扶金化积丸对环磷酰胺治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠的化疗增敏作用及机制

目的探讨扶金化积丸对环磷酰胺治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠化疗增敏的作用及机制。方法选取健康C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌瘤株造模。小鼠随机分成正常组、荷瘤对照组、扶金化积丸组、环磷酰胺组、扶金化积丸+环磷酰胺组。各组药物干预后,检测荷瘤小鼠瘤重、瘤体体积、计算抑瘤率及器官指数。全自动血液分析仪进行血细胞计数及血红蛋白浓度检测。酶联免疫吸附试验检测血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素2、γ干扰素的含量。苏木素-伊红染色观察瘤组织病理学改变。免疫组化法检测基质金属蛋白酶9、核因子κB的表达。结果与环磷酰胺组比较,扶金化积丸+环磷酰胺组瘤瘤重、瘤体体积显著减小(P<0.05);脾脏、胸腺指数显著增大(P<0.001);红细胞、白细胞、血小板数目及血红蛋白浓度均显著升高(P<0.01,P<0.001);肿瘤坏死因子-α及白细胞介素2含量均显著升高(P<0.05,P<0.001);瘤组织核固缩较多,有明显坏死及出血现象,出现细胞凋亡;基质金属蛋白酶9、核因子κB表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论扶金化积丸可增强环磷酰胺对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,其机制与增强机体免疫有关。

补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用

背景:补骨脂素具有很强的抗骨质疏松活性,可能对化疗导致的骨质疏松具有恢复作用。目的:探讨补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用及机制。方法:分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,以MTT法检测补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力的影响,以成骨诱导结合碱性磷酸酶染色确定补骨脂素对环磷酰胺抑制骨髓间充质干细胞成骨分化恢复作用的最佳剂量。采用RT-qPCR法检测补骨脂素干预不同时间点成骨分化标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素及Wnt/β-catenin信号通路相关基因Wnt1、Wnt4、Wnt10b、β-catenin、c-MYC的mRNA表达;采用Western blot法检测补骨脂素干预不同时间点成骨特异性转录因子Runx2及Wnt/β-catenin信号通路相关基因Activeβ-catenin、DKK1、c-MYC、Cyclin D1的蛋白表达。结果与结论:(1)不同浓度补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力没有显著影响;200μmol/L补骨脂素干预后对环磷酰胺诱导骨髓间充质干细胞成骨分化抑制的恢复作用最佳;(2)补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞成骨标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素mRNA表达和Runx2蛋白表达的降低;(3)补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin通路相关基因Wnt4、β-catenin、c-MYC mRNA表达和Activeβ-catenin、c-MYC、Cyclin D1蛋白表达的降低以及DKK1蛋白表达的升高;(4)结果表明,环磷酰胺能抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,补骨脂素对其具有恢复作用,且200μmol/L补骨脂素干预效果最佳,而这种保护作用可能与补骨脂素激活Wnt4/β-catenin信号通路有关。

通消阳和颗粒联合环磷酰胺对4T1乳腺癌荷瘤小鼠移植瘤的影响

目的:观察通消阳和颗粒联合环磷酰胺对4T1乳腺癌荷瘤小鼠的作用。方法:选取BALB/c雌性小鼠建立4T1乳腺癌荷瘤模型,随机分成模型组、通消阳和颗粒组(颗粒组)、通消阳和颗粒^(+)环磷酰胺组(联合组)及环磷酰胺组,每组8只,另选取8只作为空白组。监测各组荷瘤小鼠肿瘤生长情况,绘制乳腺肿瘤时间-生长曲线;计算各组小鼠肿瘤抑制率;检测外周血白细胞计数及中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的比例;测定肝、肾功能的生化指标;检测脾脏免疫细胞数量及CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞比例;培养各组小鼠肺、脑、肝及外周血细胞,用于检测肿瘤细胞远处器官转移情况。结果:与模型组相比,联合组小鼠移植瘤增长速度最缓慢(P<0.01),抑瘤率最高(P<0.01),白细胞计数显著降低(P<0.01);与环磷酰胺组相比,联合组小鼠淋巴细胞比例明显升高(P<0.01),中性粒细胞及单核细胞比例降低,差异有统计学意义(P<0.01),肝肾功能指标正常,无早期损害,T、B淋巴细胞升高、MDSCs细胞降低及CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞比例升高,差异有统计学意义(P<0.05),乳腺癌细胞无远处器官转移情况。结论:通消阳和颗粒联合环磷酰胺可显著抑制乳腺癌荷瘤小鼠移植瘤生长;通消阳和颗粒可以减少环磷酰胺所致的小鼠肝肾功能损害、免疫功能减低等毒性反应,联合环磷酰胺可以明显提高乳腺癌小鼠的免疫功能并抑制肿瘤细胞的远处转移。

