胃癌组织环指蛋白43表达变化及意义

目的探讨环指蛋白43(RNF43)在胃癌发生、发展中的作用机制。方法取180例胃癌患者手术切除肿瘤组织及其癌旁组织标本。采用免疫组织化学方法检测RNF43表达,分析RNF43表达水平与胃癌临床病理特征及患者预后的关系。结果胃癌组织RNF43高表达率为46.1%(83/180),癌旁组织为28.6%(51/180),两者比较P<0.05。发生远处转移、淋巴结转移及TNM分期高(Ⅲ+Ⅳ)的胃癌患者RNF43高表达率高(P均<0.01)。RNF43蛋白高表达及低表达者总生存期分别为44.7个月(95%CI:39.5~49.9个月)、61.1个月(95%CI:55.6~66.6个月),两者比较P<0.01。结论胃癌组织RNF43高表达可能是胃癌侵袭、转移及不良预后的原因之一。

环指蛋白43在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨环指蛋白43(RNF43)在人类乳腺癌组织中的表达及其意义.方法利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法、蛋白质印迹法(Western blot)检测60例乳腺癌组织及相应的60例癌旁正常组织中RNF43的mRNA、蛋白表达水平并进行统计学分析.结果RNF43mRNA及蛋白表达在乳腺癌组织的表达量(分别为1.216±0.112、0.439±0.056)显著高于癌旁正常乳腺组织(0.253±0.018、0.107±0.015)(P<0.05).RNF43 mRNA及蛋白表达在浸润性乳腺癌淋巴结转移组(分别为1.713±0.021、0.611±0.026)高于无淋巴结转移组(0.648±0.019、0.242±0.017),瘤周脉管肿瘤侵犯组(1.681±0.009、0.584±0.062)高于无侵犯组(0.860±0.014、0.328±0.071),TNM分期(Ⅲ期,1.713±0.022、0.637±0.014)高于TNM分期(Ⅰ~Ⅱ期,0.928±0.041、0.324±0.050),组织学分级(Ⅱ~Ⅲ级,1.305±0.053、0.471±0.019)高于组织学分级(Ⅰ级,0.638±0.044、0.231±0.071),雌激素受体(ER)表达阳性组(1.443±0.077、0.525±0.017)高于ER表达阴性组(0.726±0.033、0.253±0.007),孕激素受体(PR)表达阳性组(1.439±0.071、0.519±0.020)高于PR表达阴性组(0.857±0.069、0.310±0.010),细胞核增殖抗原(Ki-67)高阳性率组(≥30%,1.401±0.039、0.519±0.014)高于低阳性率组(<30%,0.661±0.071、0.286±0.006),差异均有统计学意义(P<0.05).RNF43 mRNA及蛋白表达与患者的年龄(<35岁组1.124±0.017、0.419±0.037;≥35岁组1.282±0.024、0.453±0.006)、肿瘤大小(≤2 cm组,1.100±0.051、0.412±0.023;>2 cm组,1.262±0.014、0.450±0.030)、病理类型(浸润性导管癌组,1.243±0.079、0.448±0.011;浸润性小叶癌组,1.108±0.044、0.403±0.013)、人表皮生长因子受体2(Her-2)表达(阳性组,1.178±0.009、0.422±0.017;阴性组,1.230±0.011、0.445±0.010)及月经状态(绝经前,1.231±0.049、0.440±0.008;绝经后,1.167±0.056、0.436±0.011)均无明显相关(P>0.05).结论RNF43 mRNA及其蛋白的异常表达可能与乳腺癌的发生、发展、侵袭及转移有关.

环指蛋白43基因与肿瘤

环指蛋白43（RNF43）基因与人类多种肿瘤的发生发展密切相关,与其相关的肿瘤发病机制主要是RNF43基因的异常表达和基因突变.其编码的蛋白在结直肠癌、肝癌中通过多种信号通路参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭,影响肿瘤的发生发展,发挥癌基因的作用;而在卵巢黏液性肿瘤、胰腺导管内乳头状黏液瘤中被认为是抑癌基因.

