阿魏酸哌嗪对环孢素A慢性肾毒性大鼠肾脏的保护作用

目的探讨不同剂量阿魏酸哌嗪（PF）对环孢素A（CsA）慢性。肾毒性大鼠肾脏TGF-β／Smads通路的影响。方法采用低盐饮食加CsA20mg·kg^-1·d^-1灌胃的方法建立环孢素A慢性肾毒性肾脏模型。雄性SD大鼠24只，随机分为正常对照组（N）、模型组（M）、PF低剂量治疗组（P1）、PF高剂量治疗组（P2）。第4周末肾组织行HE染色观察肾组织病理学变化；免疫组织化学和RT-PCR技术检测不同剂量PF对大鼠肾脏TGF-β1、Smad3、Smad7的影响。结果PF能下调CsA慢性肾毒性大鼠肾组织中TGF-β1、Smad3及其mRNA水平的表达，上调Smad7及其mRNA水平的表达。结论PF可能通过下调TGF-β1、Smad3，上调Smad7来发挥其防治CsA慢性肾毒性的作用。

基于“肠-肾轴”理论探讨芪黄四物汤对环孢素A慢性肾毒性的保护机制

目的:探讨芪黄四物汤通过"肠-肾轴"调节肠道菌群进而对环孢素A(CsA)慢性肾毒性的保护作用。方法:24只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组、模型组及芪黄四物汤组,每组8只,以CsA 30mg·kg-1·d-1灌胃建立CsA慢性肾毒性模型,造模时芪黄四物汤组给予0.48g·kg-1·d-1灌胃,模型组及对照组等量0.9%氯化钠溶液灌胃,6周后观察3组小鼠一般情况及肾功能、炎症及尿毒素指标[血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24h尿蛋白定量、白介素-6(IL-6)、硫酸吲哚酚(IS)],HE、Masson染色观察结肠组织及肾脏病理,免疫荧光观察结肠组织闭锁小带蛋白1(ZO-1)及肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达,并提取小鼠肠道微生物总DNA进行16S rDNA V3+V4区测序。结果:与对照组比较,模型组小鼠体质量降低,尿量减少,Scr、BUN、24h尿蛋白定量、IL-6、IS指标均显著升高(P<0.05);与模型组比较,芪黄四物汤干预后均显著改善(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠结肠组织ZO-1表达减少,肾组织示肾小球基底膜增厚、小动脉玻璃样变,肾小管空泡变性伴有萎缩、间质炎症细胞浸润、增宽伴有条带状纤维化,胶原纤维及TGF-β1表达增加;芪黄四物汤干预后均有不同程度改善。与对照组比较,模型组小鼠菌群丰度与多样性均降低,厚壁菌门与拟杆菌门比值(F/B)升高(P<0.01),拟杆菌属等致病菌含量增加(P<0.05),乳杆菌属等益生菌含量降低;芪黄四物汤增加了阿克曼属等益生菌含量,改善了菌群紊乱。结论:芪黄四物汤能够通过"肠-肾轴"降低CsA慢性肾毒性小鼠肠道通透性,增加阿克曼属等益生菌的含量、降低拟杆菌属等致病菌的含量,改善炎症及纤维化状态,降低尿毒素水平,保护肾功能。

Klotho对CsA慢性肾毒性大鼠肾脏内质网应激相关凋亡的影响

24只雄性SD(Sprague dawley)大鼠在低盐饮食的基础上,随机分为3组:对照组、模型组、治疗组。模型组给予环孢素A(Cyclosporin A,Cs A)30 mg/kg/d腹腔注射共28 d建立慢性肾毒性大鼠模型;治疗组在给予等量Cs A的基础上腹腔注射给予重组可溶性Klotho蛋白(0.02 mg/kg/d腹腔注射,隔日一次)。28 d后处死大鼠,收集肾组织标本;行Masson染色观察肾脏病理损害;TUNEL(Td T-mediated d UTP nick end labeling)染色观察细胞凋亡情况;Western-blot检测肾组织内质网应激标志物兔抗葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(pro-apoptotic protein CCAAT/enhancer binding protein homologous protein,CHOP)的表达情况。分析发现,模型组大鼠肾脏病理损害明显加重,肾小管上皮细胞大量凋亡,GRP78及CHOP表达显著上调,而Klotho治疗组大鼠肾脏病理损害明显减轻,细胞凋亡减少,GRP78及CHOP的表达明显降低。表明Klotho蛋白可通过抑制内质网应激诱导的凋亡缓解Cs A慢性肾毒性的发生。

曲尼司特对CsA慢性肾毒性大鼠TGF-β/Smad通路的影响

目的探讨不同剂量曲尼司特(TNL)对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠肾脏TGF-β/Smad通路的的影响。方法雄性SD大鼠34只,随机分成正常对照组、模型组、TNL低剂量治疗组、TNL中剂量治疗组、TNL高剂量治疗组、安博维治疗组。采用低盐饮食加CsA20mg/(kg·d)灌胃的方法建立环孢素A慢性肾毒性大鼠模型。用RT-PCR和免疫组织化学检测不同剂量TNL对大鼠肾脏TGF-β1、Smad3、Smad7的影响。结果TNL能下调CsA慢性肾毒性大鼠肾组织中TGF-β1、Smad3的mRNA水平及在肾脏的表达,上调Smad7的mRNA水平及在肾脏的表达。结论在CsA慢性肾毒性大鼠模型中,TNL可能通过调节TGF-β/Smad通路而发挥抗纤维化的作用,从而减缓CsA慢性肾毒性的进展。

曲尼司特对CsA慢性肾毒性大鼠AngⅡ和ET-1的影响

研究曲尼司特对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠的肾脏保护作用,发现曲尼司特能减低环孢素A慢性肾毒性大鼠血浆和肾组织中AngⅡ的含量,并下调肾组织中ET-1的表达.结果表明曲尼司特可能通过下调环孢素A慢性肾毒性大鼠血浆和肾组织中AngⅡ的的水平以及肾组织中ET-1的表达,减轻肾脏病理损害,发挥其肾脏保护作用.