泛素连接酶MuRF2通过抑制线粒体自噬减轻心肌细胞缺氧损伤

目的探讨泛素连接酶肌肉环指状蛋白2(muscle ring finger protein 2,MuRF2)对缺氧心肌细胞活力和自噬的调控作用。方法构建大鼠源MuRF2基因过表达和敲减慢病毒载体,分别感染大鼠心肌细胞H9C2。将H9C2细胞分为阴性对照组(NC)、阳性对照组[MuRF2过表达空载体组(LV-Vector)、MuRF2敲减空载体组(LV-RNAi-Vector)]、Mu RF2过表达组(LV-MuRF2)和MuRF2敲减组(LV-RNAi-MuRF2),缺氧培养(5%CO_(2)、1%O_(2)、94%N_(2))后,采用CCK-8法和ELISA法检测心肌细胞损伤水平,利用透射电子显微镜检测心肌细胞超微结构和自噬水平变化,采用Western blot测定自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和P62的表达水平。结果与对照组相比,缺氧组心肌细胞间隙增大、细胞皱缩、多见漂浮的死亡细胞和细胞碎片,心肌细胞活力下降、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量增加(P均<0.05);电子显微镜下可观察到部分线粒体发生肿胀,并存在嵴断裂、嵴溶解现象,自噬小体散在胞质内;缺氧组LC3-Ⅱ蛋白表达水平升高,P62蛋白表达水平降低(P均<0.05)。缺氧培养后,与NC组和LV-Vector组相比,LV-MuRF2组细胞活力增加,偶见自噬小体,LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低、P62蛋白表达水平增高(P均<0.05);与NC组和LV-RNAi-Vector组相比,LV-RNAi-MuRF2组细胞活力降低,可见大量自噬小体,LC3-Ⅱ蛋白表达水平升高、P62蛋白表达水平降低(P均<0.05)。结论泛素连接酶MuRF2可减轻缺氧所致的心肌细胞损伤,其机制可能与抑制心肌细胞线粒体自噬有关。

RNA干扰环指蛋白2基因抑制胰腺癌细胞系PANC-1增殖和迁移

目的研究沉默环指蛋白2(RNF2)基因对人胰腺癌细胞系PANC-1增殖、迁移、周期和凋亡的影响及可能机制。方法用siRNA-RNF2转染PANC-1细胞沉默RNF2表达,同时设立转染无义序列(siRNA-NC)的空转染组及不进行任何处理的空白对照组(mock)。荧光定量PCR检测RNF2 mRNA表达;Western blot检测RNF2和p53表达;MTS实验和划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力;流式细胞计量术检测细胞转染率、凋亡率和细胞周期。结果相比正常胰腺导管上皮细胞,RNF2在胰腺癌细胞系中高表达(P<0.05)。转染siRNA-RNF2的PANC-1细胞与阴性对照组比较,RNF2 mRNA及蛋白表达下调;细胞增殖被抑制(P<0.05);细胞迁移能力下降(P<0.05);细胞凋亡率增高(P<0.05);G_0/G_1期细胞比例上升,S期和G2/M期细胞比例则降低(P<0.05)。此外,转染siRNA-RNF2显著下调PANC-1细胞中p53蛋白的表达。结论 siRNA-RNF2特异性下调胰腺癌细胞RNF2表达,显著抑制细胞增殖和迁移,结果提示RNF2可能成为胰腺癌基因治疗的一个新靶点。

乳腺癌中RNF2的表达及其临床意义

目的观察RNF2在乳腺病变组织及乳腺上皮细胞系中的表达,探讨其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法运用免疫组化En Vision两步法检测21例乳腺良性病变组织和112例乳腺癌组织中RNF2蛋白的表达,分析其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。应用qRT-PCR法检测2株乳腺正常上皮细胞系和5株乳腺癌细胞系中RNF2基因的表达。结果乳腺癌组织中RNF2蛋白表达水平与乳腺良性病变组织相比显著升高(P<0.05),且其表达与乳腺癌肿瘤直径、腋窝淋巴结转移数目、TNM分期显著相关(P均<0.05);与患者年龄、组织学分级、ER、PR、HER-2表达情况无显著相关(P均>0.05);乳腺癌细胞系RNF2 mRNA水平亦高于乳腺良性上皮细胞系(P<0.05)。结论 RNF2在乳腺癌组织中高表达,可作为乳腺癌治疗的潜在靶点。