来氟米特联合环磷酰胺对狼疮性肾炎患者血清白蛋白及补体C3水平的影响

目的探讨狼疮性肾炎(LN)患者应用来氟米特联合环磷酰胺治疗的临床效果。方法选择2019年4月至2021年4月九江市第一人民医院收治的84例LN患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为观察组(42例)及对照组(42例)。两组均予以泼尼松治疗,观察组同时给予环磷酰胺加用来氟米特治疗,对照组同时给予环磷酰胺治疗。两组均持续用药6个月。比较两组的临床疗效、肾功能指标、血清白蛋白和补体C3水平,并记录不良反应发生情况。结果观察组的治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后的血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、24 h尿蛋白量水平均低于对照组,血清白蛋白、补体C3水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组的不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论来氟米特联合环磷酰胺治疗LN效果显著,可有效提高血清白蛋白和补体C3水平,促进肾功能恢复,减轻肾功能损害,缓解临床症状,稳定病情,值得推广应用。

来那度胺与环磷酰胺治疗多发性骨髓瘤患者的效果比较

目的:比较来那度胺与环磷酰胺治疗多发性骨髓瘤患者的效果。方法:回顾性分析2019—2022年该院收治的112例多发性骨髓瘤患者的临床资料,根据治疗方法不同将其分为对照组(n=53)与研究组(n=59)。两组均给予硼替佐米、地塞米松治疗,在此基础上,对照组联合环磷酰胺治疗,研究组联合来那度胺治疗。比较两组临床疗效、不良反应发生率及治疗成本。结果:研究组高质量缓解率为62.71%(37/59),高于对照组的35.85%(19/53),差异有统计学意义(P<0.05);两组总缓解率比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);研究组总成本、成本-效果均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在硼替佐米、地塞米松治疗基础上采用来那度胺治疗多发性骨髓瘤患者可提高高质量缓解率的效果优于环磷酰胺治疗,但需增加治疗成本。

鱼鳔与驴皮的化学成分及对环磷酰胺所致贫血小鼠的改善作用

目的:研究鱼鳔、驴皮化学成分及对环磷酰胺所致贫血小鼠的改善作用。方法:测定总蛋白含量、氨基酸组成及分子量范围;胃蛋白酶辅助提取获得胶原蛋白,并分析其含量、组成及结构;腹腔注射环磷酰胺(80 mg/kg)建立小鼠贫血模型,灌胃给予受试物(鱼鳔胶1.52 g/(kg·d)、驴皮胶1.39 g/(kg·d)),观察对脏器系数和血液学指标的影响。结果:鱼鳔、驴皮总蛋白含量均大于97%,鱼鳔胶、驴皮胶分子量在50 Da~328 kDa之间;鱼鳔、驴皮胶原蛋白均为Ⅰ型胶原蛋白,鱼鳔胶原蛋白含量约为驴皮的6.51倍,但胶原蛋白三螺旋结构不同,鱼鳔胶原蛋白以α-螺旋结构为主,驴皮胶原蛋白以反平行为主。功效评价结果表明,给药28 d,鱼鳔胶与驴皮胶均可促进环磷酰胺贫血小鼠造血机能的恢复,以鱼鳔胶效果更佳。与模型组相比,鱼鳔胶给药组红细胞、血红蛋白、血小板、网织红细胞、脾脏及胸腺系数均得到显著改善(P<0.05);驴皮胶给药组红细胞、血红蛋白及胸腺系数显著改善(P<0.05)。结论:对鱼鳔、驴皮化学成分进行系统研究,确定了化学成分间的差异;发现鱼鳔胶、驴皮胶均可促进环磷酰胺贫血小鼠造血机能的恢复,且鱼鳔胶效果更佳,推测二者补血活性可能与氨基酸、胶原蛋白等成分有关。本研究为鱼鳔资源精深加工奠定理论基础。

