缺氧时猪肺动脉平滑肌细胞中环氧合酶和血栓素合酶基因表达变化研究

应用培养的猪肺动脉平滑肌细胞经分子杂交和放射免疫检测发现:缺氧可使环氧合酶（COX）基因表达增加，缺氧6、24、48h，环氧合酶-2（COX-2）和环氧合酶-1（COX-1）mRNA水平分别是常氧组的3、1、1倍和1、2、2.7倍。并在不同时间缺氧（6、24、48h），平滑肌细胞条件培养基中6-酮-前列腺素Flα含量也显著高于相应对照组（P＜0.05），但缺氧对血栓素合酶（TXS）基因表达及血栓素入生成无明显影响。结果表明:缺氧可使平滑肌细胞COX基因表达及前列环素（PGI2）自分泌增加，它可能在平滑肌细胞缺氧收缩及增生反应中起调节作用。并且从缺氧时COX和PGI2生成的动态变化说明，缺氧时PGI2生成的迅速增多主要与COX-2mRNA表达增加有关。

膀胱移行细胞癌中环氧化酶-2的表达及其预后价值

目的:探讨与膀胱移行细胞癌(BTCC)预后相关的新诊断方法。方法:采用免疫组织化学S P法检侧68例原发性BTCC和10例正常膀胱组织标本环氧化酶2(COX 2)的表达,结合临床资料探讨其相互联系及其表达与患者预后的关系。结果: 68例BTCC组织中,COX 2阳性表达率为63. 2% (43 /68),与肿瘤的病理分级、临床分期、血管浸润有关(P<0. 05),而与淋巴结是否转移的差异无统计学意义(P>0. 05);对照组10例正常膀胱黏膜COX 2表达均为阴性;COX 2表达阳性生存超过5年者(54. 1% )明显低于COX 2表达阴性者( 91. 3% )(P<0. 05)。结论:COX 2表达与BTCC的恶性程度密切相关,检测COX 2表达对判断BTCC的预后有重要意义。

环氧化酶-2抑制剂对白血病HL-60细胞的影响

目的:研究环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来考昔(Celecoxib)对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制、诱导凋亡作用及其机制。方法:以不同浓度的Celecoxib作用于体外培养的HL-60细胞,MMT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化,并对细胞凋亡前后的Caspase3活性进行检测。结果:COX-2抑制剂Celecoxib可显著的抑制细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡,在细胞凋亡过程中Caspase3活性显著升高,并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论:COX-2抑制剂Celecoxib对HL-60细胞具有显著的增殖抑制及诱导凋亡作用,升高Caspase3活性可能是其重要作用机制之一,这为COX-2抑制剂进一步用于临床治疗白血病提供了有利的实验依据。

半胱氨酸酶在NS-398诱导HepG2细胞凋亡中的作用

目的探讨选择性环氧合酶(COX-2)抑制剂NS-398诱导肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制。方法采用流式细胞术测定细胞凋亡情况;Westernblot法检测不同浓度NS-398处理后凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase3表达的变化;并以流式细胞术检测半胱氨酸酶-3(Caspase-3)酶活性的变化。结果流式细胞术显示NS-398(0、100、200、300、400μmol/L)作用HepG2细胞24h后,对照处理组没有出现凋亡峰,其余各组(100、200、300、400μmol/L)出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(10.51±1.04)%、(27.79±2.40)%、(45.72±3.32)%,(60.22±2.03)%(P<0.01),不同浓度NS-398处理后凋亡相关蛋白Bcl-2表达下降,Caspase3蛋白表达增加,随着NS-398处理浓度的增加,表达活性Caspase3的细胞百分率分别为(2.67±0.22)%、(9.53±0.15)%、(21.28±0.43)%、(39.63±0.8)%、(63.40±0.69)%(P<0.01)。结论选择性COX-2抑制剂可能通过调节Bcl-2蛋白表达活化Caspase3,从而诱导肝癌细胞HepG2凋亡。

上皮性卵巢癌组织中COX-2表达及塞来昔布对卵巢癌细胞株生长抑制作用的研究

目的:探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在上皮性卵巢癌中的表达及其选择性抑制剂塞来昔布对卵巢癌细胞株生长的影响。方法:应用免疫组化的方法检测正常卵巢、卵巢良性肿瘤、上皮性卵巢癌组织及卵巢癌细胞株OVCAR3、SKOV3中COX-2的表达,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色结合荧光显微镜等技术,研究塞来昔布对OVCAR3细胞增殖和凋亡的影响。结果:COX-2在上皮性卵巢癌组织中高表达,阳性率为71.1%,而在正常卵巢和良性卵巢肿瘤中未见表达。COX-2在上皮性卵巢癌组织中的表达与临床分期、组织学类型、组织学分级无关(P>0.05),而与淋巴结转移有关(P<0.05)。塞来昔布可抑制OVCAR3、SKOV3细胞生长,呈浓度和时间依赖性,S-N-K分析及最小显著差(LSD)检验组间两两比较,P均<0.05。荧光显微镜下见典型的凋亡形态学改变,凋亡比例呈剂量和时间依赖,S-N-K分析组间两两比较,P均<0.05。结论:上皮性卵巢癌组织及细胞株OVCAR3、SKOV3中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制卵巢癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡,塞来昔布可能成为卵巢癌化疗的有效药物。

c-MET和COX-2在肝细胞癌中表达的意义及其相关性

目的探讨c-MET和COX-2在肝细胞癌组织中表达的意义及其相关性。方法将2006年1月至2006年12月手术后经病理证实为肝细胞癌患者28例分为肝硬化组和非肝硬化组,再根据癌肿的大小分为大于5 cm组和小于5 cm组。采用免疫组织化学法对28例肝细胞癌患者肝组织进行染色,利用美国S imp lePC I6专业图像分析系统截取显微镜下的10-15个视野,测算c-MET和COX-2的平均光密度值。结果肝硬化组的c-MET和COX-2平均光密度值均比非肝硬化组高;大于5 cm组的c-MET和COX-2平均光密度值均比小于5 cm组高;c-MET和COX-2呈正相关。结论HGF-c-MET-COX-2-VEGF通路可能是促进肝细胞癌血管生成的一个潜在通路,为肝细胞癌抗血管生成治疗策略提供新的靶点。

过氧化物酶体增殖因子活化受体γ在胰腺癌中的表达及其意义

目的 研究过氧化物酶体增殖因子活化受体 (PPAR)在胰腺癌中的表达 ,探讨其可能意义。方法 分别应用免疫组织 (细胞 )化学和逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)检测正常胰腺组织、2 4例胰腺癌组织和胰腺癌细胞株PC 3及PANC 1中PPARα、δ、γ表达。结果 RT PCR显示正常胰腺组织PPAR各亚型mRNA均无表达 ,而胰腺癌组织和胰腺癌细胞株PPARγmRNA高表达 ,PPARα和PPARδmRNA则无表达。免疫组织 (细胞 )化学显示胰腺癌组织及细胞株PPAR(呈高表达 ,在胰腺癌组织表达总阳性率为 79.1 7%。结论 本文初步观察到核内受体PPARγ在人胰腺癌组织及人胰腺癌细胞株中表达上调。