白头翁皂苷A通过调控miR-24-3p/RNF2的表达影响乳腺癌细胞增殖及放射敏感性

目的:探讨白头翁皂苷A对乳腺癌细胞增殖及放射敏感性的影响及其作用机制。方法:用浓度为0、5、10、15和20 mg/L的白头翁皂苷A作用于人乳腺癌MCF-7细胞,并转染微小RNA-24-3p(miR-24-3p)过表达载体或抑制表达载体。用MTT法检测细胞活力的变化;集落形成实验检测细胞放射敏感性;RT-qPCR分析miR-24-3p和环指蛋白2(RNF2)的mRNA表达水平;Western blot检测RNF2的蛋白表达;萤光素酶报告基因实验检测miR-24-3p和RNF2的靶向关系。结果:与对照组(0 mg/L)相比,5、10、15和20 mg/L的白头翁皂苷A组MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.05),白头翁皂苷A处理的MCF-7细胞经射线照射后存活分数显著降低,RNF2表达水平显著降低(P<0.05);miR-24-3p靶向负调控RNF2。白头翁皂苷A和miR-24-3p同时处理的MCF-7细胞经射线照射后,存活曲线下移;抑制miR-24-3p表达可逆转白头翁皂苷A对MCF-7细胞的增殖抑制和放射增敏作用。结论:白头翁皂苷A可能通过miR-24-3p/RNF2影响乳腺癌细胞的增殖和放射敏感性。

RNF2在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的探讨环指蛋白2 (RNF2)在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响。方法采用免疫组织化学法检测RNF2在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达,并利用过表达的慢病毒转染HCT116细胞构建过表达RNF2的HCT116细胞系,通过CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测过表达RNF2对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响。结果结直肠癌组织中RNF2阳性表达率高于癌旁正常组织(P <0.05);不同年龄、组织学类型、分化程度、Dukes分期、淋巴结转移的结直肠癌患者的RNF2表达阳性率比较,差异有统计学意义(P <0.05);HCT116组、HCT116-control组、HCT116-RNF2组HCT116细胞增殖、迁移能力及侵袭能力比较,差异有统计学意义(P <0.05);HCT116-RNF2组细胞增殖速度、迁移能力及侵袭能力均高于HCT116-control组和HCT116组(P <0.05)。结论 RNF2在结直肠癌中呈高表达,且过表达RNF2可促进结直肠癌细胞迁移、增殖、侵袭能力,可为结直肠癌治疗提供新的治疗靶点。

RNF2基因在喉癌组织及细胞中的表达情况研究

目的研究环指蛋白2(RNF2)基因在喉癌组织及细胞中的表达情况。方法收集3对临床喉癌及癌旁的组织标本,分别应用免疫组织化学和荧光实时定量聚合酶链反应法分别检测RNF2基因在喉癌及癌旁组织中的表达情况。应用小分子干扰RNA(siRNA)干扰技术敲除RNF2基因表达后,用细胞克隆实验研究敲除RNF2表达对喉癌细胞Hep-2的细胞克隆形成能力的影响。结果免疫组织化学结果显示,RNF2在喉癌组织中的表达呈强阳性,而在癌旁组织中呈阴性或弱阳性;Western blot实验结果显示,喉癌组织中RNF2蛋白含量显著高于癌旁组织;同时,荧光实时定量聚合酶链反应法结果显示喉癌组织RNF2 mRNA水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。敲除RNF2表达后,喉癌细胞的克隆数目明显减少(P<0.05)。结论 RNF2在喉癌组织表达升高,其高表达可促进喉癌细胞增殖。

