环氧合酶-2抑制剂对佐剂性关节炎大鼠胃黏膜的影响

目的 探究选择性环氧合酶(COX)-2抑制剂是否加重佐剂性关节炎大鼠胃黏膜损伤及其机制。方法 将32只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、关节炎组、正常给药组和关节炎给药组,给予选择性COX-2抑制剂塞来昔布灌胃4 w,取大鼠胃组织行苏木素-伊红(HE)染色损伤评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测前列腺素(PG)E2,实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测COX-1、COX-2 mRNA。结果 与空白对照组比较,关节炎组、关节炎给药组胃黏膜PGE2均显著降低(P<0.05),胃黏膜损伤评分均显著增加(P<0.05);正常给药组胃黏膜PGE2、胃黏膜损伤评分与空白对照组比较无显著差异(P>0.05);关节炎组胃黏膜COX-1、COX-2均较空白对照组显著增加(P<0.05),正常给药组胃黏膜COX-1、COX-2与空白对照组相比均无显著差异(P>0.05);与关节炎组比较,关节炎给药组胃黏膜PGE2、COX-1、COX-2及胃黏膜损伤评分均无显著差异(P>0.05)。结论 在治疗剂量下,塞来昔布不会造成正常大鼠胃黏膜损伤,也不会加重佐剂性关节炎大鼠胃黏膜的损伤;佐剂性关节炎大鼠存在胃黏膜损伤;佐剂性关节炎大鼠胃黏膜损伤可能与黏膜局部PGE2下降相关,COX-1、COX-2表达增加可能与关节炎所致全身慢性炎症有关。

环氧合酶-2选择性抑制剂NS-398诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡及其机制探讨

目的:探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂NS-398对人肝癌BEL-7402细胞凋亡及凋亡抑制蛋白survivin、XIAP和c-IAP1表达的调节作用。方法:用不同浓度的NS-398作用BEL-7402细胞后,MTT法测定细胞增殖抑制情况,FCM法和TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫细胞化学法检测COX-2、survivin、XIAP和c-IAP1蛋白的表达情况。结果:NS-398可以显著抑制BEL-7402细胞的增殖,诱导其凋亡。免疫细胞化学法检测结果显示,与未处理组相比,NS-398作用可使BEL-7402细胞中COX-2、survivin、XIAP和c-IAP1蛋白的表达明显下调(P<0.01)。结论:NS-398对人肝癌细胞株BEL-7402有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与通过下调survivin、XIAP和c-IAP1的表达有关。

姜黄素和环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞时效的双向调节体外实验研究

[目的]观察抗氧化剂姜黄素(Cur)与选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398两种药物同时联用或分时联用对大鼠肝星状细胞(HSC)生长的影响。[方法]体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,接种96孔板,分为5组。Ⅰ:单独姜黄素系列浓度组(0、20、30、40μmol/L);单独NS-398系列浓度组(0,20,40,80μmol/L);Ⅱ:单独NS-398系列浓度组(ABSI)和NS- 398系列浓度组+姜黄素20μmol/L(ABS2)对大鼠HSC增殖的影响,Ⅲ:两种药物同时加药组;Ⅳ:两种药物先后6 h加药组:先加姜黄素20μmol/L作用HSC6h后加NS-398系列浓度组(0、20、40、80μmol/L);先加NS-398系列浓度(0、20、40、80μmol/L)作用HSC6h后加姜黄素20μmol/L组,Ⅴ:析因分析组。各组设不加药物的细胞对照组,与HSC共同培养,以MTT法检测姜黄素、NS-398单用或同时、分时联用对HSC生长的影响。LDH法检测各组对HSC的细胞毒性作用。[结果]单独NS-398系列浓度组和单独姜黄素系列浓度组有抑制HSC的作用,但姜黄素的作用比NS-398强:同时加两药组比分时加药组有明显不同,先加NS-398作用HSC6h组比先加姜黄素作用HSC6h组的抑制率明显降低。[结论]时间因素导致两药联用是双向调节,同时加药或先加姜黄素作用HSC6h组后加NS-398时呈正调节作用,抑制率升高,而先加NS-398作用HSC6h后加姜黄素呈负调节作用,抑制率降低。NS-398对HSC作用一定时间后有抑制姜黄素对HSC起生物效应的作用。

