枣果中环磷酸腺苷(cAMP)的提取工艺及含量测定

大枣中的环磷酸腺苷(cAMP)含量丰富而且稳定,在已测的动植物材料中居首位。试验采用超声水浴提取的方法,考察超声时间、乙醇浓度、料液比3个因素对cAMP提取率的影响,结果表明料液比为主要影响因素,超声时间、乙醇浓度次之;确定了cAMP最佳提取工艺:料液比1∶25,乙醇浓度15%,超声时间20 min。并采用高效液相色谱法测定了8种枣果中的cAMP的含量,最高的为朝阳圆枣(375.61μg/g),最低为1-早脆王(46.01μg/g)。

纳膜过滤在提取红枣环磷酸腺苷(cAMP)中的应用

红枣经过浸泡、打浆、酶解、压滤、树脂吸附、甲酸洗脱后，采用150nm纳滤膜在压差为0．5-1MPa下过滤，结果表明：纳滤截留组分经过紫外扫描在波长258nm处峰值与环磷酸腺苷（cAMP）标准品相同，而纳滤液组分（弃去液）在波长258nm处无峰；又经过HPLC检测纳滤截留组分与环磷酸腺苷（cAMP）标准品出峰时间相同，而纳滤液组分（弃去液）在此时间处无峰。表明纳滤截留目标产物环磷酸腺苷（cAMP）效果明显，分离了大分子组分及小分子组分，纳滤后利于浓缩、纯化得到环磷酸腺苷（cAMP）成品。

HPLC法测定大枣环磷酸腺苷(c-AMP)的含量

目的建立大枣环磷酸腺苷（cyclic adenosine 3′,5′-monophosphate,c-AMP）含量的测定方法。方法高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）,采用MGC18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为0.05 mol/L KH2PO4-Methanol（90：10-10：90）;梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果 c-AMP在15.6~500.0 ng范围内呈良好的线性关系（r=1.000）,平均回收率为100.35%±1.58%,RSD为1.58%。结论本方法操作简便、灵敏度高、准确性和重现性好,可作为大枣的质量控制方法。

红枣环磷酸腺苷(cAMP)的提取工艺

建立从红枣分离纯化cAMP的工艺路线,以及用反向高效液相色谱法测定其含量的可行性方法.采用离子交换层析法,从红枣中提取了cAMP,并用硅胶柱层析技术进行纯化,反向高效液相色谱法测定其含量.在其提取纯化过程中,首次用国产的离子交换树脂替代进口树脂,并用硅胶柱层析技术替代了硅胶薄层色谱技术.通过此工艺路线获得了纯度为98.43%的样品.

离子交换法提取大枣中环磷酸腺苷(cAMP)的工艺研究

环磷酸腺苷(cAMP)作为第二信使参与多种生理生化过程的调节,是人体内重要的生理活性物质。本文采用水浸提和6000Da超滤膜过滤方法对大枣进行预处理,从5种树脂中选型最合适的树脂,并对提取工艺进行确定。结果表明,大枣在小颗粒状(0.3cm)捣碎状态下,60℃水浸提12h,cAMP提取效果最好。通过考察SD5、SD8、D01、D05和D13五种型号离子交换树脂,发现D13型树脂提取大枣中cAMP效果最佳。选用的洗脱剂为0.05mol/LHCl,流速为1.5mL/min。得到产品产率为65.0%,其中cAMP含量37.5%。

环磷酸腺苷(cAMP)对绿豆种子萌发及幼苗生长的影响

试验以绿豆种子为试材,研究环磷酸腺苷对其萌发及幼苗生长的影响。试验设置5个环磷酸腺苷浓度处理(20,40,60,80,100 mg·L^(-1)),以清水、15 mg·L^(-1)多效唑和2 mg·L^(-1)油菜素内酯作为3个对照组,测定各处理对绿豆种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:与清水对照组相比,环磷酸腺苷浸种后,提高了绿豆种子发芽势;除80 mg·L^(-1)浓度外,其他环磷酸腺苷处理均可提高绿豆种子发芽率;随着环磷酸腺苷溶液浓度的增加,绿豆幼苗的叶长、叶宽、鲜质量、干质量、胚轴和根长呈先上升后下降趋势。综合考虑绿豆种子萌发和幼苗生长,5个环磷酸腺苷浓度中以60 mg·L^(-1)处理的种苗效果最佳。