转染RNF6基因对肝癌细胞IRS-2表达的影响

构建环指蛋白6(RNF6)真核表达载体,并探讨其对胰岛素受体底物1(IRS-2)表达的影响。以人cDNA为模板,PCR扩增RNF6全长编码基因,并将其克隆至载体pcDNA3.1-CHA中,将重组质粒转染肝癌细胞株HepG2,利用Real time-PCR、Western blot检测细胞内IRS-2 mRNA水平及蛋白表达情况。携带RNF6目的基因的质粒转染HepG2细胞48 h后IRS-2的mRNA表达降低,为对照组的37%,显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。RNF6引起IRS-2的表达下调,这一过程可能由于泛素化导致胰岛素信号转导通路障碍。

MuRF2、PPAR γ1和Ub重组质粒的构建及鉴定

目的 构建过氧化物酶体增殖物激活受体γ亚型1(peroxisome proliferator-activated receptor gamma isoform 1,PPAR γ1)、泛素连接酶肌肉环指状蛋白2(ubiquitin ligase muscle ring finger protein 2,MuRF2)和泛素(ubiquitin,Ub)的重组质粒并进行鉴定。方法 根据MuRF2、PPAR γ1和Ub的cDNA序列及GV146和GV417载体质粒上的多克隆位点设计目的基因克隆引物。XhoI/EcoRI内切酶分别双酶切PPAR γ1目的DNA与GV146载体;NheI/BamHI内切酶分别双酶切MuRF2和Ub目的 DNA与GV417载体。用连接酶连接双酶切后的目的 DNA和载体,导入大肠杆菌经筛选获得重组质粒。PCR鉴定重组克隆后进行DNA测序。转染HEK 293T细胞后,于荧光显微镜下观察转染效率;免疫共沉淀实验后用Western blot检测蛋白的表达及蛋白质相互作用。结果 以合成的PPAR γ1、Ub、MuRF2的引物分别对PPAR γ1、Ub和MuRF2的菌落进行PCR扩增,产物大小分别为943、451和1 154 bp,与预期结果一致。测序结果与目的基因序列进行比对分析,证实成功构建出PPAR γ1、Ub和MuRF2的重组质粒。在HEK 293T细胞中共转染His-MuRF2、HA-Ub、PPAR γ1重组质粒,荧光显微镜观察结果提示重组质粒成功转染。免疫共沉淀试验后用Western blot检测可见PPAR γ1、MuRF2和Ub蛋白的有效表达,且验证了MuRF2介导PPAR γ1发生泛素化修饰反应。结论成功构建PPAR γ1、MuRF2和Ub的重组质粒,且三种质粒在HEK 293T细胞中有效表达,验证了MuRF2介导PPAR γ1发生泛素化修饰反应。

结肠癌组织中RNF181、TPX2的表达量及其与癌细胞活力、血管新生的相关性分析

目的:研究结肠癌组织中RNF181、TPX2的表达量及其与癌细胞活力、血管新生的相关性。方法:收集在我院接受手术切除的结肠癌组织及癌旁组织,制作石蜡切片并对RNF181、TPX2进行免疫组化染色,判断蛋白阳性率;抽提RNA并进行荧光定量PCR反应,测定RNF181、TPX2、VEGF、VEGFR1、VEGFR2、HIF-1α的mRNA表达量;采集结肠癌患者的术前血清标本并测定CEA、CA199、CA242的含量。结果:结肠癌组织中RNF181的mRNA表达量及蛋白阳性率均显著低于癌旁组织,TPX2的mRNA表达量及蛋白阳性率均显著高于癌旁组织;结肠癌组织中RNF181阳性患者的血清CEA、CA199、CA242的含量以及结肠癌组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2、HIF-1α的mRNA表达量均显著低于RNF181阴性患者;结肠癌组织中TPX2阳性患者的血清CEA、CA199、CA242的含量以及结肠癌组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2、HIF-1α的mRNA表达量均显著高于TPX2阴性患者。结论:结肠癌组织中低表达的RNF181、高表达的TPX2与癌细胞增殖过程以及血管新生过程密切相关。