环氧合酶2抑制剂NS-398对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与凋亡的影响

目的:分析环氧合酶2(COX-2)抑制剂NS-398对人肝癌细胞SMMC-7721形态、细胞周期、增殖和凋亡等的影响,探讨NS-398影响肿瘤细胞生长的机制。方法:应用不同浓度NS-398(25、50、75、100和150μmol·L-1)分别作用于SMMC-7721细胞(24、48和72h),并设正常对照组,观察各组SMMC-7721细胞形态学,流式细胞术分析各组细胞周期变化和细胞凋亡率,MTT方法分析各组肝癌细胞生长抑制率。结果:随着NS-398浓度和作用时间的增加,细胞逐渐不能贴壁生长,部分漂浮于培养液中,培养液浑浊。与正常对照组比较,不同浓度NS-398组SMMC-7721细胞G0/G1期比例降低、G2/M期比例增高。正常对照组SMMC-7721细胞无凋亡峰,50μmol·L-1 NS-398组SMMC-7721细胞作用24h后可见凋亡峰出现,作用72h后细胞凋亡水平增高明显。NS-398各组细胞生长抑制率呈浓度和时间依赖性升高。结论:COX-2抑制剂NS-398能够抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并诱导细胞凋亡,该过程具有明显的时间和剂量依赖性。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398体外抑制结肠癌细胞增殖和侵袭

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对结肠癌细胞增殖、侵袭的影响,探讨COX-2作为结肠癌治疗靶标的可行性。方法:用RT-PCR和Western印迹法检测结肠癌细胞CW-2、COLO-320中COX-2基因及蛋白的表达。MTT法观察NS-398对COLO-320细胞增殖的抑制作用;体外细胞侵袭试验检测NS-398对细胞侵袭能力的影响;West-ern印迹检测NS-398对基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。结果:结肠癌细胞株CW-2、COLO-320中COX-2均有阳性表达。NS-398能抑制结肠癌细胞株COLO-320的生长,抑制作用具有时间、浓度依赖性。细胞侵袭试验表明,NS-398体外能抑制结肠癌细胞株COLO-320的侵袭。Western印迹结果表明NS-398可以抑制COLO-320中MMP-2的表达。结论:COX-2抑制剂NS-398体外可显著抑制结肠癌细胞的生长、侵袭,COX-2可作为结肠癌治疗的靶点。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响

目的探讨选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对人肝癌HepG2细胞株的生长抑制、诱导凋亡及其对bcl-2表达的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期、凋亡及凋亡相关蛋白bcl-2的表达。结果NS-398抑制HepG2的增殖活性,经20、40、80和160μmol/L的NS-398处理细胞48h后,其抑制率分别为6.72%、16.21%、20.86%和25.34%,呈剂量依赖效应关系;细胞经160μmol/L的NS-398处理24h、48h和72h后,G0/G1期细胞由76.07±0.75%分别减少至62.27±0.74%、59.17±1.47%和53.03±1.60%(P<0.05),S期细胞由11.40±0.79%分别增加至13.23±0.81%、16.20±1.95%和16.60±1.25%(P<0.05),G2/M期细胞无明显变化;凋亡细胞增多,凋亡率分别为8.47%、16.3%和23.9%;细胞经160μmol/L的NS-398处理48h后bcl-2蛋白与对照组比,表达下调(P<0.01)。结论NS-398对人肝癌细胞株HepG2有抑制增殖、诱导凋亡作用,细胞凋亡的机制可能与细胞凋亡相关基因bcl-2表达下调有关。

环氧合酶抑制剂NS-398抑制食管癌干细胞增强放射敏感性的研究

放射治疗是目前食管癌的主要治疗手段，但疗效欠佳，放射增敏成为肿瘤研究的热点。有研究发现食管癌的放射治疗效果不理想与食管癌干细胞的放射治疗抵抗性、高侵袭转移性有关。到目前为止，尚未发现食管癌干细胞的特异性标志物。

环氧合酶-2及其特异性抑制剂NS-398对膀胱癌细胞体外生长与侵袭能力的影响

目的 研究环氧合酶 2 (Cyclooxygenase 2 ,COX 2 )及其特异性抑制剂NS 3 98在膀胱癌细胞生长和侵袭转移中的作用。方法 利用转基因技术将COX 2cDNA基因导入低表达COX 2的膀胱癌细胞株EJ ,获得高表达COX 2的永久转染细胞EJ COX2 。观察转染前后细胞生长速度的变化 ;在NS 3 98作用下 ,Boyden小室检测细胞的侵袭能力的改变 ,用RT PCR和Westernblotting检测uPA的表达变化。结果 转染COX 2的EJ COX2 细胞体外增殖能力增强 ;穿过人工基底膜的体外侵袭能力增强 ;尿激酶型纤溶酶原激活因子 (Urokinaseplasminogenactivator ,uPA)的表达上升 ;NS 3 98能呈剂量依赖地抑制COX 2、uPA的表达和EJ COX2 细胞的侵袭能力。结论 COX 2能促进膀胱癌细胞生长 ,并通过促进uPA的表达从而促进其侵袭转移的能力 ,NS 3 98能呈剂量依赖地抑制COX 2、uPA的表达和EJ COX2 细胞的侵袭能力。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用