环磷酰胺联合泼尼松在系统性红斑狼疮治疗中的疗效及安全性分析

评估环磷酰胺联合泼尼松在系统性红斑狼疮(SLE)治疗中的疗效和安全性。方法 选取我院近三年内接诊的100例SLE患者,随机分为A组(接受环磷酰胺联合泼尼松治疗)和B组(接受单独泼尼松治疗),各50例。治疗结束后,观察各项评估指标的变化情况。结果 A组治疗总有效率明显高于B组(p<0.05)。临床指标方面,两组治疗后免疫球蛋白和补体C3、C4水平等均有所改善,其中A组改善更明显(p<0.05);治疗后,A组患者的SLEDAI评分明显降低,而B组的降幅较小(P<0.05)。此外,A组较B组更少出现不良反应(p<0.05)。结论 本研究使用的联合治疗方案在SLE治疗中具有较好的疗效和安全性。与单独治疗方案相比,联合治疗方案能够提高治疗总有效率,促进临床相关指标的恢复,并降低不适症状的发生。

多糖的精制及环磷酰胺减毒增效机制研究进展

环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)在抗癌化疗过程中伴随骨髓抑制、肠黏膜损伤等毒副作用,严重影响患者治疗的耐受性及预后。近年来,多糖因其抗癌、抗炎症及免疫调节等实际应用价值被作为抗肿瘤药物的减毒增效辅剂。本文系统总结多糖精制技术,并从免疫调节、抗氧化以及肠道、肝肾、生殖系统保护多角度阐述其对CTX的减毒机制,论述多糖通过直接或间接杀伤肿瘤与CTX发挥的协同增效作用。从减毒和增效两方面归纳多糖在癌症化疗过程中的调控途径,旨在为多糖的减毒增效相关机制研究提供借鉴,同时为CTX毒副作用的改善途径提供新方向。

金耳多糖的结构及其对环磷酰胺致小鼠肠道菌群紊乱的调节作用

【目的】研究金耳多糖(Tremella aurantialba polysaccharide,TAP)对小鼠体内肠道菌群紊乱的影响。【方法】以金耳为原料提取TAP,采用凝胶色谱法、高效液相色谱法、红外光谱、紫外光谱分析TAP的结构,再基于环磷酰胺诱导肠道菌群紊乱的小鼠为模型,使用TAP进行干预,采用气相色谱—质谱法(GCMS)测量小鼠结肠内容物短链脂肪酸水平,采用粪便16S rRNA法分析小鼠粪便肠道菌群变化。【结果】TAP分子质量为1740 ku,为含有β-型糖苷键的吡喃型多糖,含微量蛋白质及核酸,主要由甘露糖、葡萄糖醛酸和葡萄糖3类单糖组成,占比分别为66.09%、9.51%和11.45%。动物试验表明:TAP处理能增加小鼠结肠内容物的短链脂肪酸含量,特别是乙酸和丁酸。粪便16S rRNA表明:TAP能够逆转肠道菌群紊乱,在门水平上,上调拟杆菌门(Bacteroidetes)菌群,下调厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)菌群;在属水平上,上调拟杆菌属(Bacteroides)和乳杆菌属(Lactobacillus)菌群,下调螺杆菌属(Helicobacter)菌群。【结论】TAP有望作为一种潜在益生元调节肠道菌群,减少环磷酰胺对肠道微生物群的副作用。