胃癌组织中COX-2蛋白、UHRF1蛋白表达及其与胃癌患者临床病理特征的相关性分析

目的探讨胃癌组织中COX-2蛋白、UHRF1表达及其与胃癌患者临床病理特征的相关性。方法选取124例胃癌患者作为研究对象,均经外科手术切除治疗,并于手术中留取距肿瘤边缘>1 cm处的胃癌组织以及距肿瘤边缘5 cm处的癌旁组织,对两种组织中COX-2蛋白及UHRF1蛋白的表达水平进行检测并比较,并对COX-2蛋白及UHRF1蛋白表达与胃癌患者临床病理特征的相关性进行分析。结果胃癌组织中COX-2蛋白表达阳性率高于癌旁组织(P<0.05);胃癌组织中UHRF1蛋白表达阳性率高于癌旁组织(P<0.05);COX-2蛋白及UHRF1蛋白表达与局部浸润程度、是否淋巴结转移、临床分期有关(P<0.05)。结论胃癌组织中COX-2蛋白及UHRF1蛋白呈过表达状态,且与胃癌肿瘤大小、局部浸润程度、是否淋巴结转移、临床分期有关。

食管癌组织环指蛋白2、环指蛋白6的表达与上皮-间质转化和预后的关系分析

目的:探讨食管癌组织环指蛋白2(RNF2)、环指蛋白6(RNF6)的表达与上皮-间质转化(EMT)和预后的关系。方法:选择广东医科大学附属医院2017年2月至2020年2月收治的162例食管癌患者,取手术切除的癌组织和癌旁组织。采用免疫组化法检测RNF2、RNF6以及EMT标志蛋白[上皮钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)Slug和Snail]表达。Spearman相关性分析RNF2、RNF6与EMT标志蛋白的关系;分析食管癌组织RNF2、RNF6表达在不同临床病理特征中的差异;Kaplan-Meier生存曲线分析RNF2、RNF6表达与食管癌患者预后的关系;多因素Cox回归分析影响食管癌患者预后的因素。结果:食管癌组织RNF2、RNF6、N-cadherin、Slug和Snail蛋白阳性表达率高于癌旁组织,E-cadherin蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05)。食管癌组织RNF2、RNF6蛋白阳性表达率与N-cadherin、Slug和Snail蛋白阳性表达率呈正相关,与E-cadherin蛋白阳性表达率呈负相关(P<0.05);低度分化、TNM分IIIA期、肿瘤直径≥2 cm、淋巴结转移在食管癌组织中RNF2、RNF6蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移、肿瘤直径<2 cm,中高度分化、TNM分期I~II期食管癌组织(P<0.05);RNF2阳性表达患者3年OS率为47.17%,低于RNF2阴性表达患者的59.26%(P<0.05),RNF6阳性表达患者3年OS率为47.06%,低于RNF6阴性表达患者的63.41%(P<0.05);多因素Cox回归分析显示TNM分期ⅢA期、淋巴结转移、RNF2阳性表达、RNF6阳性表达是食管癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:食管癌组织中RNF2、RNF6阳性表达率增加,且与肿瘤直径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移以及低生存率有关,RNF2、RNF6可能通过EMT参与食管癌恶性进展过程。

沙田柚RING-H2 finger基因的生物信息学分析

为探讨沙田柚自交不亲和性的机理,利用高通量测序技术对沙田柚自交和异交花柱进行转录组测序,通过差异分析得到了沙田柚RING-H2 finger基因序列。采用生物信息学方法,对其编码的蛋白质从序列特征、理化性质、跨膜结构域、高级结构以及功能域等方面进行了预测和分析。结果表明:该基因全长为845 bp,开放阅读框(ORF)全长为387 bp,编码128个氨基酸,编码蛋白质的分子量为13.61 KDa,理论等电点为4.26;该蛋白质含有一个植物RING-H2 finger蛋白家族的保守结构域,为疏水性不稳定蛋白。氨基酸序列分析表明,其编码的氨基酸与甜橙(Cs4g15340.1)RING-H2 finger蛋白的相似度为98%。这些分析结果可为今后深入研究该蛋白的结构特征和功能提供参考。