目的:探讨NS-398对人食管癌细胞株EC9706的生长抑制作用。方法:采用3H-TdR掺入法检测不同浓度(0、10、20、50、100μmol/L)和作用24、48、72、96h的NS-398对细胞的增殖抑制效应;采用流式细胞术(FCM)及DNA片段分析法检测NS-398诱导的细胞凋亡情况。结果:EC9706经不同浓度的NS-398处理后,实验组3H-TdR掺入量明显减少,具有时间和剂量依赖关系,与对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.001)。FCM检测发现实验组在G1期前出现亚倍体凋亡峰,细胞凋亡率达(45.23±1.08)%,并出现典型的细胞凋亡梯带;而对照组无凋亡峰出现,细胞凋亡率为(2.14±0.28)%,两组比较有显著性差异(P<0.001)。结论:NS398对食管癌细胞株EC9706细胞具有增殖抑制作用和诱导细胞凋亡作用。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398抑制多药耐药细胞株P-糖蛋白表达

目的:探讨选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS-398对多药耐药细胞株K562/ADM细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响。方法:K562/ADM细胞经浓度分别为10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L的NS-398处理,24h、48h、72h后用RT-PCR法检测MDR1mRNA的表达、用流式细胞仪检测mdr1蛋白表达。结果:随着NS-398浓度的升高以及作用时间延长,MDR1mRNA、p-gp表达降低,不同浓度的药物与测量时间之间存在着交互作用(P<0.05)。结论:选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398可抑制K562/ADM细胞的MDR1/P-gp表达。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞凋亡的影响

目的:观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞(HSC)凋亡及凋亡相关基因的影响。方法:采用不同浓度的NS-398作用于HSC-T6,应用流式细胞术和透射电镜检测HSC凋亡,细胞免疫化学法检测凋亡HSC中凋亡相关基因p53、bcl-2蛋白表达的变化。结果:90、120、150μmol/LNS-398作用HSC-T6 48h后,流式细胞术检测到HSC凋亡,各组凋亡指数分别为(10.5±0.015)%、(13.2±0.010)%和(17.3±0.012)%,与对照组(4.3±0.006)%比较,差异有统计学意义(P<0.01);透射电镜观察到细胞皱缩、核染色质浓缩沿核膜排列等细胞凋亡特征性改变;以120μmol/L NS-398作用HSC-T6 48h后,凋亡相关蛋白p53、bcl-2的阳性细胞百分率分别为(82.06±0.14)%、(34.20±0.77)%,与对照组(14.06±0.24)%、(96.66±0.79)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:NS-398可以剂量依赖性诱导HSC凋亡;上调凋亡相关基因p53的表达,下调bcl-2的表达可能是NS-398诱导HSC凋亡的机制之一。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对胆管癌细胞株QBC939的抑制作用(英文)

Objective: We studied the inhibitory effect of human cholangiocarcinoma line (QBC939) treated by selective cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitor NS-398 and provided the theoretical foundation for the clinical practice. Methods: Selec- tive COX-2 inhibitor NS-398 on the growth suppression was evaluated by MTT method. The apoptotic rate was quantified and cell cycle by flow cytometry (FCM). Invasive ability was detected by Transwell. The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and COX-2 in cholangiocarcinoma line was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: NS-398 could be time-dose dependently inhibited the growth, induced apoptosis, invasived ability, S phase was inhibited, down-regulate the expression of VEGF and COX-2 in cholangiocarcinoma line (QBC939). Conclusion: NS398 can inhibit proliferation of cholangiocarcinoma cell Iine QBC939 and inhibit the invasive ability and induce its apoptosis in vitro, which may contributed to the COX-2 dependent pathway to reduce the release of VEGF.