中华分支睾吸虫和猪囊尾蚴的匀浆环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的测定

用放射免疫测定法测定了9份华支睾吸虫和9份猪囊尾蚴匀浆中cAMP和cGMP的含量。cAMP的平均值各为82.1±7.26PM/10mg蛋白质和58.5±4.28pM/10mg蛋自质;cGMP的平均值各为20.1±2.4PM/10mg蛋白质和18.8±2.3pM/10mg蛋白质。结果提示这两种寄生虫虫体匀浆中cAMP和cGMP的测定,可能有助于对寄生虫代谢的调节机制的了解,并为寄生虫虫体内存在着cAMP第二信使提供了有力的证据。

冠心病患者血清环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调节转录辅激活因子3及氧化应激指标与颈动脉粥样硬化的相关性

目的探讨冠心病患者血清环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调节转录辅激活因子3(CRTC3)及氧化应激指标与颈动脉粥样硬化的相关性。方法选取2021年6月—2023年6月本院收治的154例冠心病患者为研究组,根据颈动脉粥样硬化程度分为轻度硬化组、中度硬化组和重度硬化组;另选取154例同期健康体检者为对照组。采用Pearson法分析血清CRTC3及氧化应激指标与颈动脉粥样硬化指标的相关性。结果研究组血清CRTC3、丙二醛(MDA)、颈动脉斑块面积和中层内膜厚度(IMT)高于或大于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度硬化组、中度硬化组和重度硬化组血清CRTC3、MDA、颈动脉斑块面积和IMT依次升高或增大,SOD、GSH-Px水平依次降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清CRTC3、MDA水平与颈动脉斑块面积、IMT呈正相关(P<0.05),SOD、GSH-Px与颈动脉斑块面积、IMT呈负相关(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,CRTC3、SOD、MDA和GSH-Px联合诊断重度颈动脉粥样硬化的曲线下面积(AUC)为0.990(95%CI:0.982~0.998),灵敏度为96.27%,特异度为76.28%。4项指标联合诊断的价值高于各指标单独诊断,差异有统计学意义(Z_(联合-CRTC3)=2.723,Z_(联合-SOD)=2.698,Z_(联合-MDA)=2.673,Z_(联合-GSH-Px)=2.803,P均<0.05)。结论冠心病患者血清CRTC3、MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px水平显著降低;血清CRTC3、氧化应激水平均与颈动脉粥样硬化密切相关。

环磷酸腺苷在大面积烧伤患者全身麻醉手术中的肝保护作用分析

目的:分析环磷酸腺苷(cAMP)在大面积烧伤患者全身麻醉手术中的肝保护作用。方法:选取2022年1月—2024年1月内蒙古包钢医院收治的大面积烧伤患者60例作为研究对象,采用单双号法随机分为对照组与观察组,各30例。两组均给予气管插管全身麻醉,观察组给予cAMP。比较两组肝功能指标及麻醉效果。结果:手术开始后5 min、手术开始后60 min、手术开始后90 min、手术开始后120 min,两组外周血丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、间接胆红素水平高于治疗前,但观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组麻醉苏醒时间、住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:cAMP在大面积烧伤患者全身麻醉手术中的肝保护作用显著,患者术中血清肝功能指标稳定,麻醉及术后恢复快。