基于移植后环磷酰胺的移植物抗宿主病预防方案在地中海贫血患儿单倍体造血干细胞移植中的应用效果

目的探讨基于移植后环磷酰胺(PTCy)的移植物抗宿主病(GVHD)预防方案在地中海贫血患儿单倍体造血干细胞移植中的应用效果。方法回顾性分析28例接受单倍体造血干细胞移植的地中海贫血患儿的临床资料。所有患儿均接受白消安+环磷酰胺+氟达拉滨+抗人胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)联合PTCy+吗替麦考酚酯+环孢素方案以预防GVHD。评估患儿的植入效果、GVHD发生情况、感染及死亡情况、总体生存率及无事件生存率。结果(1)28例患儿的移植物CD34^(+)细胞数、总有核细胞数、单个核细胞数中位值分别为11.2×10^(6)/kg、17.6×10^(8)/kg、5.1×10^(8)/kg,植入成功率为100%,粒系植入和巨核系植入的中位时间分别为14 d和24 d,植入功能不良发生率为7.1%。(2)GVHD的发生率为28.5%,其中Ⅰ~Ⅱ型、Ⅲ~Ⅳ型急性GVHD的发生率分别为7.1%、14.3%,慢性GVHD的发生率为7.1%。(3)巨细胞病毒感染、Epstein-Barr病毒感染、真菌感染的发生率分别为64.3%、10.7%、21.4%,共死亡2例(7.1%),患儿的3年总生存率和3年无事件生存率均为92.9%。结论在地中海贫血患儿行单倍体造血干细胞移植时,白消安+环磷酰胺+氟达拉滨+ATG联合PTCy+吗替麦考酚酯+环孢素方案是一个安全性较高,能有效降低移植后GVHD发生率且不影响植入效果的选择。但移植后感染等并发症依然是临床上面临的严峻问题,需要继续探索更为优化的方案。

优化环磷酰胺剂量在间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征啮齿动物模型中的应用

目的:评估不同剂量的环磷酰胺(cyclophosphamide, CYP)诱导的间质性膀胱炎/膀胱痛综合征(interstitial cystitis/bladder pain syndrome, IC/BPS)动物模型模拟疾病症状的准确性与可重复性,以期为IC/BPS的病理生理学研究和治疗策略评估提供实验模型依据。方法:选用7周龄的Sprague-Dawley雌性大鼠28只分为a组(25 mg/kg CYP)、b组(75 mg/kg CYP)、c组(125 mg/kg CYP)和d组(对照组)4组,每组7只,通过腹腔注射CYP或生理盐水建立动物模型,评估指标包括尿斑实验、von Frey纤维触痛实验、尿动力学检查,以及组织学分析。结果:25 mg/kg CYP剂量的大鼠在模拟IC/BPS膀胱功能障碍和炎症反应方面显著优于其他CYP剂量组,且对生理功能影响较小。所有剂量CYP处理的大鼠都表现出膀胱炎症,但25 mg/kg剂量的症状与IC/BPS临床特征更为一致。此外,25 mg/kg CYP剂量组大鼠膀胱顺应性降低,内脏疼痛增加,但未显著增加排尿频率,与IC/BPS患者表现相似。结论:25 mg/kg的CYP剂量在模拟非溃疡性IC/BPS的关键特征方面表现出明显的优势,对未来IC/BPS的研究和治疗策略提供了重要参考。但尽管如此,由于IC/BPS的多因素性质,未来研究需要探索更多诱导手段,以复现疾病的复杂病理过程。

表柔比星联合环磷酰胺致2级间质性肺病1例

目的:为肿瘤患者安全使用表柔比星联合环磷酰胺治疗(即EC方案)提供参考。方法:临床药师参与1例罕见EC方案致CTCAE(common terminology criteria for adverse events,不良事件通用术语标准)评价为2级间质性肺病患者的救治,并检索PubMed、Elsevier Science Direct、中国知网、万方等数据库查阅表柔比星、环磷酰胺致肺病案例,分析患者不良反应特点及治疗经过。结果:临床药师参考文献资料,建议医师暂停患者全身化疗,并经呼吸科专家会诊,给予泼尼松治疗,患者间质性肺病缓解。结论:临床药师应对恶性肿瘤患者加强药学监护,及时发现药物导致的不良反应,并参考文献资料,提出合理化建议,保障患者用药安全、有效。

