子痫前期患者血清环状RNA HIPK3水平变化及其对妊娠结局的预测效能

目的观察子痫前期(PE)患者血清环状RNA HIPK3水平变化,并分析HIPK3对PE患者妊娠结局的预测价值。方法选择PE患者95例为PE组,另选同期入院孕检的健康孕妇95例为对照组。采用qRT-PCR法检测两组血清HIPK3,比较PE组、对照组的妊娠结局;分析血清HIPK3水平与PE患者临床参数的相关性,分析PE患者妊娠结局的影响因素及血清HIPK3对PE患者妊娠结局的预测效能。结果PE组患者血清HIPK3水平及白蛋白、总蛋白水平低于对照组,24 h尿蛋白、舒张压、收缩压、肌酐、尿酸、胱抑素C、尿素氮水平及HELLP综合征、产后出血、胎盘早剥、胎儿窘迫、早产、胎儿生长受限、胎儿死亡发生率高于对照组(P均<0.05)。PE患者血清HIPK3水平与白蛋白、总蛋白水平呈正相关(r分别为0.567、0.581,P均<0.05),与24 h尿蛋白、舒张压、收缩压、胱抑素C水平呈负相关(r分别为-0.543、-0.497、-0.595、-0.532,P均<0.05)。妊娠结局不良者的重度PE患者占比、收缩压、胱抑素C水平高于妊娠结局良好者,血清HIPK3水平低于妊娠结局良好者(P均<0.05)。重度PE、收缩压是PE患者不良妊娠结局的危险因素,HIPK3是PE患者不良妊娠结局的保护因素(P均<0.05)。血清HIPK3预测PE患者不良妊娠结局的受试者工作特征曲线下面积为0.889,截断值为0.40,灵敏度为81.6%,特异度为84.2%。结论PE患者血清HIPK3水平降低,与患者收缩压、肌酐、胱抑素C等临床指标相关;检测血清HIPK3有助于预测PE患者的妊娠结局。

CircHIPK3在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系

研究环状RNA HIPK3(CircHIPK3)在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法 纳入2020年12月至2022年10月蚌埠医学院第一附属医院收治的88例乳腺癌患者为研究对象,纳入乳腺癌组,并选取同期于我院治疗40例经确诊为乳腺良性肿瘤的患者(乳腺纤维瘤患者)为对照组。分别采用实时荧光定量RT-PCR法和免疫组化法检测CircHIPK3在乳腺癌和乳腺纤维瘤组织中的表达情况。并收集乳腺癌组患者一般资料,包括肿瘤分化程度、TNM分期、病理学类型、是否淋巴结转移及月经状态等信息。分析乳腺癌患者乳腺癌组织中CircHIPK3的表达与临床病理特征之间的关系。结果 乳腺癌组织CircHIPK3阳性检出率显著高于乳腺纤维瘤组织,差异有统计学意义(P<0.05),且乳腺癌组CircHIPK3表达水平显著高于对照组(P<0.05)。不同年龄、身体质量指数、肿瘤大小、病理学类型、淋巴结转移及月经状态的乳腺癌患者CircHIPK3阳性检出率对比差异无统计学意义(P>0.05);不同肿瘤分化程度、TNM分期患者CircHIPK3阳性检出率存在显著差异(P<0.05)。结论 circHIPK3在乳腺癌组织中呈现高表达,且circHIPK3表达与乳腺癌肿瘤分化程度及TNM分期相关,circRNA有望作为乳腺癌治疗的新靶点。

circHIPK3通过调控miR-124-3p/EZH2促进食管鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为

目的探讨circHIPK3对食管鳞状细胞癌细胞增殖与迁移的影响及其机制。方法采用qRT-PCR法检测circHIPK3在42对食管鳞状细胞癌组织和配对癌旁组织以及食管鳞状细胞癌细胞KYSE-410和KYSE-510与人食管上皮细胞HET-1A中的表达;采用shRNA慢病毒干扰circHIPK3表达;采用CCK-8法、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验分别检测细胞增殖率、凋亡率、迁移和侵袭能力;采用qRT-PCR和Western blot法检测miR-124-3p和EZH2的表达;荧光素酶报告基因实验检测circHIPK3与miR-124-3p的结合。结果circHIPK3在食管鳞状细胞癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.001),circHIPK3在食管鳞状细胞KYSE-410(P=0.017)和KYSE-510(P=0.008)的表达高于食管上皮细胞HET-1A;敲低circHIPK3表达后,KYSE-410和KYSE-510细胞的增殖、迁移及侵袭受到显著抑制(P均<0.05),而早期凋亡细胞比例显著上调(P=0.007、0.009);敲低circHIPK3后,KYSE-510细胞中miR-124-3p表达水平上调(P=0.016),EZH2 mRNA(P=0.004)和蛋白表达水平下调;此外,荧光素酶报告基因实验显示,circHIPK3与miR-124-3p具有直接结合作用。结论circHIPK3在食管鳞状细胞癌中高表达,敲低circHIPK3可抑制食管鳞状细胞癌细胞增殖与迁移,其机制可能与调控miR-124-3p/EZH2分子轴相关。

CircHIPK3低表达调控miR-124/STAT3轴抑制Aβ诱导的海马神经元凋亡的机制研究

目的探讨环状RNA同源域相互作用蛋白激酶3(circ HIPK3)低表达对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元凋亡的影响。方法采用生物信息学软件预测和双荧光素酶报告基因实验验证微小RNA-124(mi R-124)与HIPK3、信号转导和转录激活因子3(STAT3)的靶向关系;将体外培养的原代海马神经元分为对照组(正常培养)、Aβ组(给予Aβ刺激)、Aβ+si STAT3-NC组(转染si STAT3-NC后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3组(转染si HIPK3后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3+antimi R-NC组(共转染si HIPK3和inhibitor-NC后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3+antimi R-124组(共转染si HIPK3和mi R-124 inhibitor后给予Aβ刺激)、Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3-NC组(共转染si HIPK3、mi R-124 inhibitor和si STAT3-NC后给予Aβ刺激)和Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3组(共转染si HIPK3、mi R-124 inhibitor和si STAT3后给予Aβ刺激)。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测HIPK3和mi R-124表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测STAT3蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测海马神经元存活率和凋亡率,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性检测试剂盒检测Caspase-3活性。结果生物信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验证实HIPK3可与mi R-124靶向结合;生物信息学软件预测、双荧光素酶报告基因实验和Western blot实验证实,mi R-124可靶向调控STAT3蛋白表达。与对照组比较,Aβ组海马神经元中HIPK3表达水平、STAT3蛋白表达水平、凋亡率和Caspase-3活性明显升高,而海马神经元存活率和mi R-124表达水平明显降低(P<0.05);与Aβ+si HIPK3-NC组比较,Aβ+si HIPK3组中上述各指标明显逆转(P<0.05);与Aβ+si HIPK3+antimi R-NC组比较,Aβ+si HIPK3+antimi R-124组中各指标呈明显变化(P<0.05),且趋势与Aβ+si HIPK3组相反;与Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3-NC组比较,Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3组中各指标呈明显变化(P<0.05),且趋势与Aβ+si HIPK3+antimi R-124组相反;而Aβ组与Aβ+si HIPK3-NC组之间、Aβ+si HIPK3组与Aβ+si HIPK3+antimi R-NC组之间以及Aβ+si HIPK3+antimi R-124组与Aβ+si HIPK3+antimi R-124+si STAT3-NC组之间各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论Circ HIPK3低表达可抑制Aβ诱导的海马神经元凋亡,其作用机制与调控mi R-124/STAT3轴有关。