CircRNA锌指RNA结合蛋白在恶性肿瘤中作用研究进展

环状RNA是一类具有特殊共价闭合环状结构的RNA分子,环状RNA锌指核糖核酸结合蛋白(circRNA⁃ZFR)在诸多恶性肿瘤中呈异常表达,并且其表达水平与肿瘤临床分期、癌细胞转移及患者预后密切相关;circRNA⁃ZFR可通过内源竞争性吸附miRNA、调节细胞周期、激活多种信号通路等机制参与调控肿瘤的发生发展。深入研究circRNA⁃ZFR在恶性肿瘤中的表达及作用机制有助于相关肿瘤的早期诊断、靶向治疗和患者预后评估。

哮喘患儿血清CircZNF652的表达水平及其临床意义

目的探讨哮喘患儿血清环状RNA锌指蛋白652(CircZNF652)的表达水平及其临床意义。方法选取105例哮喘患儿作为观察组,根据临床表现将其分为急性发作期组(57例)和慢性缓解期组(48例),另选取80例健康儿童作为对照组。比较观察组与对照组之间、急性发作期组和慢性缓解期组之间的血清CircZNF652、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的表达水平,以及肺功能指标[1秒用力呼气容积(FEV_(1))、呼气峰值流速(PEF)、FEV_(1)/用力肺活量(FVC)值]。采用Pearson检验分析观察组血清CircZNF652表达水平与肺功能指标及血清TNF-α、IL-6表达水平的相关性。绘制受试者工作特征曲线分析血清CircZNF652表达水平对儿童哮喘的诊断价值。采用多因素Logistic回归模型分析儿童哮喘急性发作的影响因素。结果观察组FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值均低于对照组,而血清CircZNF652、TNF-α、IL-6表达水平均高于对照组(均P<0.05);急性发作期组FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值均低于慢性缓解期组,而血清CircZNF652、TNF-α、IL-6表达水平均高于慢性缓解期组(均P<0.05)。观察组血清CircZNF652表达水平与FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值均呈负相关,与血清TNF-α、IL-6表达水平均呈正相关(均P<0.05)。血清CircZNF652表达水平诊断儿童哮喘的曲线下面积为0.741,灵敏度和特异度分别为75.24%、67.50%,最优截断值为1.12。FEV_(1)、PEF、FEV_(1)/FVC值,以及血清TNF-α、IL-6、CircZNF652表达水平均是哮喘患儿急性发作的影响因素(均P<0.05)。结论哮喘患儿血清CircZNF652表达水平上调,并与哮喘急性发作有关,且与肺功能指标呈负相关,与血清TNF-α及IL-6表达水平呈正相关。检测血清CircZNF652表达水平有助于儿童哮喘的病情判定。

锌指核糖核酸结合蛋白在恶性肿瘤相关研究中的进展

锌指核糖核酸结合蛋白(ZFR)是一种古老的蛋白质。ZFR结构特殊,在原核生物中分布广泛。近年来,ZFR相关研究证实了ZFR是在各种恶性肿瘤中发挥作用的关键基因,其参与了恶性肿瘤的发生、进展和免疫应答等。在结直肠癌、肝细胞肝癌以及胰腺导管腺癌中,ZFR已经被鉴定为癌症候选驱动基因。本研究对ZFR与恶性肿瘤关系的相关研究进展进行综述,分析ZFR过表达在各类癌症的恶性进展和转移扩散中的作用机制。