中医药调控环磷酸腺苷cAMP信号通路的文献计量与可视化分析

目的通过CiteSpace、VOSviewer、carrot 2多软件联合分析法,对中医药调控环磷酸腺苷cAMP信号通路文献进行文献计量与可视化分析,了解中医药调控cAMP信号通路的研究特点及研究热点、前沿。方法检索Web of Science核心集数据库自建库至2021年6月29日收录有关中医药调控cAMP信号通路的相关文献,对纳入文献的发文数量、发文国家地区和机构、期刊分布、发文作者、被引文献、研究热点与前沿,利用CiteSpaceV(5.6.R1)、VOSviewer、carrot 2软件联合,生成相关知识图谱并开展计量与可视化分析。结果共获得194篇相关文献,2020年发文量最多,中国大陆是发文量最多、总被引频数最高的国家,发文集中在2016年前后;北京中医药大学发文量最高,中国科学院被引频次最高,机构间合作主要以北京地区各机构合作为主,来自不同国家地区的机构之间需要加强合作;期刊《Journalof Ethnopharmacology》发文量最多,但平均被引量最多的期刊是《PLoS One》,各期刊发文主要集中在神经学、药理学、分子生物学、细胞生物学领域,施引期刊、被引期刊仅限于医学和生物学领域,而与其他学科关系不大。中国大陆作者Duan Jinao发文量最多,Wang Y、Liu X研究者文章被引率较高;被引文献主要集中在中医药对抑郁症相关的研究;研究热点、前沿集中在中医药对心血管疾病、抑郁精神心理障碍相关机制研究方面。结论中医药调控cAMP通路研究发展前景良好,通过对此深入研究可能为未来“双心”的研究提供参考,具有一定的研究价值。

电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力和海马CA1区环磷酸腺苷效应元件结合蛋白及其磷酸化水平的影响

目的探讨电针神庭、百会治疗脑卒中后认知功能障碍的机制。方法 45只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组15只。后两组线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注模型。电针组于造模后24 h开始电针神庭和百会,共7 d。每天电针后行Morris水迷宫测试。治疗后,取大鼠脑组织TTC染色测量脑梗死体积,免疫组化检测海马CA1区环磷酸腺苷效应元件结合蛋白(CREB)及其磷酸化水平(p-CREB)的表达。结果从第4天开始,与模型组相比,电针组大鼠逃避潜伏期及游泳路程缩短(P<0.05);穿越平台次数增多(P<0.05)。电针组大鼠脑梗死体积小于模型组(P<0.05);海马CA1区CREB、p-CREB表达量较模型组增加(P<0.05)。结论电针神庭、百会后,脑缺血再灌注大鼠海马CA1区CREB、p-CREB表达量增加,从而保护神经元,改善学习记忆功能。

HPLC测定陕北大枣和新疆大枣中环磷酸腺苷含量的研究

目的:建立高效液相法测定环磷酸腺苷(cAMP)的含量,对新疆大枣中的 cAMP 含量进行测定,并与陕北大枣中 cAMP含量进行比较。方法:以 Agilent XDB—C_(18)(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱为固定相,甲醇-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾(10:90)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测室温度为35℃,检测波长259nm。结果:采用的条件能将大枣中 cAMP 与其他组分峰分离,不同产地的大枣中 cAMP 的含量不同,新疆大枣和陕北大枣中 cAMP 含量分别为320μg·g^(-1)和306μg·g^(-1)。结论:采用高效液相色谱法对大枣中 cAMP 含量进行测定具有分离效能高、灵敏度高和检测速度快等优点。

UAE-HILIC-DAD-ESI-Q-TOF/MS法测定大枣中的环磷酸腺苷

环磷酸腺苷(cAMP)是大枣中特色最为突出的重要生物活性物质,本研究建立了超声辅助提取-亲水色谱-二极管阵列检测器-电喷雾四极杆飞行时间质谱法(UAE-HILIC-DAD-ESI-Q-TOF/MS)定性定量测定大枣中cAMP的方法。采用超声辅助提取法用于cAMP的提取,采用Waters Xbridge Amide(250 mm×4.6 mm,3.5μm)亲水色谱柱进行分离,以乙腈和20 mmol/L CH3COONH4+0.2%CH3COOH为流动相,流速0.8 mL/min,柱温为室温。采用电喷雾四极杆飞行时间质谱,在正离子模式下,进行分析。采用超声提取法,cAMP的提取率较高;在优化的亲水色谱条件下,大枣水提物中cAMP与其他化合物分离良好;根据电喷雾四极杆飞行时间质谱获得的母离子和子离子的精确分子量信息,结合标准对照品的保留时间和UV信息可以对其进行准确鉴别。cAMP在0.01μg/mL～50.00μg/mL范围内具有良好的线性关系(r2=0.999 1),采用发展的方法用于金丝小枣与大红枣中的cAMP的含量测定。本文发展的UVE-HILIC-DAD-ESI-Q-TOF/MS测定大枣中cAMP的方法,分离度好、灵敏度高,为快速鉴别和测定大枣中的cAMP及资源开发研究提供了分析测定方法支持。