尼达尼布治疗环磷酰胺致间质性肺炎的药学监护

目的 探讨环磷酰胺所致间质性肺炎的药品不良反应识别,及尼达尼布治疗的药学监护。方法 临床药师协助医师对1例淋巴瘤合并类固醇性糖尿病患者出现间质性肺炎后进行药物相关性判断、可疑药物识别,并对激素治疗受限时应用尼达尼布进行用药教育、药学监护和长期随访。结果 经过停用可疑药物、使用激素联合抗纤维化药物治疗后,患者症状好转,间质性肺炎范围逐渐缩小,病情稳定。结论 临床药师协助医师及时识别、处理药品不良反应,并参与患者用药全程管理,可保障患者用药的安全性和有效性。

环磷酰胺不同剂量及停药周期构建小鼠卵巢早衰动物模型比较研究

目的比较环磷酰胺(CTX)不同剂量和停药周期构建的小鼠卵巢早衰(POF)动物模型,寻找最佳造模方式,为进一步研究POF提供更为适用的实验模型。方法8周龄动情周期规律的C57BL/6雌性小鼠共40只,随机分成5组:CON(对照组),CTX80(80 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX100(100 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX120(120 mg·kg^(-1)·d^(-1)),CTX150(150 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续腹腔注射10 d,CON组注射生理盐水,其余组注射不同剂量CTX。记录小鼠体重、动情周期和卵巢脏器系数等,比较得出CTX诱导POF模型最佳暴露剂量。使用最佳CTX暴露剂量重新造模,随机分为模型组和对照组,分别在停药后第1、2、3、4周,检测血清性激素,计数各级卵泡等,比较得出CTX诱导POF模型最佳停药周期。结果(1)研究最佳造模剂量时,CTX150死亡2只,而CTX80小鼠仍有完整的动情周期,说明这两种剂量并非最佳。CTX各组在暴露过程中体重呈进行性下降,停止暴露后体重开始回升,但至停药第7天各组体重仍显著低于CON组(P<0.05)。停药第7天各CTX组卵巢脏器系数均显著低于CON组(P<0.01),CTX100最低(P<0.001),但各CTX组间差异无统计学意义(P>0.05)。考虑到尽量缩小药物对实验动物伤害的伦理要求,得出CTX诱导卵巢早衰模型的最佳暴露剂量为100 mg·kg^(-1)·d^(-1)×10 d。(2)研究最佳停药周期时,模型组停药后第1、2、3、4周血清抗苗勒管激素(AMH)水平、雌二醇(E_(2))水平、原始卵泡、初/次级卵泡均显著低于同期对照组(P<0.05),卵泡刺激素(FSH)水平在第1、3、4周均显著高于同期对照组(P<0.05),而第1、2、4周的闭锁卵泡计数均显著高于同期对照组(P<0.05),均表现出POF典型特征。随CTX停药周期延长,模型组小鼠原始卵泡、初/次级卵泡、成熟卵泡计数呈进行性下降,闭锁卵泡计数升高(P<0.05),CTX对卵巢功能损害呈进行性加重。比较得出CTX停药1周是诱导POF模型最佳成模周期。结论CTX100 mg·kg^(-1)·d^(-1)连续暴露10 d是建立CTX诱导小鼠POF模型的最佳造模剂量,最佳成模周期为停药后1周。

白术多糖通过花生四烯酸代谢通路缓解环磷酰胺诱导的小鼠肾损伤

本研究旨在探讨白术多糖(PAMK)对环磷酰胺(CTX)诱导的小鼠肾脏损伤的影响及潜在的作用机制。选用100只42~43日龄雄性C57BL/6小鼠随机分为四组,白术多糖(PAMK)组和白术多糖+环磷酰胺(PAMK+CTX)组灌胃200 mg/kg PAMK,1次/d;对照(Control)组和环磷酰胺(CTX)组给予等量的生理盐水。实验第25~27 d,CTX组和PAMK+CTX组腹腔注射100 mg/kg CTX,1次/d;Control组和PAMK组注射等量生理盐水。实验第35 d采集肾脏进行组织学观察,氧化应激检测和转录组测序。结果显示,与CTX组相比,PAMK+CTX组肾脏损伤有所缓解;肾脏中丙二醛量显著下降(P<0.05)、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性和总抗氧化能力显著升高(P<0.05)。为了进一步探究PAMK缓解CTX诱导肾损伤的调控机制,本实验进行了肾脏转录组测序。结果显示,在Control组vs CTX组和CTX组vs PAMK+CTX组分别鉴定到493个和333个差异表达基因(DEGs)。两组DEGs功能富集分析结果发现DEGs富集在花生四烯酸代谢等信号通路。花生四烯酸通路相关基因检测结果显示,与Control组相比,CTX组Cyp2b9、PTGS1、NF-κB和Mfsd2a mRNA表达量显著升高(P<0.05);与CTX组相比,PAMK+CTX组Cyp2c65、BCL6 mRNA表达量显著升高(P<0.05),Cyp2b9、PTGS1和Mfsd2a mRNA表达量显著降低(P<0.05)。综上所述,PAMK可能通过花生四烯酸代谢通路缓解小鼠肾脏氧化应激,从而降低CTX诱导的小鼠肾脏损伤。

