中国老年心脑血管疾病患者阿司匹林抵抗与环氧化酶-1单体型关联分析

目的:旨在研究老年心脑血管病患者阿司匹林抵抗与阿司匹林作用靶点环氧化酶-1(COX-1)基因单体型的关联性。方法:入选北京地区服用阿司匹林的老年汉族心脑血管疾病患者431例,通过花生四烯酸诱导光比浊法,筛选出阿司匹林抵抗患者59例作为病例组,372例阿司匹林不抵抗者作为对照组,使用美国Sequenom系统SNP分型技术鉴定了COX-1基因6个常见单核苷酸多态性位点(SNP)与阿司匹林抵抗的关联性。6个SNP分别是:rs1888943(8759C/T)、rs1330344(1676A/G)、rs3842787(exon 2,50C/T,p.Pro17Leu)、rs5787(exon 4,323G/A,p.Arg108Gln)、rs5789(exon7,709C/A,p.Leu237Met)和rs5794(exon10,1330G/A,p.Val481Ile)。结果:突变COX-1单体型CGCGCC,在病例组频率为0.48(57/118),对照组频率为0.39(286/742),显著高于对照组(P≤0.05)。结论:中国老年汉族心脑血管疾病患者阿司匹林抵抗与COX-1单体型相关联,突变COX-1单体型CGCGCC显著增加了阿司匹林抵抗的发病风险。

环氧化酶-1在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)在乳腺癌中的表达与临床病理指标之间的相关性,及其对肿瘤血管生成的影响。方法:应用免疫组织化学方法检测61例乳腺癌组织标本的COX-1和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:61例乳腺癌组织标本中COX-1阳性率为60.7%,COX-1和VEGF表达明显相关(P=0.026)。在肿块<2cm组以及临床Ⅰ期组中COX-1的表达明显增强(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中存在COX-1的高表达,COX-1在乳腺癌的早期阶段可能起着重要作用,VEGF可能是COX-1介导肿瘤新生血管形成的重要因子之一,为非甾体类抗炎药物应用于乳腺癌的预防提供了依据。

环氧化酶-1、环氧化酶-2、Fas配体在门脉高压大鼠胃组织中的表达及意义

目的利用门脉高压大鼠模型观察环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、Fas配体(Fas ligand,Fas-L)在其胃组织的表达情况并探讨其在门脉高压性胃病中的意义。方法雄性SD大鼠20只随机分为实验组和对照组,实验组采用门静脉半结扎法制作门静脉高压大鼠模型并于模型制作成功两周后测量门静脉压力;对照组为假手术组,单纯游离门静脉后缝合切口并于两周后测门静脉压力;测门静脉压后分别取实验组与对照组大鼠胃组织,运用免疫组织化学方法观察COX-1、COX-2、Fas-L的表达情况。结果实验组大鼠门静脉压力明显大于对照组大鼠门静脉压力(P<0.05);实验组大鼠胃组织中COX-1表达明显低于对照组(P<0.05);COX-2的表达二者没有明显差别;Fas-L的表达明显增高(P<0.05)。结论 COX-1一定程度上参与了门脉高压性胃疾病的形成,而COX-2可能并没有参与这一过程的实现。

环氧化酶-1在坐骨神经冷冻致神经病理性疼痛模型大鼠脊髓的表达

目的观察大鼠坐骨神经冷冻(SCN)后行为学变化以及脊髓环氧化酶-1(COX-1)的表达。方法 72只SD大鼠随机分为3组:正常对照组(N组,n=6),假手术组(S组,n=33)和冷冻手术组(C组,n=33),在制模前及制模后1、2和4周进行机械缩足阈测定和自噬评分,每时间点取6只用免疫组织化学染色的方法测定腰膨大脊髓COX-1的表达水平。结果术后冷冻组所有大鼠患侧机械缩足阈在4周时下降,低于术前及正常对照组(P<0.05);对侧下肢机械缩足阈从术后1周开始下降,低于术前和正常对照组(P<0.05),并持续到术后4周。自噬仅发生在冷冻组患侧后足,发生率(1周为40%,2周为43.8%)和严重程度在术后1周至2周内最高。与假手术组比较,术后2周和4周冷冻组脊髓背角COX-1表达增加(P<0.05)。结论脊髓COX-1在冷冻致神经病理性疼痛中枢敏化中有重要作用。