环氧合酶-2抑制剂NS398对人卵巢癌细胞系CAOV3细胞增殖的影响

目的:探讨环氧合酶-2抑制剂NS398对人卵巢癌细胞系CAOV3细胞增殖的影响。方法:采用MTT法观察NS398对CAOV3的增殖抑制情况;流式细胞仪测定NS398对CAOV3细胞周期的影响;放射免疫方法检测NS398作用前后PGE2量的变化。结果:NS398对CAOV3细胞的增殖具有抑制作用,并显示出明显的时间和剂量的依赖性;NS398使CAOV3细胞发生细胞周期的G1期阻滞,并抑制CAOV3细胞分泌PGE2。结论:NS398抑制PGE2的分泌,抑制CAOV3细胞增殖,使细胞增殖停留在G1期。

环氧合酶-2抑制剂NS398对食管癌细胞迁移的抑制作用及其机制

目的探讨COX-2选择性抑制剂NS398对食管癌细胞株EC109迁移能力的影响及其可能机制。方法选用食管癌细胞株EC109为靶细胞,分别加入不同浓度(0、50、100μmol/L)的NS398,利用细胞划痕实验,观测细胞48h内迁移能力变化;采用逆转录PCR方法检测目标基因COX-2、RhoA、CDC42及Rac-1的表达变化。结果细胞划痕实验显示,50μmol/L NS398组迁移距离[24h:(50.81±8.51)μm,48h:(109.67±18.38)μm]及100μmol/L NS398组迁移距离[24h:(53.15±9.58)μm,48h:(97.42±13.20)μm]与对照0μmol/L NS398组迁移距离[24h:(68.72±5.68)μm,48h:(129.68±10.79)μm]相比均明显减少(均P<0.05),说明加入NS398后细胞迁移能力下降。50μmol/L NS398组及100μmol/L NS398组与对照0μmol/L NS398组相比,COX-2、RhoA、CDC42、Rac-1表达均降低(均P<0.05)。结论 NS398可抑制食管癌细胞EC109迁移运动能力,其机制可能与抑制COX-2表达,调节迁移基因RhoA、CDC42及Rac-1的表达有关。

选择性环氧合酶-2抑制剂Celebrex对胰腺癌血管内皮生长因子表达的影响

背景与目的:有研究证实,环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)与肿瘤,特别是与消化系统肿瘤形成的关系较为密切,而其抑制剂则具有抗肿瘤作用。本研究观察选择性COX-2抑制剂Celebrex对裸鼠胰腺癌PC-3细胞移植瘤血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法:观测Celebrex对裸鼠移植瘤生长的影响,并采用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Westernblot)以及酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测裸鼠移植瘤组织中VEGF的表达。结果:给药组移植瘤生长曲线较对照组明显低平。对照组移植瘤体积为0.438cm3,给药组为0.212cm3(抑瘤率为51.6%,P<0.05)。给药组与对照组相比,VEGF表达明显减弱,ELISA显示,对照组VEGF表达量为(1.11±0.11)μg/g,给药组为(0.66±0.11)μg/g,VEGF抑制率为40.6%,两组间有显著性差异(P<0.05)。结论:COX-2可能参与了肿瘤新生血管的生成;选择性COX-2抑制剂Celebrex具有抑制肿瘤生长和对抗肿瘤新生血管生成的作用。

神经病理性痛后全脑环氧合酶表达的变化及不同选择性环氧合酶抑制剂镇痛效应的比较(英文)

为了观察坐骨神经损伤(SNI)后小鼠全脑环氧合酶(COX)-1和COX-2的表达变化,以及不同选择性的COX抑制剂对SNI所致神经病理性痛的效应。对小鼠施行SNI后,我们采取放射免疫法,RT-PCR法和蛋白印迹法测定术前以及术后1h、12h、1d、3d、7d、14d、30d、60d等不同时间点的脑COX-1和COX-2的表达;采用热板法,分别测定小鼠在各时间点注射生理盐水、NS-398、SC-560或吲哚美辛后的疼痛阈值。结果观察到:(1)SNI后直到第14d脑COX-1表达水平才显著增高,而COX-2表达在SNI后早期即明显增高,到1d时出现峰值(P值均<0.05);(2)SNI后早期应用NS-398对SNI所致神经病理性痛有镇痛效应(P<0.05),但该效应持续短于30d;(3)吲哚美辛和SC-560到SNI后第14d才表现出明显镇痛效应。结果提示,脑COX-1参与SNI所致神经病理性痛的后期过程,可能与疼痛持续有关;而脑COX-2参与早期过程,可能与疼痛发生有关。

选择性环氧合酶-2抑制剂体外筛选模型的建立

目的:建立选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂筛选模型。方法:以脂多糖(LPS)为刺激剂刺激大鼠腹腔巨噬细胞产生前列腺素E2(PGE2),采用放免法确定最佳刺激浓度和时间,以选择性COX-2抑制剂戊地昔布和达布非隆(darbufelone)为阳性对照药验证实验模型。结果:达布非隆和戊地昔布对COX-2和COX-1的半数抑制浓度(IC50)的比值分别为3．175×10-4和3．576×10-3。结论:本实验建立的COX-2抑制剂筛选模型比较灵敏,可靠,可用于选择性COX-2抑制剂的筛选。