泛素连接酶MuRF2抑制心肌细胞线粒体自噬

目的观察泛素连接酶肌肉环指状蛋白2(muscle ring finger protein2,MuRF2)在HL-1心肌细胞自噬中的作用。方法采用慢病毒转染技术上调和下调HL-1心肌细胞中MuRF2的表达。实验分为阴性对照组、阳性对照组(空载病毒对照)、雷帕霉素处理组、MuRF2过表达组和MuRF2敲减组。用雷帕霉素处理细胞,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬蛋白LC3和BNIP3的表达。透射电镜观察HL-1心肌细胞超微结构。结果(1)Western blot验证,MuRF2过表达组中MuRF2蛋白表达水平均高于阴性对照组、阳性对照组、雷帕霉素处理组(P均<0.05),MuRF2敲减组中MuRF2蛋白表达水平均低于阴性对照组、阳性对照组、雷帕霉素处理组(P均<0.05)。(2)Western blot结果表明,雷帕霉素处理组LC3蛋白Ⅱ/Ⅰ比值和BNIP3蛋白表达均高于阴性对照组(P均<0.05),MuRF2过表达组LC3蛋白Ⅱ/Ⅰ比值和BNIP3蛋白表达均低于雷帕霉素处理组(P均<0.05)。与阴性对照组相比,MuRF2敲减组的LC3蛋白Ⅱ/Ⅰ比值和BNIP3蛋白表达均升高(P均<0.05),雷帕霉素处理组和MuRF2敲减组在LC蛋白Ⅱ/Ⅰ比值和BNIP3蛋白表达上差异均无统计学意义(P均>0.05)。透射电镜显示,雷帕霉素处理组线粒体分裂、碎片化,自噬体和自噬溶酶体散在胞质内。MuRF2过表达组线粒体处于融合状态,自噬体明显减少。结论MuRF2可以抑制心肌细胞线粒体自噬。

INHB、MKRN3、FGFR2在女童中枢性性早熟中的预测价值分析

目的分析抑制素B(INHB)、Makorin环指蛋白3(MKRN3)、成纤维生长因子受体2(FGFR2)对女童中枢性性早熟的预测价值。方法选取2018年1月至2021年1月期间于我院就诊中枢性性早熟女童100例作为中枢性性早熟组、健康体检的健康女童80名作为健康组。测定血清INHB水平、MKRN3、FGFR2相对表达量,比较三者在健康组、中枢性性早熟组中的表达及与疾病类型的关系,分析三者对此病的预测价值。结果与健康组比较,中枢性性早熟组INHB水平升高,MKRN3、FGFR2相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.001)。进展型中枢性性早熟INHB水平高于缓慢进展型,MKRN3、FGFR2相对表达量低于缓慢进展型,差异有统计学意义(P<0.001)。Pearson相关性分析显示,INHB与MKRN3呈负相关(r=-0.420,P<0.001);INHB与FGFR2呈负相关(r=-0.218,P=0.029);MKRN3与FGFR2呈正相关(r=0.586,P<0.001)。与INHB、MKRN3、FGFR2单项预测比较,三项联合对女童中枢性性早熟的预测价值较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中枢性性早熟女童血中INHB升高,MKRN3、FGFR2降低,且与疾病类型相关,三者联合对此病的预测价值较高。

