发酵液中小组分环孢菌素D的HPLC测定法

建立了一种采用高效液相测定发酵液中小组分环孢菌素D含量的方法。发酵液经甲醇提取 ,浓缩至干 ,乙醚转移 ,蒸干 ,甲醇定容 ,正已烷脱脂后进样。色谱条件为YWG C1 8柱 (5μm ,4 6mm× 2 50mm) ;乙腈—水 (78∶2 2 ,v/v)为流动相 ;流速 1 0ml/min ;检测波长 2 2 0nm ,柱温 70℃。该方法的精密度、线性关系和回收率均良好 ,且操作方便 ,比较成功地解决了在杂质较多和含量较低情况下环孢菌素D的测定。

环孢菌素D简介

环孢菌素是由不完全真菌的多孔木霉和柱盘孢菌属培养、发酵后产生的代谢产物.其主要产物环孢茵素A(CsA)具有很强的免疫抑制作用.CsA能抑制T细胞的繁殖作用,从而改变T细胞的免疫反应;也作用于B细胞亚群.因此,临床上除了用于肝、肾等的器官移植,防止器官的排斥反应外,还可用于治疗自身免疫性疾病,如类风湿、牛皮癣、眼葡萄膜炎、I型糖尿病、慢性活动性Crohn’s回肠炎、多发性硬化症等等.

环孢菌素D分离方法的改进

经HPLC和氨基酸分析表明，采用单一溶媒分离环孢菌素D比多溶媒梯度洗脱柱层析收率更高，同时具有步骤简单、操作安全的优点。