硒对环磷酰胺致生精功能损伤小鼠精子发生的改善作用及机制

目的:基于溶质载体家族7成员11-谷胱甘肽过氧化酶4(SLC7A11-GPx4)信号通路探讨硒对环磷酰胺(CTX)致生精功能损伤(SI)模型小鼠精子发生的改善作用及机制。方法:将36只KM小鼠随机分为6组,每组6只,分别为SI模型对照组、缺硒模型(-Se SI)组、加硒模型(+Se SI)组,所有模型组均腹腔注射100 mg/kg CTX,正常对照组、-Se对照组、+Se对照组,对照组均注射生理盐水,注射周期为每周1次,连续6周。采用HE染色法观察各组小鼠睾丸组织形态学及病理学变化,并对附睾中精子进行计数,Western印迹试验检测GPx4和SLC7A11蛋白表达,RT-qPCR检测铁死亡相关基因变化。将GC2-spd细胞随机分为正常对照组,Ferrostatin(Fer-1)组,Erastin组,-Se组,亚硒酸钠(SeS)0.5、5.0μmol/L组,硒代蛋氨酸(SeM)5.0、50μmol/L组,SeS+Erastin组,SeS+Fer-1组,SeM+Erastin组,SeM+Fer-1组,观察GC2-spd细胞铁死亡相关蛋白和基因水平的变化。结果:CTX诱导的SI模型组小鼠睾丸和前列腺脏器指数明显低于正常对照组,生精细胞内层次减少,空洞增加,血清铁蛋白浓度下降(P<0.05),转铁蛋白浓度上升(P<0.05);+Se SI模型组、+Se对照组分别较-Se SI模型组、-Se对照组的脏器系数升高(P<0.05,P<0.01),且+Se组睾丸组织病理变化明显改善。SI模型对照组较正常对照组小鼠睾丸GPx4和SLC7A11基因表达量降低(P<0.01),而+Se SI模型组、+Se对照组分别较-Se SI模型组、-Se对照组小鼠睾丸GPx4和SLC7A11基因显著上升(P<0.01,P<0.05),但两种蛋白表达量却无明显差异。体外GC2-spd细胞实验结果显示,-Se组较正常对照组GPx4基因和GPx4蛋白水平均显著降低(P<0.05),SLC7A11基因水平下降(P<0.01);不同剂量的SeS和SeM均显著提高-Se组GPx4蛋白表达,低剂量SeM促进GPx4基因水平显著上升,高剂量SeS使SLC7A11基因和SLC7A11蛋白表达量增加(P<0.05,P<0.01)。-Se组较正常对照组,acsl4和ptgs2基因水平明显下降,SeM促进acsl4表达,SeS促进ptgs2和fth1的表达(P<0.01,P<0.05)。GC2-spd干预结果显示Erastin组较正常对照组ptgs2降低,SeS+Erastin、SeM+Erastin组较Erastin组ptgs2基因表达均增加,但Fer-1较正常对照组ptgs2表达降低,SeS+Fer-1、SeM+Fer-1组较Fer-1组ptgs2基因水平降低(P<0.05);SeM+Erastin、SeM+Fer-1组分别较Erastin、Fer-1组均GPx4的基因量增加(P<0.01,P<0.05);SeM+Erastin、SeS+Erastin较Erastin组和SeM+Fer-1、SeS+Fer-1组较Fer-1组SLC7A11均降低,且伴随着acsl4和fth1的升高(P<0.01)。结论:硒缺乏导致小鼠睾丸和精母细胞SLC7A11和GPx4基因水平降低,铁死亡相关基因表达异常,GPx4蛋白表达下降。硒促进GPx4基因和GPx4蛋白表达,提高SLC7A11基因表达量,改善生精功能损伤小鼠睾丸的精子发生,且有机硒SeM和无机硒SeS对铁死亡通路相关基因的调控存在差异。