胃癌患者病灶组织中UHRF-1、KIF2A及HIF-1α的表达与临床病理特征的关系

目的探讨胃癌患者病灶组织中泛素样含PHD和环指域蛋白-1(UHRF-1)、驱动蛋白超家族成员2A(KIF2A)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其与临床病理特征的关系。方法选取2010年10月至2017年10月在张家港市中医医院就诊的60例胃癌患者作为研究对象,采集患者病灶组织和癌旁组织,采用RT-PCR法和免疫组织化学法检测UHRF-1、KIF2A及HIF-1α的mRNA和蛋白表达,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果病灶组织中UHRF-1、KIF2A及HIF-1α的mRNA表达量均显著高于癌旁组织(P<0.05)。病灶组织中UHRF-1、KIF2A及HIF-1α蛋白阳性率分别为85.0%、65.0%和73.3%,均显著高于癌旁组织的45.0%、10.0%和20.0%(P<0.05)。肿瘤大小≥3cm,中低分化腺癌,TNMⅢ、Ⅳ期,有淋巴转移的病灶组织中UHRF-1、KIF2A及HIF-1α蛋白阳性率较高,差异具有统计学意义(P <0.05)。UHRF-1、KIF2A及HIF-1α蛋白阳性率与性别、年龄和肿瘤浸润程度无关(P>0.05)。结论 UHRF-1、KIF2A及HIF-1α在胃癌患者病灶组织中的表达显著增加,且与患者临床病理特征密切相关。

硫氢化钠增加高糖高脂条件下小鼠心房肌细胞系HL-1谷胱甘肽合成

目的研究硫氢化钠(NaHS)是否通过调节谷胱甘肽(GSH)的合成,降低活性氧自由基(ROS)产生,改善小鼠2型糖尿病心肌病(DCM)。方法将小鼠心房肌细胞系HL-1分为对照组、高葡萄糖(HG:40 mmol/L)和棕榈酸(Pal:500μmol/L)处理组;以及硫氢化钠(NaHS,100μmol/L)、DL-炔丙基甘氨酸[PPG,胱硫醚γ裂解酶(CSE)抑制剂,1 mmol/L]和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,ROS抑制剂,5 mmol/L)处理72 h组。Western blot检测CSE和谷胱甘肽合成酶(GSS)的表达;二氢乙锭(DHE)和二氯氟甲烷(DCFH)检测ROS含量;免疫共沉淀检测核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)泛素化水平及Nrf2与肌肉特异性环指蛋白1(Murf1)的相互作用。结果与对照组比高糖高脂处理HL-1细胞后CSE、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基C(GCLC)、谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基M(GCLM)、谷胱甘肽合成酶(GSS)的表达水平下降,而NaHS能恢复其表达。高糖高脂组ROS含量高于NaHS组。与NaSH组比高糖高脂条件下Murf1与Nrf2的相互作用增加,Nrf2泛素化水平明显增加。结论硫氢化钠减轻Nrf2的泛素化,增加GSH合成关键酶的表达。

结直肠癌组织中环指蛋白2的表达及其临床意义

目的检测结直肠癌组织中环指蛋白2(RNF2)的表达,探讨其与临床病理特征的关系。方法收集2017年5月至2019年5月沧州市中心医院行手术切除并经病理证实的84例结直肠癌患者的肿瘤组织和癌旁组织。实时定量PCR检测其中25对肿瘤组织及癌旁组织样本RNF2 mRNA的表达;免疫组化法检测所有样本中RNF2蛋白表达,并分析RNF2表达与临床病理特征的关系。结果免疫组化显示RNF2主要表达于结直肠癌组织细胞核内,其在结直肠癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。RNF2表达与结直肠癌患者肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移有关(均P<0.05),而与性别、年龄及肿瘤部位无关(均P>0.05)。实时定量PCR显示结直肠癌组织RNF2 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.001)。结论RNF2在结直肠癌组织中高表达,可能参与结直肠癌的发生发展。