服用环氧化酶-1非甾体类抗炎药老年人行髋关节置换术的麻醉体会

目的探讨服用环氧化酶-1(COX-1)非甾体类抗炎药进行抗凝治疗并行髋关节置换术的老年患者麻醉方法及注意事项。方法将89例服用COX-1非甾体类抗炎药进行抗凝治疗的行髋关节置换术患者随机分两组,Ⅰ组继续服用COX-1非甾体类抗炎药行抗凝治疗,Ⅱ组停止服用COX-1非甾体类抗炎药,两组患者均实施腰硬联合麻醉,比较两组术前、术中、术后出血情况、血常规等指标。结果两组患者术中、术后出血情况,术后血小板计数及凝血谱指标差异无显著性。术后Ⅱ组发生肺梗死、脑梗死等严重并发症增高,与Ⅰ组比较,差异具有显著性。结论服用COX-1非甾体类抗炎药进行抗凝治疗并行髋关节置换术的老年患者围术期继续抗凝治疗,结合椎管内麻醉可达到满意麻醉效果,可减少术后并发症。

5-ASA对TNBS大鼠结肠炎环氧化酶-1和-2的影响

目的观察5一氨基水杨酸（5一ASA）对三硝基苯磺酸（TNBS）诱发的大鼠结肠炎COX-1、COX一2表达的影响。方法雌性健康SD大鼠30只，随机分为A、B、c3组，每组10只。A、B两组大鼠采用TNBS／乙醇灌肠制作大鼠结肠炎模型，造模后第2天A组给予0．9％氯化钠溶液1ml灌肠，B组给予5一ASA1ml灌肠（100ms／kg）；C组为正常对照组，给予0．9％氯化钠溶液1ml灌肠。分别于造模后第7天及第14天，处死每组大鼠各5只，进行DAI评分、大体形态损伤评分，HE染色后组织损伤评分，同时取结肠病变部位组织，生化法检测髓过氧化物酶（MPO）活性，免疫组化法分析COX一1与COX一2的组织表达。结果与A组比较，B组DAI评分、大体形态损伤评分、组织学损伤评分及MPO活性均降低（P〈0．05）。与A组相比，B、C两组COX一1表达水平升高（P〈0．05），COX一2水平降低（P〈0．05）；但C组COX一2表达极弱，与B组有显著性差异（P〈0．05）。结论5～AsA能上调TNBS大鼠结肠炎结肠组织COX一1的表达，抑制结肠组织COX一2的表达。

子宫内膜异位症患者血清环氧化酶-1含量测定及临床意义

目的探讨子宫内膜异位症（内异症）患者血清环氧化酶-1（COX-1）水平的变化及其临床意义。方法采用双抗夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定68例内异症患者（其中,Ⅰ-Ⅱ期10例、Ⅲ-Ⅳ期58例）及56例对照组血清COX-1以及4例内异症复发患者COX-1水平的变化。结果内异症组血清COX-1的水平高于对照组,差异有显著性（P〈0.05）。其中,内异症Ⅲ、Ⅳ期与对照组相比,差异有显著性（P〈0.05）和极显著性（P〈0.01）;内异症患者血清COX-1水平于手术治疗前后比较,差异有极显著性（P〈0.01）。结论COX-1在内异症的发生发展中起重要作用,血清COX-1可望成为内异症诊断和手术治疗监测更有价值的免疫学指标。

黑莓1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因RuACO 1a和RuACO 1b的克隆及功能鉴定

