较高含量的脯氨酸-组氨酸二肽（6.88 mg/g）。

环(L-组-L-脯)二肽的合成

许多环二肽具强的生理活性,以N-叔丁氧羰基-L-组氨酸和L-脯氨酸甲酯盐酸盐为原料,经DCC缩合得直链二肽,再经HCl/Et2O脱Boc保护,弱碱性条件下成环,得环(L-组-L-脯)二肽.结构经ESI-MS、IR、1H NMR、13C NMR等表征.

环(L-丙-L-脯)二肽的合成

以L-(+)-丙氨酸和N-叔丁氧羰基-L-(+)-脯氨酸为原料,分别经中和、缩合、脱保护、环化反应后,以65.3%的总产率合成得到了新型催化剂环(L-丙-L-脯)二肽,结构经IR、1HNMR、13CNMR、元素分析等表征。

环肽、3-苯乳酸与苯丙酸组合物对双菌生物被膜的影响

为研究植物乳杆菌CCFM8724产生的3种代谢物环亮氨酸脯氨酸二肽、3-苯乳酸、苯丙酸对变异链球菌和白色念珠菌双菌生物被膜的作用及其作用机制,测定了3种代谢物的组合物对变异链球菌和白色念珠菌双菌生物被膜量、胞外多糖和胞外蛋白产量、群体感应信号分子AI-2产量及生物被膜结构的影响,并通过分子对接的方式探究小分子代谢物结合致病菌靶点的方式和构象。结果表明:组合物的干预使变异链球菌和白色念珠菌双菌生物被膜量减少了79.4%,水不溶性胞外多糖和胞外蛋白的产量分别减少了63.8%、60.2%,群体感应信号分子AI-2产量减少了80.7%,同时破坏了生物被膜结构。分子对接结果显示:组合物可以与变异链球菌PtxA蛋白和白色念珠菌Fba蛋白的靶点结合,影响其糖代谢,进而抑制二者形成生物被膜。通过探究植物乳杆菌CCFM8724抑制双菌生物被膜潜在的物质基础,旨在从分子水平揭示组合物环亮氨酸脯氨酸二肽、3-苯乳酸、苯丙酸可能的抑菌机理,为植物乳杆菌CCFM8724及其代谢物组合物开发口腔益生菌和后生元产品提供一定的理论依据。

食醋中环苯丙-脯二肽快速检测方法研究

目的:建立食醋中环二肽的快速检测方法。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对食醋中环二肽的检测方法进行研究。流动相为V超纯水∶V甲醇=40∶60;流速0.6mL/min,等梯度洗脱;检测波长215nm;色谱柱为ZorbaxSB-C18快速检测柱(600Bar,4.6mm×150mm,1.8μm),柱温45℃。结果:在此条件下环二肽线性良好(相关系数0.9996),精密度高(RSD<2.5%),其样品回收率98.63%～102.32%。结论:开发出一种重复性好,准确性高,简便、快捷的环二肽液相检测方法,可在5min内完成样品检测。

多蕊商陆的化学成分

从多蕊商陆 (Phytolaccapolyandra)根的乙醇提取物中分到一个新的环二肽、两个已知的环二肽的混合物以及两个甾体化合物。根据化学和光谱数据 ,它们的化学结构分别确定为 :环 (脯氨酸 -酪氨酸 ) (1)、环 (丙氨酸 -亮氨酸 ) (2 )、环 (丙氨酸 -异亮氨酸 ) (3)、α -菠甾醇 (4)和α -菠甾醇吡喃葡萄糖甙 (5 )。在商陆科植物中 ,环肽成分是首次被发现。

维药骆驼刺水溶性化学成分研究

目的对维药骆驼刺Alhagi sparsifolia水溶性化学成分进行研究。方法采用多种色谱技术进行分离纯化,通过理化性质、波谱数据和X单晶衍射鉴定化合物结构,测试各化合物对人宫颈癌HeLa细胞的细胞毒性。结果从骆驼刺地上部分分离得到21个水溶性化合物,分别鉴定为毒豆甲酮(1)、毒豆乙酮(2)、callyspongidipeptideA(3)、环(脯氨酸-亮氨酸)(4)、对羟基苯甲醇(5)、D-脯氨酸-D-缬氨酸(6)、环(脯氨酸-亮氨酸)二肽(7)、布卢姆醇A(8)、(3S,4R)-3,4-二羟基-3-甲基二氢呋喃-2(3H)-酮(9)、isololiolide(10)、dehydrovomifoliol(11)、N-苯乙基甲酰胺(12)、3-hydroxy-β-damascone(13)、3,4-二羟基-3-甲基二氢呋喃-2(3H)-酮(14)、环(丙氨酸-脯氨酸)(15)、脯氨酸(16)、布卢姆醇B(17)、蚱蜢酮(18)、N-(对羟基苯乙基)甲酰胺(19)、N-乙酰基酪胺(20)、(+)-丁香脂素-O-β-D-葡萄糖苷(21);并对化合物1~21进行了抗宫颈癌活性筛选。结论化合物1~7、9~20为首次从骆驼刺属植物中分离得到,且化合物4、7、15表现出潜在的抗肿瘤活性,半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC_(50))分别为(29.09±0.99)、(31.51±1.89)、(28.25±0.65)μmol/L。

蕈状芽孢杆菌代谢产物增强小鼠免疫力活性物质的分离、鉴定

本文的目的是对蕈状芽孢杆菌代谢产物中增强小鼠免疫力的物质进行分离、鉴定和免疫增强作用测定。在生物活性追踪的指导下,本文通过大孔吸附树脂吸附、硅胶柱分离和葡聚糖凝胶柱纯化,对蕈状芽孢杆菌代谢产物中增强小鼠免疫力的活性成分进行了分离,得到了具有较强免疫增强作用的化合物(标记为M),并对化合物M进行了波谱测定,确定化合物M为环(脯氨酸-甘氨酸)二肽(C7H10O2N2)。以生理盐水为对照,通过腹腔注射,对小鼠进行了SOD活性、白细胞吞噬活性、白细胞杀菌活性3个指标测定。结果显示,在第14天时,SOD活性和白细胞吞噬活性达到了最高值,且同对照组相比有显著提高;在第21天时,白细胞杀菌活性达到了最高值,且同对照组相比有显著提高。以上结果表明,蕈状芽孢杆菌代谢产物中的环(脯氨酸-甘氨酸)二肽能够显著增强小鼠免疫力。