环巴明抑制SHH信号通路缓解大鼠神经病理性疼痛

目的拟探讨环巴明抑制SHH信号通路对坐骨神经分支选择性损伤(SNI)大鼠的痛敏改变及脊髓水平BDNF、NR2B变化的影响。方法将大鼠随机分为对照组(control组)、坐骨神经分支选择性损伤组(SNI组)、溶剂对照组(SNI-vehicle组)和环巴明组(SNI-CP组),各组12只。分别于建模前1 d、建模后1和7 d测定机械缩足反应阈(PMWT)。于建模后7 d行为学测量后处死大鼠取L4-6脊髓组织,用Western blot法及实时荧光定量PCR法测定脊髓组织SHH、GLI1及BDNF表达,用免疫组化法测定脊髓组织NR2B蛋白表达。结果与对照组相比,SNI组、SNI-vehicle组和SNI-CP组PMWT均降低,脊髓组织SHH、GLI1及BDNF蛋白及mRNA表达均上调,且脊髓组织NR2B表达亦上调(P<0.05);但与SNI组相比,SNI-CP组经环巴明处理后PMWT升高,且脊髓组织SHH、GLI1及BDNF表达下调,脊髓组织NR2B表达亦下调(P<0.05)。结论环巴明抑制SHH信号通路能改善SNI大鼠神经病理性疼痛,其机制可能与其调节脊髓水平BDNF和NR2B蛋白表达有关。

白藜芦醇对PC-3细胞上皮间质转化及Hedgehog信号通路的影响

目的探讨白藜芦醇对前列腺癌PC-3细胞上皮间质转化(EMT)过程及Hedgehog信号通路的影响。方法采用MTT法分别检测不同浓度白藜芦醇和环巴明对PC-3细胞的增殖抑制作用;采用细胞划痕实验和Transwell法检测白藜芦醇和环巴明对细胞迁移和侵袭的抑制作用;采用RT-PCR和Western blotting方法检测Gli-1、SMO、E-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白的表达情况。结果白藜芦醇和环巴明抑制PC-3细胞增殖,同时抑制Gli-1、SMO、Vimentin mRNA和蛋白表达,并上调Ecadherin mRNA和蛋白表达。结论白藜芦醇抑制前列腺癌细胞增殖并通过抑制Hedgehog信号通路从而抑制EMT过程。

Hedgehog信号通路相关蛋白在大鼠胰腺癌发生过程中的变化

目的观察Hedgehog信号通路相关蛋白Pteh、Smo和Glil在胰腺癌发生过程中的作用。方法200只SD大鼠分成对照组（20只）、二甲基苯并蒽（DMBA）组（90只）和环巴明治疗组（90只）。通过胰腺被膜下直接置人DMBA方法诱导胰腺癌模型。环巴明组在置入DMBA后每天腹腔注射6．25rnL／kg体重环巴明溶液。4个月后处死大鼠，观察胰腺组织病理学改变，应用免疫组化sP法检测胰腺癌及正常胰腺组织中Ptch、Smo、Glil的蛋白表达。结果DMBA组胰腺癌诱发成功率为57．5％（46／80），诱发的肿瘤最大径为0．5-〉2．0cm；环巴明组诱发成功率为17．1％（14／82），肿瘤最大径为0．5—2．0cm。两组胰腺癌发生率及肿瘤大小的差异具有统计学意义（P值均〈0．05）。DMBA组胰腺癌组织中Pteh、Smo及Glil阳性表达率分别为82．6％、73．9％和65．2％；环巴明组分别为50．0％、42．9％和28．6％，两组差异具有统计学意义（P值均〈0．05）。3组的正常胰腺组织中均无Ptch、Smo、Glil阳性表达。结论较大剂量DMBA置人胰实质内可在短期内获得较高的胰腺癌发生率；胰腺癌组织Hedgehog信号蛋白表达显著增加；环巴明能抑制Hedgehog信号蛋白表达，进而抑制胰腺癌发生和发展。

Cyclopamine降低肝硬变大鼠门静脉压力及机理初步观察

目的探索Hedgehog通路抑制剂环巴明(cyclopamine,Cyc)对正常和肝硬变大鼠门静脉压力的影响及其可能机理,为进一步的药物疗效研究和临床治疗提供实验依据。方法取健康雄性SD大鼠32只,随机均分正常对照组、正常给药组、肝硬变对照组及肝硬变给药组4组。采用硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)法复制大鼠肝硬变模型,即以0.03%TAA作为初始饮用水浓度,然后根据每周体重变化调整饮用水中TAA浓度,共饲喂12周。第13周开始,正常对照组和肝硬变对照组大鼠接受腹腔注射玉米油,0.1 ml/100 g体重,1次/d,连续1周;正常给药组和肝硬变给药组大鼠接受腹腔注射Cyc,1 mg(0.1 ml)/100 g体重,1次/d,连续1周。第14周时测定各组大鼠的肝功能、门静脉压力(portal venous pressure,PVP)及肝脾重量比,采用免疫组化方法检测肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(typeⅠcol-lagenα1,Col1α1)的表达。结果正常对照组大鼠PVP为(10.7±0.9)cm H2O(1 cm H2O=0.098 kPa),正常给药组PVP为(12.3±1.3)cm H2O,后者高于前者,差异有统计学意义(t=-2.918,P=0.011);肝硬变对照组PVP为(21.8±0.7)cm H2O,肝硬变给药组PVP为(14.3±1.4)cm H2O,后者低于前者(t=13.602,P=0.000)。肝硬变给药组α-SMA和Col1α1的表达均比肝硬变对照组减少。正常给药组和肝硬变给药组的肝功能变化及肝脾重量与其各自对照组之间相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Cyc通过减少α-SMA和Col1α1的表达,显著降低肝硬变大鼠的PVP。