基于前期黑莓(Rubus spp.)品种‘Navaho’果实转录组测序结果,通过反转录PCR克隆获得2个1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)基因,命名为RuACO 1a和RuACO 1b。结果表明:RuACO 1a和RuACO 1b的开放阅读框(ORF)长度分别为939和918 bp,分别含有4和3个外显子。系统进化分析结果显示RuACO1a和RuACO1b与月季(Rosa chinensis Jacq.)、蕨麻〔Argentina anserina(Linn.)Rydb.〕和野草莓(Fragaria vesca Linn.)ACO1蛋白的亲缘关系均较近,且分别属于蔷薇科(Rosaceae)植物中2类ACO1蛋白。RuACO 1a在果实着色后28 d响应乙烯利诱导,其相对表达量急剧升高,而RuACO 1b在果实着色后21 d响应乙烯利诱导,早于RuACO 1a。脱落酸处理后,RuACO 1a和RuACO 1b的相对表达量在果实着色后14和28 d较高。RuACO 1a和RuACO 1b具有组织表达特异性,RuACO 1a在幼果、花蕾和花中的相对表达量较高,RuACO 1b在幼果和幼根中的相对表达量较高。与野生型相比,RuACO 1a和RuACO 1b过量表达转基因拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕植株均表现为叶片中叶绿素相对含量和氮含量升高、开花和角果成熟提前、ACO含量升高。综上所述,黑莓RuACO 1a和RuACO 1b基因均促进拟南芥角果提前成熟。

5,6-二芳基-2,3-二氢-1-吡咯里嗪酮类化合物与环氧化酶的分子对接研究

目的 探讨 5 ,6 二芳基 2 ,3 二氢 1 吡咯里嗪酮类化合物的作用机制。方法 以化合物ZZ 12 2为例 ,应用分子对接方法模拟化合物与环氧化酶 1(COX 1)和环氧化酶 2 (COX 2 )的作用。结果 从ZZ 12 2与COX 1和COX 2的结合模式 ,形成复合物的分子间相互作用能及相应原子间形成氢键的能力表明 ,ZZ 12 2易于与COX 2结合 ,而不易与COX 1结合。结论 ZZ 12 2可能是一个COX 2选择性抑制剂 。

补阳还五汤对家兔血管内皮损伤后细胞间黏附分子-1及环氧化酶-1表达的影响

目的探讨中药补阳还五汤对家兔血管内皮损伤细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和环氧化酶-1（COX-1）表达的影响。方法将健康新西兰大耳白兔20只，随机分为模型组、中药组各10只，模型组、中药组高脂饲料喂养4周后行腹主动脉内膜剥脱术造模，术后各组予正常饲料喂养，中药组予补阳还五汤灌胃4周，模型组予0．9％氯化钠注射液灌胃4周，造模术4周后处死家兔取腹主动脉，用免疫组化法检测各组对ICAM．1和COX-1表达的影响。结果免疫组化染色显示，中药组ICAM-1表达（3．062±0．056）（A值）较模型组的（6．285±0．242）（A值）差异有统计学意义（t=14．41，P〈0．01）；模型组COX-1蛋白表达（0．125±0．021）（A值）显著高于中药组的（0．068±0．013）（A值）（t=12．14，P〈0．01）。结论补阳还五汤对血管内膜增殖早期ICAM-1和COX-1有拮抗作用。

