CircRNA锌指RNA结合蛋白在恶性肿瘤中作用研究进展

环状RNA是一类具有特殊共价闭合环状结构的RNA分子,环状RNA锌指核糖核酸结合蛋白(circRNA⁃ZFR)在诸多恶性肿瘤中呈异常表达,并且其表达水平与肿瘤临床分期、癌细胞转移及患者预后密切相关;circRNA⁃ZFR可通过内源竞争性吸附miRNA、调节细胞周期、激活多种信号通路等机制参与调控肿瘤的发生发展。深入研究circRNA⁃ZFR在恶性肿瘤中的表达及作用机制有助于相关肿瘤的早期诊断、靶向治疗和患者预后评估。

circZNF609靶向miR-1287-5p对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响

目的探索环状核糖核酸锌指蛋白609(circZNF609)是否通过靶向微小核糖核酸-1287-5p(miR-1287-5p)影响皮肤鳞状细胞癌(cSCC)A431细胞增殖和凋亡。方法应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定circZNF609和miR-1287-5p在cSCC组织中的表达。在cSCC A431细胞中转染小分子干扰阴性对照(si-NC组)、sicircZNF609(si-circZNF609组)、miR阳性对照(miR-NC组)、miR-1287-5p模拟物(miR-1287-5p组)、si-circZNF609+anti-miR-NC(si-circZNF609+anti-miR-NC组)、si-circZNF609+miR-1287-5p抑制剂(si-circZNF609+anti-miR-1287-5p组)。运用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成实验、流式细胞术和蛋白质印迹法(Western blotting)测定细胞活力、克隆形成、凋亡和活化的胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、cleaved caspase-9蛋白表达。双荧光素酶报告实验分析circZNF609和miR-1287-5p的靶向关系。结果circZNF609在cSCC组织中的表达水平比癌旁组织增加约2.85倍,miR-1287-5p在cSCC组织中的表达水平是癌旁组织的34%(P<0.05)。干扰circZNF609表达或miR-1287-5p过表达可降低cSCC A431细胞活力、克隆形成数,提高细胞凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达(P<0.05)。circZNF609靶向调控miR-1287-5p的表达。下调miR-1287-5p表达逆转了干扰circZNF609表达对cSCC A431细胞增殖和凋亡的作用。结论干扰circZNF609表达通过靶向miR-1287-5p,抑制cSCC的细胞增殖,促进其凋亡。

哮喘患儿血清CircZNF652的表达水平及其临床意义

目的探讨哮喘患儿血清环状RNA锌指蛋白652(CircZNF652)的表达水平及其临床意义。方法选取105例哮喘患儿作为观察组,根据临床表现将其分为急性发作期组(57例)和慢性缓解期组(48例),另选取80例健康儿童作为对照组。比较观察组与对照组之间、急性发作期组和慢性缓解期组之间的血清CircZNF652、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的表达水平,以及肺功能指标[1秒用力呼气容积(FEV_(1))、呼气峰值流速(PEF)、FEV_(1)/用力肺活量(FVC)值]。采用Pearson检验分析观察组血清CircZNF652表达水平与肺功能指标及血清TNF-α、IL-6表达水平的相关性。绘制受试者工作特征曲线分析血清CircZNF652表达水平对儿童哮喘的诊断价值。采用多因素Logistic回归模型分析儿童哮喘急性发作的影响因素。结果观察组FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值均低于对照组,而血清CircZNF652、TNF-α、IL-6表达水平均高于对照组(均P<0.05);急性发作期组FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值均低于慢性缓解期组,而血清CircZNF652、TNF-α、IL-6表达水平均高于慢性缓解期组(均P<0.05)。观察组血清CircZNF652表达水平与FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值均呈负相关,与血清TNF-α、IL-6表达水平均呈正相关(均P<0.05)。血清CircZNF652表达水平诊断儿童哮喘的曲线下面积为0.741,灵敏度和特异度分别为75.24%、67.50%,最优截断值为1.12。FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值,以及血清TNF-α、IL-6、CircZNF652表达水平均是哮喘患儿急性发作的影响因素(均P<0.05)。结论哮喘患儿血清CircZNF652表达水平上调,并与哮喘急性发作有关,且与肺功能指标呈负相关,与血清TNF-α及IL-6表达水平呈正相关。检测血清CircZNF652表达水平有助于儿童哮喘的病情判定。

东方田鼠血清筛选噬菌体展示抗原对小鼠日本血吸虫病免疫效果观察

本研究利用前期研究中东方田鼠血清筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库获得的10个阳性克隆中的8个噬菌体克隆单独或联合免疫BALB/c小鼠,观察对日本血吸虫病的免疫预防效果,以筛选其中具有发展成疫苗的候选抗原编码基因。研究发现与空白对照组相比,展示血吸虫锌指蛋白的1号噬菌体克隆免疫组在两次实验中分别获得了32.10%和31.25%的减虫率、61.14%和47.31%的肝脏减卵率,虫体合抱率分别由92.59%、57.39%下降到69.09%、41.03%;其它噬菌体克隆单独免疫组或联合免疫组在第一次实验中均获得了8.02%～32.72%的减虫率和40.19%～69.53%的减卵率,但在第二次实验中未能得到验证。研究结果提示,日本血吸虫环状锌指蛋白(1号克隆)编码基因在疫苗方面具有重要研究价值。

circZFR促进HT29和LOVO细胞增殖和迁移

目的研究环状RNA锌指样RNA结合蛋白(circular RNA zinc finger RNA binding protein,circZFR)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织及细胞系中表达及其对HT29和LOVO细胞增殖和迁移能力的影响。方法应用GEO2R软件分析circZFR在Gene Expression Omnibus (GEO)数据库中结直肠癌相关数据集GSE126094及GSE147597中的表达;实时荧光定量PCR检测circZFR在收集的50例结直肠癌组织样本以及其在结直肠癌细胞系中的表达;在HT29和LOVO细胞中转染circZFR特异性短发夹RNA (short hairping RNA,shRNA),同步转染对照(negativecontrolshRNA,shNC),RT-qPCR验证转染效率;克隆形成实验(colonyformation assay)及Transwell实验(transwell assay)检测不同circZFR表达水平对HT29和LOVO细胞增殖及迁移能力的影响。结果在GSE126094中,circZFR在结肠癌组织中的表达明显高于其在正常结直肠组织中的表达;在GSE147597中,circZFR在合并肝转移的结直肠癌组织中表达高于无肝转移的结直肠癌组织;circZFR在收集的结直肠癌组织中的表达大部分(44/50,88.00%)高于相应的癌旁组织;相比于正常肠上皮细胞系NCM460,circZFR在结直肠癌细胞系中的表达升高;在HT29和LOVO细胞中转染circZFR siRNA后,circZFR的表达水平明显下调;下调circZFR的表达可明显抑制HT29和LOVO细胞的增殖和迁移能力。结论 circZFR在结直肠癌组织及细胞系中表达增高,在HT29和LOVO细胞中下调circZFR的表达可明显抑制细胞的增殖及迁移能力。