环指蛋白43对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响

目的探讨环指蛋白43(RNF43)对类风湿关节炎-滑膜成纤维细胞(RA-FLS)分泌MMPs的影响。方法取膝关节置换术的RA患者滑膜组织,酶消法体外培养RA-FLS,构建RNF43慢病毒过表达质粒,转染后利用实时荧光定量(qRT)-PCR检测转染效率。转染成功后提取细胞RNA及培养液上清,分别通过qRT-PCR、ELISA检测MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA及蛋白表达情况。采用独立样本t检验进行统计分析。结果当感染复数40时并加用聚凝胺可满足实验要求,RNF43的mRNA较空病毒对照组升高26158倍。与空病毒对照组相比,RNF43过表达组MMP-1、MMP-3、MMP-13的mRNA[(0.19±0.06),t=28.314,P<0.05;(0.28±0.07),t=23.413,P<0.05;(0.21±0.09),t=18.365,P<0.05]及蛋白[(31.0±9.4)pg/ml,(17.1±2.1)pg/ml,t=3.198,P=0.029]、MMP-3[(38.7±8.1)pg/ml,(24.9±3.5)pg/ml,t=3.514,P=0.015]、MMP-13[(31.0±5.4)pg/ml,(20.6±2.9)pg/ml,t=5.632,P=0.001]均明显减少。结论RNF43可能通过抑制Wnt信号通路活性对RA-FLS分泌MMPs起抑制作用。

环指蛋白43基因及其在消化系统肿瘤中的功能

环指蛋白43（RNF43）是一种重要的泛素链接酶.作为Wnt信号通路中的拮抗蛋白,RNF43具有重要的抗肿瘤作用.RNF43突变后会引起Wnt信号通路的异常激活,进而促进细胞的侵袭、转移与增殖.除此之外,在临床抗肿瘤的研究中发现,RNF43与Wnt通路相互作用的位点有望作为肿瘤治疗的分子靶标.近年来,随着相关研究的逐渐深入,RNF43的分子结构及其与Wnt通路中相关蛋白的作用机制已经逐渐明确.而在临床研究中,RNF43蛋白的类似物及相关疫苗也显示出RNF43在肿瘤治疗中的重要地位.

胃癌患者Wnt通路RNF43基因及蛋白水平的表达情况及临床意义分析

目的探究胃癌患者Wnt通路环指蛋白43(RNF43)基因及蛋白水平的表达情况及临床意义分析。方法前瞻性选取2020年1月至2021年3月在石家庄市人民医院接受治疗的胃癌患者110例。根据患者的临床就诊资料记录其临床病理特征;对所有的患者进行为期2年的跟踪随访调查,记录其生存情况。其中37例死亡患者纳入死亡组,73例存活患者记为存活组。患者入院即刻(治疗前),采用qRT-PCR法检测癌组织中RNF43 mRNA相对表达量,采用蛋白质印迹法检测RNF43蛋白表达水平,对比不同临床特征患者RNF43基因和蛋白的表达水平。结果不同性别、年龄段、肿瘤大小、胃癌原发病灶、T分期、N分期患者的RNF43 mRNA和蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);弥漫型胃癌患者RNF43 mRNA、蛋白表达分别为0.460±0.084、0.041±0.006,均低于肠型癌(0.539±0.140、0.064±0.090)、混合型(0.765±0.101、0.064±0.090)患者,美国癌症协会分期(AJCC)Ⅲ期患者RNF43 mRNA、蛋白表达分别为0.519±0.113、0.043±0.007,Ⅳ期分别为0.478±0.097、0.042±0.011,均低于Ⅰ期(0.660±0.017、0.075±0.012)、Ⅱ期(0.629±0.058、0.067±0.012),存在腹膜转移患者的RNF43 mRNA、蛋白表达分别为0.531±0.109、0.051±0.010,均低于无腹膜转移(0.828±0.097、0.087±0.009),差异均有统计学意义(P<0.05)。2年内死亡组患者RNF43 mRNA、蛋白表达分别为0.319±0.081、0.039±0.011,均低于存活组(0.728±0.029、0.068±0.009),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者Wnt通路RNF43基因及蛋白水平的表达与其性别、年龄、最大肿瘤直径、肿瘤部位无关,不同T分期、N分期患者间表达水平也无显著差异,但Lauren分型、AJCC分期以及是否存在腹膜转移影响其表达,RNF43 mRNA、蛋白表达偏低者预后可能不佳。