抗性稗草1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因的克隆与表达分析

【目的】克隆稗草(Echinochloa crus-galli)乙烯生物合成途径关键酶1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶基因(Ec ACO),对其进行表达分析和酶活性测定,以探究稗草抗二氯喹啉酸的机理。【方法】根据转录组测序所得Ec ACO部分序列设计引物,分别从二氯喹啉酸的抗性和敏感型稗草中克隆Ec ACO的全长序列,用DNAman以及Gene DOC等软件进行序列分析。用q RT-PCR方法分析抗性和敏感性稗草间的Ec ACO表达水平差异。最后分别将抗性和敏感性稗草Ec ACO的开放阅读框(ORF)序列连接至原核表达载体p MAL-c5x中,并转化至大肠杆菌菌株BL21,经终浓度为0.4 mmol·L-1的IPTG于18℃诱导16 h后,检测Ec ACO蛋白的表达情况。采用MBP吸附柱分离纯化Ec ACO蛋白后,通过测定乙烯释放量,测定抗性和敏感稗草Ec ACO蛋白间的活性差异。【结果】克隆得到抗性稗草和敏感稗草Ec ACO,其编码区序列长度为936 bp,预测蛋白含311个氨基酸残基,蛋白分子量大小和理论等电点分别为35 k D和5.4。序列比对表明,抗性稗草Ec ACO氨基酸序列与粟(Setaria italica)、玉米(Zea mays)、高粱(Sorghum bicolor)同源性分别为93%、92%和91%;与敏感性稗草Ec ACO相比,抗性稗草Ec ACO的氨基酸序列存在5个突变位点,其中有3个突变位点位于保守功能域上。q PCR分析显示,Ec ACO在抗性和敏感性稗草中并无明显的表达水平差异。原核蛋白表达和酶活性测定结果表明,敏感型稗草MBP::Ec ACO融合蛋白单位时间内产生的乙烯释放量是抗性稗草MBP::Ec ACO融合蛋白的2.15倍,因而该基因可能解释了稗草的抗药性机理。【结论】从抗二氯喹啉酸的稗草中克隆了Ec ACO,发现了与抗性相关的5个氨基酸突变位点,其中的3个位点突变位于保守结构域,这可能是引起乙烯释放速率降低以及稗草产生二氯喹啉酸抗性的原因。

血小板环氧化酶及P-选择素的检测及其在冠心病患者中的表达

目的:建立用流式细胞术测定富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)中血小板环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)及P-选择素表达的方法;检测在无抗血小板药物干预的状况下中国汉族冠心病患者血小板COX-1、COX-2及P-选择素的表达情况。方法:入选拟行冠状动脉搭桥术、停用阿司匹林及氯吡格雷7 d以上的冠心病患者20例,采集空腹静脉血,经预处理及荧光标记抗体孵育后用流式细胞仪检测血小板COX-1、COX-2及P-选择素的表达情况。结果:在无抗血小板药物干预的状况下,中国汉族冠心病患者血小板COX-1、COX-2阳性表达比例分别为(39.67±9.20)%和(4.11±2.74)%;生理盐水刺激后血小板膜表面P-选择素的阳性表达率为(13.56±8.07)%,花生四烯酸刺激后的阳性表达率为(24.08±13.49)%,血小板膜表面P-选择素的实际阳性表达率为(10.27±7.40)%。结论:流式细胞术可有效测定血小板COX-1、COX-2和P-选择素的表达,冠心病患者血小板COX-1、COX-2和P-选择素的表达在中国汉族人种与高加索人种间可能存在差异。

阻滞环氧化酶-1活性能抑制小鼠体内肿瘤的生长

美国Vanderbilt人学的研究人员发现，环氧化酶-1(cox-1)抑制剂能减缓小鼠体内卵巢上皮细胞癌的进展。之前的研究结果曾显示，环氧化酶-2(cox-2)抑制剂能抑制直肠癌等肿瘤细胞的生长。

冠状动脉旁路移植术前对环氧化酶-1抑制性的评估：血小板聚集率与患者自测的对比研究

背景抗血小板治疗导致的血小板功能减退可产生围手术期出血，数项对手术前5日内摄入阿司匹林的影响研究结果不一，有的认为摄入阿司匹林会增加围手术期输血量，而有的认为并无显著影响。本项研究的目的在于对比患者自身报告服药情况与血小板功能测定两种方法评估阿司匹林摄入对围手术期输血需求的影响。方法在一项前瞻性研究中，对100例行冠状动脉旁路移植术的患者，术前5日阿司匹林的摄入进行标准化问卷调查。另外，使用Multiplate血小板功能分析仪测定花生四烯酸介导的全血血小板聚集率。结果23例手术前5日内服用阿司匹林的患者中有11例血小板聚集功能异常，77例手术前未服用阿司匹林的患者中有9例血小板功能异常。服用与未服用阿司匹林的患者相比，手术后24小时内胸管引流量及红细胞输注量无显著差别。手术前血小板聚集功能异常的患者（〈51U）所需的血小板输注量（1．1U）显著高于血小板聚集功能正常的患者（0．3U，P=0．001）。结论本研究结果显示全血花生四烯酸诱导血小板聚集率对于血小板相关的凝血功能异常及血小板输注量的预测优于患者自身报告阿司匹林的摄入情况。

