二肽类药物甘氨酰谷氨酰胺有关物质检测方法的研究

目的建立二肽类药物甘氨酰谷氨酰胺有关物质检测方法,为甘氨酰谷氨酰胺的质量控制以及工艺评价提供有效的方法。方法采用Kromsial NH2(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以0.01 mol.L-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值至2.5)-乙腈(40∶60)为流动相,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为215 nm。结果所建立的高效液相色谱检测方法能分离各组分,具有较好的精密度、准确度和稳定性。结论采用高效液相色谱检测方法简单,精密度好,准确度高,可用于甘氨酰谷氨酰胺中环(甘氨酰-谷氨酰胺)、L-焦谷氨酸、甘氨酰甘氨酰谷氨酰胺、甘氨酰谷氨酸四种已知杂质和未知杂质的质量控制和工艺评价。

甘氨酰-谷氨酰胺双肽中有关物质的影响因素考察

目的 考察温度、加热时间及pH对甘氨酰-谷氨酰胺（Gly-Gln）双肽有关物质的影响,为确定其合理的制剂生产工艺与储存条件提供参考.方法 配制与市售制剂相同浓度的Gly-Gln溶液,将pH分别为4、5、6、7、8、9的供试品溶液分别置80℃、100℃、115℃、121℃下加热,在预设的时间点取样,采用HPLC法测定其有关物质焦谷氨酸、环甘氨酰-谷氨酰胺的含量.结果 Gly-Gln双肽在弱酸性（pH5 ～6）中较其在弱碱性（pH8 ～9）溶液中更稳定;在各pH条件下,随着温度升高、加热时间延长,有关物质含量均显著增加.结论 温度、加热时间及pH对Gly-Gln双肽的稳定性具有显著影响,最适宜的pH应为5～6.

HPLC法测定复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中3种杂质含量

目的:建立同时测定复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中焦谷氨酸、环(甘氨酰-谷氨酰胺)和环(甘氨酰-酪氨酸)等杂质含量的HPLC法。方法:使用Agela venusil ASB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.01 mol·L^(-1)磷酸氢二铵溶液(用磷酸调节pH至1.6)-甲醇(90:10),流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长为205 nm;柱温为35℃;进样量为50μl。结果:焦谷氨酸、环(甘氨酰-谷氨酰胺)和环(甘氨酰-酪氨酸)浓度分别在29.47～589.37(r=0.999 7),47.94～958.82(r=0.999 8)和4.84～96.9 mg·L^(-1)(r=0.999 8)范围内线性关系良好,r值分别为0.999 7,0.999 8,0.999 8。检出限分别为1.47,2.49和0.29 ng,平均回收率分别为99.6%,99.9%和100.6%。结论:本方法简便、准确,可用于复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中焦谷氨酸、环(甘氨酰-谷氨酰胺)和环(甘氨酰-酪氨酸)含量的快速分析。

HPLC法测定复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中有关物质的含量

目的:建立测定复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中有关物质含量的高效液相色谱法。方法:采用Ultimate AQ-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.01 mol·L^(-1)磷酸氢二铵溶液(pH 2.0)-甲醇(98∶2)为流动相,流速为0.7 mL·min^(-1),检测波长为205 nm,进样量为50μL。结果:在选定的色谱条件下,环-(甘氨酰谷氨酰胺)峰、焦谷氨酸峰和环-(甘氨酰酪氨酸)峰与各自相邻色谱峰可以有效分离;环-(甘氨酰谷氨酰胺)、焦谷氨酸、环-(甘氨酰酪氨酸)分别在7.863～52.42μg·mL^(-1)、5.256～35.04μg·mL^(-1)、0.939 3～6.262μg·mL^(-1)的范围内线性关系良好(r=0.999 9);精密度试验的RSD值均小于0.2%;重复性试验的RSD值均小于2.0%;环-(甘氨酰谷氨酰胺)、焦谷氨酸和环-(甘氨酰酪氨酸)定量限分别为3.15、14.0和7.5 ng,检测限分别为0.95、7.0和2.5 ng;加样回收率分别为103.0%、101.5%和103.3%(n=9),RSD值分别为1.0%、0.9%和0.9%。9批样品环-(甘氨酰谷氨酰胺)的量为383～492 mg·L^(-1),焦谷氨酸的量为191～315 mg·L^(-1),环-(甘氨酰酪氨酸)的量为39～49 mg·L^(-1)。结论:该方法专属性强,结果准确,可用于复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中有关物质的测定,能有效地反应药品质量。

高效液相色谱法测定复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中2种杂质的含量测定

目的：建立同时测定复方氨基酸（15）双肽（2）注射液中焦谷氨酸和环（甘氨酰-谷氨酰胺）含量的HPLC方法。方法：使用Aglient ZORBAX SB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为0.01 mol·L^-1磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节pH至1.6）,流速为1.0 mL·min^-1;紫外检测波长为205 nm;柱温为15℃;进样量为50μL。结果：焦谷氨酸和环（甘氨酰-谷氨酰胺）浓度分别在25.15-503.0 mgL·L^-1和40.1-802.0 mg·L^-1范围内线性关系良好,最低检测限（S/N=3）分别为75.45 ng和40.1 ng,平均回收率分别为100.9%和100.8%。结论：本方法用于复方氨基酸注射液中焦谷氨酸和环（甘氨酰-谷氨酰胺）含量的快速分析,方法简便、准确。