环指蛋白43基因在肿瘤中的表达

环指蛋白43(ring finger protein 43,RNF43)是巨人蛋白家族成员,具有环状结构的泛素链接酶结构域和跨膜区等特征性序列,编码E3泛素化激酶,具有E3泛素-蛋白连接酶活性。RNF43因与锌指蛋白3(zinc and ring finger 3,ZNRF3)存在高度结构同源而在Wnt/β-catenin信号通路研究中受到关注。研究表明,RNF43主要通过与Wnt/β-catenin信号通路受体结合,泛素化卷曲蛋白受体和靶向溶酶体途径降解来抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性。RNF43功能的缺失导致卷曲蛋白降解的减少或缺乏,从而增强Wnt/β-catenin信号通路的活性。RNF43的Wnt膜受体清除效应是通过与膜受体结合介导的,故较多研究认为RNF43定位于细胞膜。但也有部分学者认为RNF43是细胞核定位,甚至并无特定细胞器定位,而散在分布于细胞质内。RNF43基因的异常表达和基因突变被认为与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关。现有研究主要包括结直肠肿瘤病变、胃腺癌、胰腺囊性病变、肝癌、卵巢肿瘤、子宫内膜腺癌和神经胶质瘤等。尽管总体研究支持RNF43是一种抑癌基因,但仍有小部分研究提示存在癌基因可能。本文将从RNF43基因的结构基础及定位、生物学功能及其在部分肿瘤中的表达情况做一综述。

环指蛋白43调控Wnt信号通路的研究进展

环指蛋白43(RNF43)是一种E3泛素化连接酶,近年来被发现在Wnt信号通路中起负性调控作用。很多研究表明RNF43突变后会引起Wnt信号通路的异常激活,导致相关肿瘤的发生发展,因此RNF43可能是调控Wnt通路的关键蛋白,并有可能为我们诊断和治疗Wnt通路异常相关性疾病提供新的靶点。本文就RNF43的结构、功能及在Wnt通路中的研究进展作一概述。

RNF43 mRNA、VEGF在胃癌患者中的表达情况及其临床意义

目的探究环指蛋白43(RNF43)mRNA、血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌患者中的表达情况及其临床意义。方法选取胃癌患者105例作为研究对象,检测其外周血RNF43 mRNA相对表达量以及胃癌组织VEGF蛋白的表达水平。比较不同临床病理特征患者RNF43 mRNA、VEGF蛋白表达水平,并采用Logistic回归分析、多重线性回归分析探讨VEGF和RNF43与胃癌患者临床病理指标的关系。结果不同脉管侵犯、淋巴结转移以及TNM分期患者的VEGF蛋白表达阳性占比差异存在显著性(P<0.05)。Logistic分析显示,脉管侵犯、淋巴结转移以及TNMⅣ期是胃癌患者VEGF蛋白表达阳性的独立危险因素(P<0.05)。存在脉管侵犯、淋巴结转移、未分化型、浆膜浸润以及TNMⅢ、Ⅳ期患者的RNF43 mRNA相对表达量偏低(P<0.05)。多重线性回归分析显示,脉管侵犯、淋巴结转移、浆膜浸润、未分化型以及TNMⅢ、Ⅳ期是RNF43 mRNA相对表达量降低的影响因素(P<0.05)。结论胃癌患者外周血RNF43 mRNA低表达和胃癌组织中VEGF蛋白阳性表达均与胃癌患者疾病进展有关,可协助临床胃癌诊断和疗效评估。

Wnt通路ZNRF3和RNF43在儿童急性B淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的探究Wnt信号通路中ZNRF3和RNF43对儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的意义。方法收集41例B-ALL患儿初诊(ND组)及化疗第33天的骨髓样本。初诊时依据危险度分为低危组(n=13)、中危组(n=17)和高危组(n=11)。41例患儿于化疗第33天骨髓均达到完全缓解(CR),定为CR组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ND组、CR组ZNRF3及RNF43 mRNA表达,采用蛋白印迹法(Western blot)检测其蛋白表达。结果ND组ZNRF3、RNF43的mRNA及蛋白表达较CR组明显减低(P<0.05)。低危组ZNRF3、RNF43的mRNA及蛋白表达明显高于中、高危组(P<0.05)。结论初诊时ZNRF3和RNF43低表达可能与儿童ALL发生相关,其相对高表达可能与低危险度相关。