环氧化酶和环氧化酶-2抑制剂

非甾体抗炎药通过抑制环氧化酶，减少前列腺素的生物合成而呈现抗炎作用。现在发现，环氧化酶至少有两种异构体，即环氧化酶-1和环氧化酶-2。环氧化酶-1可催化人体正常生理功能所需的前列腺素的合成；环氧化酶-2则由炎性刺激所产生。最近出现的选择性的环氧化酶-2抑制剂，可有效治疗炎症，较少出现副反应，其发现对炎症治疗有重要意义。

环氧化酶在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的:研究环氧化酶(COX)在正常宫颈上皮组织宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌中的表达,探讨其与宫颈癌临床、病理特征的关系。方法:采用组织芯片技术结合免疫组织化学PV法分别检测101例宫颈癌、12例宫颈上皮内瘤变和正常宫颈上皮组织中COX-1、COX-2的表达。结果:①COX-1在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。COX-2在正常宫颈组织中无表达,在CIN(66.7%)及宫颈癌(87.1%)中的表达率明显高于正常宫颈组织(P<0.01),但COX-2在CIN及宫颈浸润癌中的表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②宫颈癌中COX-1的表达与发病年龄、临床分期、病理分级、宫颈浸润深度及淋巴结转移无关(P>0.05);COX-2的表达与发病年龄、临床分期、病理分级及宫颈浸润深度无关(P>0.05),而与淋巴结转移有关(P<0.05),伴淋巴结转移者COX-2的表达较高。结论:COX-1的表达可能与宫颈癌的发生、发展无直接关系;COX-2过度表达可能参与宫颈癌的发生、发展过程,故可作为反映宫颈癌生物学行为的有效指标之一。

五加皮对环氧化酶的影响

目的:探讨五加皮在体外和体内对环氧化酶的影响。方法:测定新生小公牛主动脉内皮细胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬细胞PGE2和大鼠胃壁组织6-keto-PGF1α的含量;观察大鼠胃黏膜溃疡指数的变化。结果:五加皮对环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)都有抑制作用。在剂量相同时,对COX-2的抑制率大于COX-1;五加皮灌胃给药对健康大鼠的胃黏膜无损害,但能加重乙醇诱导的胃损伤。结论:抑制环氧化酶可能是五加皮祛风湿的机理之一。

维吾尔药罗勒对环氧化酶的影响

目的:探讨维吾尔药罗勒醇提物在体外对环氧化酶的影响,从而研究罗勒抗血栓的作用机制。方法:测定人脐静脉内皮细胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬细胞PGE2的含量。结果:罗勒对环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)都有不同程度的抑制作用。在剂量相同时,罗勒醇提物对COX-2的抑制率大于COX-1。结论:本实验从底物的角度证实了罗勒醇提物对COX-1和COX-2的作用,抗血栓部分机理可能是由于抑制环氧化酶而介导的。

独活乙醇提取物对环氧化酶的影响

目的:探讨独活乙醇提取物在体外对环氧化酶的影响。方法:测定大鼠腹腔巨噬细胞6-keto-PGF1α和PGE2的含量。结果:独活对环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)都有不同程度的抑制作用。在剂量相同时,独活对COX-2的抑制率大于COX-1。结论:独活的祛风湿作用可能是通过抑制环氧化酶而介导的。

复方银黄微型灌肠剂对发热大鼠下丘脑中COX-1、COX-2 mRNA表达的影响

目的研究复方银黄微型灌肠剂(YHCE)对发热大鼠下丘脑中环氧化酶-1(COX-1)、环氧化酶-2(COX-2)mRNA表达的影响,探讨其作用机制。方法用酵母混悬液复制发热大鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠下丘脑中COX-1、COX-2的mRNA表达的变化。结果YHCE能明显抑制发热大鼠的体温上升,抑制下丘脑中COX-2的mRNA表达,而对下丘脑中COX-1的mRNA无明显影响。结论YHCE有明显的解热作用,其机制可能与抑制发热大鼠下丘脑中COX-2的mRNA表达有关。