缺血/再灌注小鼠海马组织cAMP和腺苷环化酶mRNA水平的变化

目的:观测缺血/再灌注小鼠海马组织环磷酸腺苷(cAMP)和腺苷环化酶(AC)mRNA水平,探讨缺血/再灌注发病的分子生物学机制。方法:通过双侧颈总动脉线结、连续3次缺血-再灌注,制作缺血/再灌注动物模型,并设立假手术组;术后29d3、0d分别测试学习和记忆成绩;应用放射免疫法检测小鼠海马组织cAMP水平,应用原位杂交技术检测ACmRNA水平。结果:与假手术组比较,模型组学习和记忆成绩均降低(P<0.05),且海马组织cAMP水平也降低(P<0.05),海马CA1区ACmRNA阳性神经元面密度明显降低(P<0.05)。结论:海马组织cAMP和ACmRNA水平降低可能参与了缺血/再灌注后学习和记忆障碍的分子生物学发病机制。

二氢麦角碱升高血管性痴呆小鼠海马cAMP和腺苷环化酶

目的观测血管性痴呆小鼠海马组织环磷酸腺苷(cAMP)和腺苷环化酶(AC)水平及二氢麦角碱对其的影响,探讨血管性痴呆发病的分子生物学机制。方法通过双侧颈总动脉线结、连续3次缺血-再灌注,制作血管性痴呆动物模型,并设立假手术组、二氢麦角碱组;术后29 d、30 d分别测试学习和记忆成绩;应用放射免疫法检测小鼠海马组织cAMP水平,应用原位杂交技术检测AC水平。结果与假手术组比较,模型组学习和记忆成绩均降低(P<0.05),且海马组织cAMP水平也降低(P<0.05),海马CA1区AC mRNA阳性神经元比例明显降低(P<0.05);而与模型组比较,二氢麦角碱组学习和记忆成绩均改善(P<0.05),且海马组织cAMP水平也升高(P<0.05),海马CA1区AC mRNA阳性神经元比例明显增加(P<0.05)。结论海马组织cAMP和AC水平降低可能参与了血管性痴呆的分子生物学发病机制;二氢麦角碱可以升高其cAMP和AC水平而改善临床症状。

神经生长因子与降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和磷酸化CREB的上调作用

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)和降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和磷酸化CREB(p-CREB)表达的影响。方法:用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学SABC法、Western印迹法和图像分析方法检测大鼠手术侧顶叶皮质CREB和p-CREB表达。结果:缺血再灌注组手术侧顶叶皮质CREB表达较假手术组减少,p-CREB表达高于假手术组;NGF组和CGRP组顶叶皮质CREB和p-CREB表达均高于缺血再灌注组;NGF组和CGRP联合应用时CREB与p-CREB的表达更高。结论:NGF与CGRP对缺血神经元的保护作用可能是通过上调神经元内CREB和p-CREB来实现的,NGF和CGRP有协同作用。