选择性环氧合酶-2抑制剂对胃癌细胞生长的影响

目的 观察选择性环氧合酶 - 2 ( COX- 2 )抑制剂 (美洛昔康、塞来昔布、罗非昔布 )对人胃癌细胞株SGC790 1生长的影响以及罗非昔布对人胃癌裸鼠移植瘤生长的抑制效应。方法 采用 3H-胸腺嘧啶核苷 ( 3H- Td R)掺入法了解细胞的增殖 ;用免疫组化检测细胞增殖核抗原 ( PCNA)及细胞 COX- 2的表达 ;用 TUNEL 染色法检测细胞凋亡。建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型 ,给予罗非昔布 8周 ,观察肿瘤大小、COX- 2及 PCNA表达情况。结果三种选择性 COX- 2抑制剂均较阿司匹林更有效抑制体外培养的胃癌细胞 3H- Td R掺入 ,3H-胸腺嘧啶掺入值与药物浓度呈负相关。美洛昔康、塞来昔布、罗非昔布对胃癌细胞 3H-胸腺嘧啶掺入的 IC50 分别为 1.18× 10 - 7mol/ L、1.68× 10 - 8mol/ L、4.3 9× 10 - 9mol/ L。经 1× 10 - 5m ol/ L 的上述三种药物作用 2 4h,SGC790 1细胞凋亡指数分别为 19.8%± 1.8%、2 4.6%± 1.2 % 3 1.2 %± 2 .2 %。 COX- 2抑制剂的选择性越高 ,凋亡指数也显著升高 ( P<0 .0 1)。罗非昔布对裸鼠胃癌原位移植瘤的抑瘤率为 93 .9% ;肿瘤组织的 COX- 2、PCNA表达均较对照组明显下降。结论 COX- 2抑制剂的选择性越高 ,对胃癌生长抑制作用越强。

3种选择性环氧合酶-2抑制剂对胰腺癌生长的影响

目的 比较 3种不同选择性的环氧合酶 - 2 (COX - 2 )抑制剂———美洛昔康、塞来昔布、罗非昔布对人胰腺癌细胞生长及凋亡的影响 ,观察罗非昔布对人裸鼠胰腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法 采用3 H -胸腺嘧啶核苷掺入 ,了解细胞DNA合成 ;用免疫组化检测增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)及细胞COX - 2的表达 ;用TUNEL染色法检测细胞凋亡。建立裸鼠胰腺癌移植瘤模型 ,给予罗非昔布 8周 ,观察肿瘤大小、肿瘤组织的COX - 2及PCNA的表达情况。结果 3种COX - 2抑制剂均能抑制体外培养的胰腺癌细胞株BxPC - 3的3 H -胸腺嘧啶核苷掺入 ,其抑制效应与药物浓度呈显著正相关。COX - 2抑制剂的选择性越高 ,对胰腺癌细胞生长的抑制作用越强。COX - 2抑制剂均能诱导胰腺癌细胞的凋亡、降低胰腺癌细胞的COX - 2、PCNA的表达。罗非昔布对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑瘤率为 87.7% ;肿瘤组织的COX - 2、PCNA表达均较对照组明显下降。结论 3种选择性COX - 2抑制剂均能抑制人胰腺癌细胞的生长 ,并诱导其凋亡 ,对COX - 2的选择性越高 ,对胰腺癌的抑制作用越强。

环氧合酶-2抑制剂联用姜黄素对肝星状细胞增殖抑制作用的观察

目的观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398与姜黄素联用对大鼠肝星状细胞(hepaticstellatecells,HSC)增殖的影响。方法体外培养肝星状细胞株HSC-T6,接种96孔板,分别加入终浓度为20μmol/L的NS-398和姜黄素,两药物单独或联合应用与HSC共同培养,以MTT法检测NS-398、姜黄素单用或联用24h(n=4)对HSC生长的抑制情况。LDH法检测NS-398、姜黄素对HSC的毒性作用。结果NS-398、姜黄素及联合应用两药对HSC的增殖的抑制率分别为6.0%,20.5%,44.0%,与细胞对照组比较差异有显著性(P<0.01),联合用药组优于单用药组(P<0.05)。与对照组比较,各浓度组培养上清液中LDH活力差异无显著性(P>0.05)。结论NS-398与姜黄素均可以抑制HSC增殖,联合用药的效果明显优于任一药物单用。