RNF43通过β-catenin抑制黑色素瘤细胞PD-L1表达并促进CD8^(+)T细胞介导的抗肿瘤免疫反应

目的探讨环指蛋白43(RNF43)对黑色素瘤中CD8^(+)T细胞介导的抗肿瘤免疫反应的调节作用。方法利用慢病毒感染技术对小鼠黑色素瘤细胞株B16-OVA进行RNF43基因过表达与敲低;通过小鼠皮下成瘤实验检测Lv-Ctrl-OE组、Lv-RNF43-OE组、Lv-Ctrl-KD组和Lv-RNF43-KD组小鼠黑色素瘤细胞株B16-OVA体内增殖情况,通过流式细胞术检测黑色素瘤肿瘤免疫微环境中CD8^(+)T细胞穿孔素和γ干扰素(IFN-γ)的表达水平;采用实时荧光定量PCR实验检测细胞中β-catenin和程序性死亡受体配体1(PD-L1)mRNA的表达水平;通过双荧光素酶报告基因实验检测RNF43对PD-L1的转录调控作用。结果本研究成功构建RNF43稳定过表达与敲低的小鼠黑色素瘤细胞株Lv-RNF43-OE和Lv-RNF43-KD。小鼠皮下成瘤实验结果显示,Lv-RNF43-OE组瘤体质量为(0.08±0.06)g,明显小于Lv-Ctrl-OE组的(1.04±0.52)g,差异有统计学意义(t=3.71,P=0.032);Lv-RNF43-KD组瘤体质量为(1.94±0.29)g,与Lv-Ctrl-KD组的(1.15±0.74)g相比差异无统计学意义(t=-1.70,P=0.164)。流式细胞术结果显示,Lv-RNF43-OE组CD8^(+)T细胞穿孔素荧光强度为9034±2628,明显高于Lv-Ctrl-OE组的3847±1637,差异有统计学意义(t=-3.35,P=0.015);Lv-RNF43-KD组CD8^(+)T细胞穿孔素荧光强度为966±247,明显低于Lv-Ctrl-KD组的2226±646,差异有统计学意义(t=3.16,P=0.034);Lv-RNF43-OE组CD8^(+)T细胞IFN-γ荧光强度为2422±429,明显高于Lv-Ctrl-OE组的1688±324,差异有统计学意义(t=-2.73,P=0.034);Lv-RNF43-KD组CD8^(+)T细胞IFN-γ荧光强度为614(454,863),与Lv-Ctrl-KD组的1159(1152,2068)相比差异有统计学意义(Z=-1.96,P=0.050)。实时荧光定量PCR实验结果显示,Lv-RNF43-OE组β-catenin mRNA相对表达量为0.67±0.16,明显低于Lv-Ctrl-OE组的1.00±0.11,差异有统计学意义(t=2.98,P=0.041);Lv-RNF43-OE组PD-L1 mRNA相对表达量为0.32±0.09,明显低于Lv-Ctrl-OE组的1.00±0.09,差异有统计学意义(t=9.13,P=0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,pCMV6-NC组、RNF43组、RNF43^(+)β-catenin组和β-catenin组PD-L1启动子荧光素酶活性分别为1.00±0.00、0.84±0.00、1.49±0.00和1.57±0.03(F=2218.33,P<0.001),进一步两两比较发现,与pCMV6-NC组相比,RNF43组PD-L1启动子荧光素酶活性明显降低(P<0.001),RNF43^(+)β-catenin组和β-catenin组PD-L1启动子荧光素酶活性明显升高(P<0.001;P=0.003);与RNF43组相比,RNF43^(+)β-catenin组PD-L1启动子荧光素酶活性明显升高(P<0.001)。结论RNF43可能通过抑制β-catenin的表达降低黑色素瘤中PD-L1 mRNA的表达并促进CD8^(+)T细胞介导的抗肿瘤免疫反应。