焦炉工多环芳烃代谢物与DNA氧化损伤及环指蛋白2基因表达关系

目的探讨焦炉工多环芳烃(PAH)代谢物与DNA氧化损伤及周围血环指蛋白2(RING2)基因表达的关系。方法采用判断抽样方法,选择某焦化厂497名焦炉工为接触组,以同厂175名水处理工人为对照组。采用高效液相色谱法检测2组人群尿中1-羟基芘、2-羟基萘、2-羟基芴、9-羟基菲和8-羟基脱氧鸟苷水平,采用逆转录聚合酶链式反应法测定其全血中RING2基因的表达量。结果接触组人群1-羟基芘、2-羟基萘、2-羟基芴、9-羟基菲水平和RING2 mRNA相对表达水平均高于对照组(P<0.01)。Logistic回归分析显示,在校正了性别、年龄、吸烟、饮酒、2-羟基萘、2-羟基芴和9-羟基菲等因素后,1-羟基芘水平越高,RING2高表达的风险越高(P<0.05)。1-羟基芘中、高水平组人群中,RING2高表达者8-OHd G浓度均高于RING2低表达者(P<0.05)。结论随着研究对象尿中PAH代谢物1-羟基芘水平的升高,RING2高表达的风险增高,DNA氧化损伤程度加重。

氨苄西林通过调控泛素样含PHD和环指域蛋白2及组蛋白H3赖氨酸残基甲基化水平的抗结肠癌作用研究

目的探索氨苄西林通过调控泛素样含PHD和环指域蛋白2(UHRF2)和组蛋白H3赖氨酸残基(H3K9)甲基化水平的抗结肠癌作用机制。方法将SW480、HT29细胞均分为对照组和实验组。实验组给予含1μg·mL^(-1)氨苄西林的RPMI培养基进行培养;对照组给予不含氨苄西林的RPMI培养基进行培养。用蛋白质印迹法检测UHRF2和H3K9甲基化水平,用CCK-8实验法检测细胞的增殖能力,用划痕实验法检测细胞的迁移能力,用Transwell实验法检测细胞的侵袭能力。结果在SW480细胞中,实验组和对照组的UHRF2蛋白相对表达水平分别为102.36±10.12和698.67±36.92,H3K9二甲基化(H3K9me2)蛋白相对表达水平分别为406.59±20.97和721.52±36.20,H3K9三甲基化(H3K9me3)蛋白相对表达水平分别为219.78±25.88和821.97±50.61,细胞凋亡率分别为(45.28±6.35)%和(26.18±3.25)%,细胞划痕愈合率分别为(9.47±3.54)%和(26.29±4.29)%,侵袭细胞数分别为(29.23±3.78)和(39.52±4.15)个,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在HT29细胞中,实验组和对照组的UHRF2蛋白相对表达水平分别为160.85±29.74和551.79±39.76,H3K9me2蛋白相对表达水平分别为385.26±46.98和601.30±29.86,H3K9me3蛋白相对表达水平分别为496.85±36.22和725.91±53.62,细胞凋亡率分别为(50.35±7.43)%和(29.45±5.65)%,细胞划痕愈合率分别为(6.54±4.16)%和(21.14±5.74)%,侵袭细胞数分别为(32.22±3.62)和(41.63±5.59)个,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论氨苄西林可能通过下调UHRF2蛋白水平及H3K9甲基化水平,从而抑制结肠癌细胞的生长。

环指蛋白213基因与烟雾病及颅内大动脉狭窄/闭塞相关性研究进展

颅内大动脉狭窄/闭塞（intracranial major artery stenosis/occlusion,ICASO）是全世界范围内缺血性卒中常见的原因之一[1].无创性头颅血管评估技术的进步和普及,促使ICASO成为研究的热点,特别是危险因素及易感基因方面.烟雾病是一种少见的特殊的脑血管病,研究显示,两者在人种分布及血管受累的分布上具有一致性,因此有假说认为烟雾病是颅内大动脉狭窄/闭塞在亚裔人种高发的混杂因素,但临床医生有时很难以目前的检查手段来准确鉴别ICASO是来源于烟雾病还是与传统的动脉粥样硬化危险因素相关.