黄精水提液对环磷酰胺诱导的雄性小鼠生殖损伤的保护作用

目的研究黄精水提液对环磷酰胺诱导的生殖损伤小鼠的保护作用。方法40只昆明种小鼠随机平分为空白组、模型组、黄精水提液治疗组和阳性对照组共四组。治疗组和阳性对照组分别给予黄精水提液(5 g/kg)和金匮肾气丸(1.2 g/kg)药液灌胃,空白组和模型组给予相同剂量纯水灌胃,1次/d,连续35 d;模型组、黄精水提液治疗组和阳性对照组腹腔注射环磷酰胺(5 mg/ml,10 ml/kg),每周1次,空白组注射同剂量的生理盐水,实验完成后,处死小鼠,取附睾头部孵育,检测精子活力、精子密度和畸形率;检测睾丸中SOD活性;PCR检测睾丸组织TXNIP、NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-18等基因表达;HE染色观察睾丸组织形态变化。结果与空白组相比,模型组精子活率、精子密度明显降低(P<0.05),精子畸形率有所升高(P<0.05),睾丸组织中SOD活性有所降低(P<0.05),睾丸组织中TXNIP、NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-18 mRNA表达明显升高(P<0.05),睾丸组织曲细精管萎缩变小,结构不完整,生精细胞排列松散、明显减少、呈空泡状。与模型组相比,黄精水提液治疗组精子活率、精子密度有所提高(P<0.05),精子畸形率明显降低(P<0.05);组织中SOD活性有所升高(P<0.05);睾丸组织中TXNIP、NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-18 mRNA表达有所降低(P<0.05);曲细精管萎缩有较明显改善,生精细胞明显增多,空泡状减少。结论黄精水提液可减轻环磷酰胺诱导的生殖损伤,其机制可能与抗氧化和抗炎有关。

环磷酰胺对S180荷瘤小鼠肿瘤微环境、组织及血液中氨基酸类物质的差异性影响

探讨S180小鼠肿瘤微环境、组织和血液中多种氨基酸类物质的含量以及环磷酰胺对其的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组和环磷酰胺组,每组8只。模型组和环磷酰胺组腋下注射S180肿瘤腹水细胞造模。造模第二天,各组分别腹腔注射生理盐水和环磷酰胺,每日一次。给药13天后,麻醉状态下在小鼠肿瘤内埋置微透析探针并收集肿瘤组织细胞外液,透析过程中给予最后一次药物。待样品收集结束后,剥离肿瘤组织并取血。高效液相-荧光法(HPLC-FLD)检测肿瘤组织细胞外液,肿瘤组织匀浆液,血液中7种氨基酸类物质的含量变化。结果 与正常对照组相比,血清中模型组天门冬氨酸(Asp)显著升高,而甘氨酸(Gly)显著降低(P<0.01)。与模型组相比,环磷酰胺组牛磺酸(Tau)显著降低(P<0.01)。与模型组相比,活体肿瘤小鼠肿瘤微环境中环磷酰胺组的丝氨酸(Ser)和γ-氨基丁酸(GABA)分别有8个时间点和9个时间点显著升高(P<0.05或P<0.01)。但肿瘤组织中各种氨基酸没有显著性差异。结论 环磷酰胺可以通过调节肿瘤微环境中的氨基酸类物质起到抗肿瘤作用。氨基酸类物质在肿瘤微环境、组织及血液中的变化并不相同。提示在实验设计中实验取材方式对于实验结果具有明显的差异性影响。

