液相色谱-质谱联用和酶增强免疫分析法测定人全血环孢素A浓度比较

目的建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人全血环孢素A(CsA)浓度,并与酶增强免疫分析(EMIT)法进行相关性分析。方法以乙腈为沉淀剂,环孢素D(CsD)为内标,Waters Atlantisd C18(3.9 mm×150 mm,3μm)色谱柱为分析柱,10 mmol·L^(-1)醋酸铵乙腈-10 mmol·L^(-1)醋酸铵为流动相进行梯度洗脱,质谱方法应用电喷雾电离源(ESI源),采用多反应监测方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应为CsA m/z 1 220.0→m/z 1 202.8,内标CsD m/z1 216.8→m/z 119.4。分别采用LC-MS/MS法和EMIT法测定124例患者服用CsA后的全血药物浓度,比较两种方法测定结果的相关性。结果以LC-MS/MS法测定结果(X)与EMIT法测定结果(Y)作线性回归方程,Y=0.999 3X+20.387(r=0.983,n=124,P<0.05),EMIT法测全血CsA的浓度较LC-MS/MS法偏高。结论 LC-MS/MS法和EMIT法测定人全血CsA的浓度相关性良好,在CsA药物浓度监测中,对不同测定方法的测定差异,应予以关注并作相应调整。

环孢素软胶囊健康人体药代动力学及生物等效性研究

目的研究环孢素软胶囊试验制剂和参比制剂的人体药动学和生物等效性。方法20名健康受试者随机交叉口服环孢素软胶囊的试验制剂和参比制剂,剂量均为300mg/人。血样加入内标(环孢素D)经预处理后用HPLC-UV法测定。结果试验及参比制剂的主要药动学参数Cmax分别为(1111.98±176.64)ng.mL-1,(1262.69±226.36)ng.mL-1;Tmax分别为(1.65±0.49)h,(1.45±0.65)h;t1/2分别为(6.55±1.08)h,(6.09±1.35)h;AUCo→t分别为(6032.68±1282.44)h.ng.mL-1,(6394.53±1563.64)h.ng.mL-1。以AUCo→t计算的试验制剂的相对生物利用度为(100.21±36.79)%。结论经方差分析及双单侧t检验结果显示,试验制剂和参比制剂具有生物等效性。

线粒体通透性转运孔与神经退行性病变

线粒体通透性转运孔(MPTP)由电压依赖性阴离子通道、腺嘌呤核苷酸易位子、环孢素受体D、外周苯二氮卓艹受体等多个蛋白组成。本文就MPTP复合物的结构组成及功能、MPTP在细胞凋亡中的作用、以环孢素受体D和外周苯二氮卓艹受体等为靶点的化合物对神经退行性病变的潜在的治疗作用等方面进行综述。阐明抑制MPTP开放的分子可以抑制神经细胞凋亡,是治疗神经退行性病变的潜在药物。

HPLC-MS/MS法检测大鼠眼角膜中环孢素A的浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法测定大鼠角膜中环孢素A浓度。方法:角膜样品匀浆后以固相萃取法处理样品,以环孢素D为内标物,采用内标法进行HPLC-MS/MS分析。采用Waters Xterra MS C18(3.5μm,13.0 mm×50 mm)色谱柱,流动相为混合溶液[甲酸-甲醇-4 mmol.L-1醋酸铵溶液(0.2∶10∶100)]-甲醇(15∶85)。电离方式为ESI正离子模式;离子采集方式为选择性离子模式(SIR,环孢素A:m/z 1220.2,环孢素D:m/z 1233.8)。结果:角膜匀浆液中环孢素A检测方法的线性范围为0.00576～0.288μg.mL-1(r=0.9993),大鼠角膜中环孢素A的平均提取回收率接近80%(n=5),方法回收率为87.9%～113.6%,批内RSD(n=5)及批间RSD(n=15)均小于15%。结论:本方法专属性强,准确度高、重复性好,可快速准确地测定大鼠角膜中环孢素A的浓度。