4-羟基环孢菌素A衍生物[γHyMeLeu4]CyA生产菌的接合转移

将染色体整合型糖多孢红霉菌表达载体pZMW-tsr转入大肠杆菌ET12567(pUZ8002);以其作为供体,采用接合转移的方法将硫链丝菌素抗性基因tsr转入4-羟基环孢菌素A衍生物[γHyMeLeu4]CyA生产菌野野村菌CYA4OH。PCR结果表明,tsr基因已经整合到CYA4OH基因组上。研究表明pZMW载体能够在稀有放线菌野野村菌中有效表达外源基因。

环孢菌素A衍生物的合成

以环孢菌素A为原料,经乙酰化、溴代和与三苯基膦作用生成乙酰化的环孢菌素A磷鎓溴化物(3);3与醛发生Wittig反应后再脱去乙酰基得到4个新的环孢菌素A衍生物,其结构经1HNMR和MS表征。