LOXL2、TGF-β、CTGF在结缔组织病合并间质性肺病患者使用环磷酰胺治疗前后的变化及临床意义

目的:观察血清赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like protein 2,LOXL2)、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在结缔组织病合并间质性肺病(connective tissue disease and interstitial lung disease,CTD-ILD)患者使用环磷酰胺治疗前后的变化及临床意义。方法:选择2021年3月-2022年5月在内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院风湿免疫科收治的CTD-ILD并使用环磷酰胺针静脉滴注治疗的患者30例,观察患者治疗前基线期及使用环磷酰胺治疗12周后及24周后的临床资料、影像学资料及实验室资料,分析血清LOXL2、TGF-β、CTGF在CTD-ILD患者使用环磷酰胺治疗前后的变化及临床意义。结果:CTD-ILD患者使用环磷酰胺治疗24周后血清ESR、IgM、IgA、IgG水平明显降低,肺功能指标TLC、FVC、FEV1/FVC、DLCO%明显改善(P<0.05);治疗12周后及24周后血清LOXL2、TGF-β、CTGF的水平明显降低,6-MWT明显改善。HRCT评分与CRP评分明显降低(P<0.05);治疗12周后及24周后C-反应蛋白及血气分析指标PaO_(2)与PaCO_(2)变化差异不大(P>0.05)。CTD-ILD患者血清中LOXL2水平与ESR、IgA、IgG呈正相关(P<0.05);LOXL2与TGF-β、CTGF呈正相关(P=0.001、0.003);TGF-β与CTGF呈正相关(P=0.025)。结论:环磷酰胺治疗可能通过抑制血清LOXL2的表达进一步抑制TGF-β信号通路进而影响CTGF的表达而有效地控制CTD-ILD患者的肺纤维化。

环磷酰胺联合糖皮质激素治疗不同病理分期特发性膜性肾病的疗效观察

目的分析比较不同病理分期特发性膜性肾病(IMN)经环磷酰胺(CTX)静脉冲击联合口服糖皮质激素(GC)治疗的疗效情况,为临床治疗IMN提供依据。方法回顾性分析2017年1月—2022年12月某医学院附属和平医院及附属和济医院肾内科经肾穿刺活检确诊为IMN且接受CTX静脉冲击联合口服GC治疗患者的临床资料及实验室资料。按照IMN病理分期进行分组,随访12个月,分析比较不同病理分期组IMN患者的基线资料及治疗后各时间点的疗效差异。结果共收集到符合纳入标准的80例IMN患者,其中Ⅰ期组0例,Ⅱ期组65例,Ⅲ期组15例,Ⅳ期组0例。基线资料分析结果:Ⅱ期组和Ⅲ期组在年龄、性别、血压、病程、就诊原因、24 h尿蛋白(24 h UTP)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(SA)、血肌酐(Scr)、估算肾小球滤过率(eGFR)、血尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、补体C4、补体C3、免疫球蛋白G(IgG)等指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CTX+GC治疗后疗效及疗效相关指标分析结果:Ⅱ期组和Ⅲ期组在完全缓解率、部分缓解率、无效率及总缓解率等指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅱ期组与Ⅲ期组接受治疗后24 h UTP不存在统计学差异(P>0.05);Ⅱ期组和Ⅲ期组的24 h UTP均对时间差异有统计学意义(P<0.05),提示治疗时间越长,24 h UTP有下降趋势。Ⅱ期组和Ⅲ期组接受治疗后SA存在统计学差异(P<0.05),治疗3个月时Ⅲ组SA 34.50(32.40,38.00)g/L,Ⅱ期组SA 31.50(25.95,35.10)g/L,Ⅲ期组高于Ⅱ期组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅱ期组和Ⅲ期组SA均对时间差异有统计学意义(P<0.05),提示治疗时间越长,SA有上升趋势。Ⅱ期组与Ⅲ期组患者接受治疗后Scr不存在统计学差异(P>0.05);Ⅱ期组和Ⅲ期组的Scr均对时间差异无统计学意义(P>0.05)。结论CTX静脉冲击联合口服GC治疗方案对不同病理分期IMN患者均有效,在治疗开始后1年内,随着治疗时间的延长,24 h UTP逐渐降低,SA逐渐升高,但不同病理分期IMN 24 h UTP在同一治疗时间点无统计学差异,其缓解率、Scr亦无统计学意义(P>0.05)。