环状RNA-ZNF292对缺氧缺血性脑损伤细胞氧化及凋亡的影响

目的建立原代神经元缺氧缺血性脑损伤细胞模型,探讨环状RNA-ZNF292(cZNF292)对脑缺血损伤后神经元氧化应激及凋亡的影响。方法选取胎龄为18 d的胎鼠培养原代神经元,采用4、10 mmol/L Na_(2)S_(2)O_(4)和无糖培养基处理细胞1、2、3、4 h后复氧培养0、5、15、30 h,建立氧糖剥夺/复氧细胞模型。通过细胞骨架蛋白和β3-微管蛋白免疫荧光染色观察原代神经元的形态变化,FITC标记鬼笔环肽染色观察不同浓度Na_(2)S_(2)O_(4)对原代神经元存活率的影响。采用ELISA检测培养上清液中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的表达水平。采用蛋白质印迹法检测细胞中caspase 3及细胞周期蛋白G1(CCNG1)的表达水平。结果成功建立缺氧缺血性脑损伤细胞模型和cZNF292敲减细胞模型,并发现缺氧培养4 h时复氧、10 mmol/L的Na_(2)S_(2)O_(4)对原代神经元的生长抑制率最高,且在复氧培养15 h时细胞中cZNF292表达水平最高,因此选择缺氧培养4 h、复氧培养15 h、10 mmol/L Na_(2)S_(2)O_(4)为最佳实验条件。氧糖剥夺使细胞培养基中ROS和MDA水平上升,SOD和LDH水平下降(P均<0.05);而敲减cZNF292后,细胞培养基中ROS和MDA水平下降,SOD和LDH水平上升(P均<0.05)。敲减cZNF292可使caspase 3和CCNG1表达下降(P均<0.05)。结论脑缺血可以诱导原代神经元cZNF292表达增加,而敲减cZNF292可以缓解原代神经元在缺血缺氧环境下发生的氧化损伤、抑制细胞凋亡及增殖。

CRISPR/Cas9技术在感染性疾病中的应用

成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9〕是一种新兴的基因编辑技术,与以前的三大基因编辑技术——归巢核酸内切酶、锌指核酸酶和转录激活因子样效应物核酸酶技术相比,其在靶向特异性、操作简便性、治疗彻底性、应用广泛性等方面具有更大的优势和发展潜力。艾滋病、乙型肝炎、疟疾等感染性疾病的治疗一直是医学上的重大难题,科学家正努力尝试利用CRISPR/Cas9技术解决这些医学难题。本文主要综述了CRISPR/Cas9技术在这些感染性疾病中应用的研究进展。

circZFR促进HT29和LOVO细胞增殖和迁移

目的研究环状RNA锌指样RNA结合蛋白(circular RNA zinc finger RNA binding protein,circZFR)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织及细胞系中表达及其对HT29和LOVO细胞增殖和迁移能力的影响。方法应用GEO2R软件分析circZFR在Gene Expression Omnibus (GEO)数据库中结直肠癌相关数据集GSE126094及GSE147597中的表达;实时荧光定量PCR检测circZFR在收集的50例结直肠癌组织样本以及其在结直肠癌细胞系中的表达;在HT29和LOVO细胞中转染circZFR特异性短发夹RNA (short hairping RNA,shRNA),同步转染对照(negativecontrolshRNA,shNC),RT-qPCR验证转染效率;克隆形成实验(colonyformation assay)及Transwell实验(transwell assay)检测不同circZFR表达水平对HT29和LOVO细胞增殖及迁移能力的影响。结果在GSE126094中,circZFR在结肠癌组织中的表达明显高于其在正常结直肠组织中的表达;在GSE147597中,circZFR在合并肝转移的结直肠癌组织中表达高于无肝转移的结直肠癌组织;circZFR在收集的结直肠癌组织中的表达大部分(44/50,88.00%)高于相应的癌旁组织;相比于正常肠上皮细胞系NCM460,circZFR在结直肠癌细胞系中的表达升高;在HT29和LOVO细胞中转染circZFR siRNA后,circZFR的表达水平明显下调;下调circZFR的表达可明显抑制HT29和LOVO细胞的增殖和迁移能力。结论 circZFR在结直肠癌组织及细胞系中表达增高,在HT29和LOVO细胞中下调circZFR的表达可明显抑制细胞的增殖及迁移能力。