环保透明脱蜡液Van-Clear与传统试剂在组织处理后HE染色及FISH法检测乳腺癌HER2基因中的比较

目的比较环保透明脱蜡液Van-Clear和二甲苯透明脱蜡制作的组织切片苏木精-伊红(HE)染色优良率,对比荧光原位杂交(FISH)法检测2种透明脱蜡液制作的乳腺癌组织切片的人类表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增阳性率,探讨Van-Clear替代二甲苯的可行性。方法收集中山市博爱医院2013年2月~2015年12月门诊及住院部送检的乳腺浸润性导管癌标本89例、乳腺增生标本125例、子宫平滑肌瘤标本193例、子宫平滑肌肉瘤标本12例、肺癌穿刺标本16例、绒毛标本139例,同一病变部位切取2个样本,用抽签法随机分为2组,命名为A、B组。A组采用二甲苯透明脱蜡制作切片574张;B采用Van-Clear透明脱蜡制作切片574张。依据切片染色情况判定切片等级,采用SPSS20.0软件比较A、B组切片HE染色优良率;A、B组中乳腺浸润性导管癌标本再各制作切片89张,采用SPSS 20.0软件比较FISH法检测的HER2基因扩增的差异。结果 (1)生物显微镜下,A、B两组切片HE染色结果细胞轮廓清晰、透明度好,细胞核与细胞质蓝红相映、色彩鲜艳,核质对比明显,核膜及核染色质颗粒清晰可见、分辨良好,分裂象染色体呈现黑蓝色,各种成分层次分明。(2)A、B两组切片HE染色优良片分别为570张、572张,中等、差片4张、2张。染色优良率分别为99.30%、99.65%,两组间染色优良率差异无统计学意义(χ2=0.50,P>0.05)。(3)荧光显微镜下,A、B两组切片乳腺浸润性导管癌HER2双探针FISH检测结果组织轮廓和背景均清晰,探针定位准确,可见耀眼的红/绿荧光信号。(4)A、B两组切片检测乳腺浸润性导管癌HER2基因,FISH阳性率分别为24.72%、26.97%,两组间阳性率差异无统计学意义(χ2=0.50,P>0.05),且FISH结果符合率为97.75%。结论环保透明脱蜡液Van-Clear有替代传统试剂二甲苯应用于组织切片HE染色及FISH法检测乳腺癌HER2基因的潜在可能。

环保透明脱蜡液替代二甲苯在病理制片中的应用

二甲苯作为传统的透明脱蜡溶剂,被长期广泛应用于常规石蜡制片中,然而二甲苯是一种毒害性较大的试剂,早已引起环保部门的重视。

聚羟基丙烯酸和Van-clear在qRT-PCR法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变中的应用研究

目的比较环保固定液聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统固定液4%中性缓冲甲醛、传统透明脱蜡液二甲苯应用于实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法,检测非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变率的敏感性、特异性及符合率的差异,评估qRT-PCR法及其环保技术平台的临床应用价值。方法选取中山市博爱医院、中山市中医院2013年5月至2016年3月期间手术切除的原发性NSCLC标本91例,同一肿瘤病变部位切取5个样本,采用随机数字表法分为A、B、C、D、E。A组使用4%中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、直接测序法检测EGFR基因突变;B组使用4%中性缓冲甲醛固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;C组使用聚羟基丙烯酸固定、二甲苯透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;D组使用4%中性缓冲甲醛固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变;E组使用聚羟基丙烯酸固定、Van-clear透明脱蜡制作切片、qRT-PCR法检测EGFR基因突变。分别测定5组NSCLC中EGFR基因第18、19、20、21号外显子的突变情况。结果 (1)B、C、D、E组与A组比较,EGFR基因发生突变人数百分率、基因靶位点突变率的差异均无统计学意义(P>0.05);(2)B、C、D、E组与A组比较,EGFR靶位点突变检测结果的灵敏度好、特异度强、符合率高。结论聚羟基丙烯酸、环保透明脱蜡液Van-clear单独或联合替代传统试剂,应用于qRT-PCR法检测NSCLC中EGFR基因突变,与以传统试剂应用于直接测序法的检测结果一致性好,有在临床推广应用的意义和价值。

Van-Clear和二甲苯在荧光原位杂交技术检测宫颈hTERC基因中的应用

目的:观察Van-clear(环保透明脱蜡液)替代二甲苯(传统透明脱蜡液)在荧光原位杂交技术检测宫颈组织中人端粒酶核糖核酸组分(human telomerase RNA component,h TERC)基因扩增中的结果,探讨其替代二甲苯的可行性。方法:收集2005年1月至2015年2月于中山市博爱医院妇科住院部送检的278例宫颈组织标本。包括正常组81例,宫颈上皮内瘤变(cer v ical intraepithelial neoplasia,CIN)1级组68例,CIN2级组57例,CIN3级/原位癌组42例,宫颈浸润癌组30例。同一病变部位取材2块,分两组,一组采用二甲苯透明制作切片278张;另一组采用Van-clear透明制作切片278张。采用荧光原位杂交技术检测两组宫颈活检标本中h TERC基因的扩增变化情况。结果:两组间对应的各级宫颈病变中,h TERC基因阳性表达率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:用VanClear替代二甲苯对荧光原位杂交技术检测宫颈组织h TERC基因阳性表达率无明显影响,Van-clear作为环保产品,在荧光原位杂交技术检测宫颈h TERC基因中有一定的推广应用价值。

Van-clear替代二甲苯对乳腺癌Her-2蛋白表达的影响

目的比较环保透明脱蜡液Van-clear和二甲苯在免疫组织化学法检测乳腺癌Her-2蛋白表达的差异,探讨Van-clear替代二甲苯的可行性。方法收集中山市博爱医院2013-06—2017-03间住院部送检的乳腺浸润性导管癌标本95例,同一肿瘤病变部位切取2个样本,用抽签法随机分为A、B组。A组采用二甲苯透明脱蜡制作切片95张;B采用Van-clear透明脱蜡制作切片95张。观察生物显微镜下Her-2免疫组织化学染色大体情况,采用免疫组织化学法检测Her-2蛋白表达情况,SPSS20.0比较两组间蛋白阳性率的差异。结果生物显微镜下,A、B两组切片Her-2免疫组织化学染色结果:背景清晰、阳性着色定位准确(胞膜)、阳性强度可靠、呈色鲜明,无非特异性染色产生,阴性、阳性对照染色结果可靠。(2)A、B两组切片Her-2蛋白阳性率分别为24.2%、26.3%,两组间阳性率差异无统计学意义(χ2=0.50,P>0.05),且Her-2蛋白表达符合率为97.9%。结论环保透明脱蜡液Van-clear有潜能替代传统试剂二甲苯应用于免疫组织化学法检测乳腺癌Her-2蛋白表达。