镧对大鼠海马CA1区环磷酸腺苷应答元件结合蛋白磷酸化的影响

目的探讨镧的神经毒性作用机制。方法 40只Wistar孕大鼠通过自由饮水的方式随机分为正常对照组,LaCl30.25%,0.5%和1.0%染毒组。染毒组仔鼠在断乳前通过母乳染毒,断乳后通过自由饮水的方式染毒1个月。电感耦合等离子体质谱法检测海马CA1区镧含量;磷酸二酯酶法检测海马CA1区钙调蛋白(CaM)活性;Western印迹法检测磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅳ(p-CaMKⅣ),磷酸化环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(p-CREB)和c-jun蛋白表达;RT-PCR法检测c-jun mRNA表达水平。结果与正常对照组相比,LaCl30.25%,0.5%和1.0%染毒组海马CA1区镧含量显著高于正常对照组,分别为正常对照组的7.3,12.0和20.0倍(P<0.05);海马CA1区CaM活性显著降低,分别为正常对照组的80.7%,59.9%和30.6%(P<0.05);海马CA1区p-CaMKⅣ表达降低,分别为正常对照组的83.0%,57.4%和27.7%(P<0.05),p-CREB表达显著降低,分别降低了24.4%,36.6%和73.2%(P<0.05),c-jun蛋白表达显著降低,分别降低了36.1%,45.9%和83.6%(P<0.05),c-jun mRNA表达显著降低,分别降低了14.8%,27.2%和76.5%(P<0.05)。结论镧可能与钙竞争结合于CaM,造成海马CA1区CaM活性和CaMKⅣ,CREB磷酸化以及c-jun基因转录和蛋白表达水平下降,从而损害大鼠的学习记忆能力。

大鼠无菌性炎症发热时不同脑区cAMP含量和腺苷酸环化酶活性的变化

在大鼠背部皮下注入巴豆油,诱发无菌性炎症(AI)发热,致炎后第一天动物体温上升达高峰,第二天体温开始回降,在第八天体温回降至正常。实验分四组,第一组为对照组,不做致炎处理,第二组为发热高峰组,第三组为发热恢复组,观察大鼠AI发热高峰期及恢复期时不同脑区cAMP含量和腺苷酸环化酶(AC)活性的变化。第四组为发热恢复正常组.观察致炎后第一天至第八天动物体温从高峰障至正常的变化曲线,不做脑组织取材。结果发现:大鼠在发热高峰期与对照组比较,丘脑下部cAMP含量明显增加(P<0.01),并与体温变化呈正相关关系(r=0.893);AC活性显著增强(P<0.001),也与体温变化呈正相关关系(r=0.824),脑皮质、脑干cAMP含量与AC活性均无明显变化。发热恢复组与对照组比较:丘脑下部cAMP含量明显增加(P<0.05),丘脑下部、脑干AC活性均显著增强(P<0.05),而脑皮质cAMP含量和AC活性均无明显变化。作者推论:大鼠AI发热很可能是由于丘脑下部AC活性增强使局部cAMP含量增多所致。

环腺苷二磷酸核糖(cADPR)类似物的合成与诱导钙释放活性的研究

Ca2+信号传导通路是生物体内重要的胞内信号传导途径之一。局部钙信号主要来源于细胞内钙库释放,而这些钙信号受到各种第二信使的控制和Ca2+通道蛋白的调节。环腺苷二磷酸核糖(cADPR)作为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的代谢物,发现于1987年,是一种信号传导分子,它广泛存在于各种生物系统中,通过介导兰诺定(RyR)受体调节钙动员活性。研究cADPR以及具有不同生物活性的类似物之间的构效关系是探究分子内钙释放机制的主要手段,另外,一些结构新颖的拮抗剂和激动剂可以作为研究细胞系统复杂机制的研究工具。作者概括性地介绍了cADPR结构类似物——N1-乙氧基甲基-环肌苷-5'-二磷酸核糖(cIDPRE)和N1-[(磷酰基-O-乙氧基)-甲基-N9-[(磷酰基-O-乙氧基)-甲基-次黄嘌呤-环磷酸焦酯(cIDPDE)的合成与性质。这两种类似物cIDPDE和cIDPRE可作为研究完整细胞钙信号系统的膜透性激动剂。

蛋白质翻译后修饰对环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶功能的调控

环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子信号通路是细胞感知细胞质中异常存在的双链DNA的主要效应器,对于该信号通路的调节,可以通过调控细胞质内DNA识别受体环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶的功能来完成。近年来研究发现,蛋白质翻译后修饰,包括磷酸化、乙酰化、泛素化、甲基化、类泛素修饰等在固有免疫信号通路的调节中具有重要功能。本文就蛋白质翻译后修饰如何通过不同的机制对环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶的功能及其下游的信号通路产生多种多样的影响进行阐述。