环磷酸腺苷应答元件调节器与精子发生

环磷酸腺苷应答元件调节器(CREM)是cAMP信号途径中的一个主要成分,CREM基因敲除导致小鼠不育,精子发生停止在减数分裂后的精子变态(spermiogenesis)的第一步,减数分裂后的生殖细胞特异的基因表达显著减少,凋亡细胞增多。而CREM突变雌鼠能育,说明CREM对于小鼠精子发生是必须的;同样在精子发生停止在圆形精子阶段的患者中发现CREM基因表达减少或不表达或剪接错误导致产生不正确的产物。本综述主要讨论CREM在精子发生中的作用。

镧对大鼠海马CA1区环磷酸腺苷应答元件结合蛋白磷酸化的影响

目的探讨镧的神经毒性作用机制。方法 40只Wistar孕大鼠通过自由饮水的方式随机分为正常对照组,LaCl30.25%,0.5%和1.0%染毒组。染毒组仔鼠在断乳前通过母乳染毒,断乳后通过自由饮水的方式染毒1个月。电感耦合等离子体质谱法检测海马CA1区镧含量;磷酸二酯酶法检测海马CA1区钙调蛋白(CaM)活性;Western印迹法检测磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅳ(p-CaMKⅣ),磷酸化环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(p-CREB)和c-jun蛋白表达;RT-PCR法检测c-jun mRNA表达水平。结果与正常对照组相比,LaCl30.25%,0.5%和1.0%染毒组海马CA1区镧含量显著高于正常对照组,分别为正常对照组的7.3,12.0和20.0倍(P<0.05);海马CA1区CaM活性显著降低,分别为正常对照组的80.7%,59.9%和30.6%(P<0.05);海马CA1区p-CaMKⅣ表达降低,分别为正常对照组的83.0%,57.4%和27.7%(P<0.05),p-CREB表达显著降低,分别降低了24.4%,36.6%和73.2%(P<0.05),c-jun蛋白表达显著降低,分别降低了36.1%,45.9%和83.6%(P<0.05),c-jun mRNA表达显著降低,分别降低了14.8%,27.2%和76.5%(P<0.05)。结论镧可能与钙竞争结合于CaM,造成海马CA1区CaM活性和CaMKⅣ,CREB磷酸化以及c-jun基因转录和蛋白表达水平下降,从而损害大鼠的学习记忆能力。

β样淀粉蛋白和早老素增强子-2与环磷酸腺苷应答原件结合蛋白的关系

β淀粉样蛋白(Aβ)沉积是阿尔茨海默病(AD)公认的一个病理学改变也是诊断依据之一。γ分泌酶是产生Aβ的最后剪切蛋白复合体,它剪切生成的Aβ主要为Aβ40和Aβ42。而比较认可的形成Aβ沉积的原因就是Aβ40和Aβ42比例的失调。γ分泌酶中起主要催化作用的部分是早老素(PS)-1,而早老素增强子(Pen)-2主要作用就是使PS-1内分解,对底物的催化作用产生影响。环磷酸腺苷应答原件结合蛋白(CREB)是与长期记忆和基因转录密切相关的一种蛋白,单体Aβ42可以促进其生成,而CREB本身可以调节Pen-2表达。本文就Aβ的形成意义、CREB的前后作用、Pen-2的功能对三者间的关系进行综述。

环磷酸腺苷应答元件结合蛋白调控的转录共激活因子在肿瘤发生发展中作用的研究进展

环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,CREB)调控的转录共激活因子(CREB-regulated transcription coactivators,CRTCs)是一个新发现的细胞内信号整合子家族,能极大地增强CREB的活性,而CREB作为细胞内的重要转录因子,参与调节细胞众多的生理活动。越来越多的研究表明,CRTCs参与调控细胞的生长、分化、增殖、存活、DNA损伤修复和凋亡相关的信号通路,在肿瘤的发生发展中起着重要作用。本文概要介绍CRTCs在肿瘤领域的研究进展。

环磷酸腺苷应答元件结合蛋白在内毒素急性肺损伤中的作用研究进展

环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein,CREB)是一种重要的核转录因子,在内毒素所致的急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)/急性呼吸窘迫综合征(acuterespiratorydistresssyndrome,ARDS)中参与细胞因子、炎性介质与氧化应激基因的转录,与多条信号转导通路相互调控,在ALI、ARDS的发生发展中具有十分重要的作用,是目前相关研究热点之一。

哺乳动物生精的重要因子:cAMP应答元件调控因子

环磷酸腺苷(cAMP)应答元件调控因子(CREM)是cAMP相关转录因子,在睾丸内用不同的启动子和变位剪接能产生CREM阻遏因子和激活因子转录产物。CREM激活因子在减数分裂后单倍体生殖细胞中高表达,是精子细胞成熟所必需的。啮齿类,猴和人类的睾丸CREM表达分析结果显示CREM对哺乳动物睾丸中精子细胞的发育很重要。而且已经鉴别出许多单倍体生殖细胞中CREM的靶基因。生精紊乱和精子细胞成熟阻滞的男性有异常的CREM表达和变位剪接。总之,许多证据表明CREM对哺乳动物精子细胞的成熟有重要作用。

丰富环境改善小鼠放射性认知功能障碍

探讨丰富环境(Environmental Enrichment, EE)对电离辐射所致小鼠认知功能障碍的保护作用及其可能机制。将36只雌性昆明小鼠随机分为对照组(Control)、辐射组(IR)和辐射丰富环境组(IR+EE)。IR组和IR+EE组小鼠采用137Csγ射线进行全身辐照至吸收剂量4 Gy;IR+EE组小鼠辐照后给予连续35 d EE刺激。采用新物体识别实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测海马区神经发生标记物双皮质素(Doublecortin, DCX)及磷酸化环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(Phosphorylatedcyclicadenosinemonophosphate(cAMP)response element-binding protein, p-CREB)的表达;Western blot方法检测海马区CREB及p-CREB蛋白的表达。结果表明:与对照组相比,IR组小鼠新物体分辨率明显降低(45.55±5.80 vs. 2.99±6.18,p<0.05),海马区DCX阳性细胞数明显减少(123.8±9.3 vs. 70.2±5.9,p<0.05),p-CREB/CREB表达下调(1.007±0.058 vs. 0.772±0.039,p<0.05);而予以EE刺激后小鼠新物体分辨率明显回升(2.99±6.18 vs. 28.31±7.30,p<0.05),海马区DCX阳性细胞数明显增加(70.2±5.9 vs. 95.7±6.5,p<0.05),p-CREB/CREB表达上调(0.772±0.039 vs. 1.014±0.093,p<0.05)。结果提示EE可能是通过上调海马区p-CREB的表达,保护海马神经发生,进而改善辐射所致的小鼠认知功能障碍。

Hedgehog信号通路调节成骨细胞RANKL表达的研究进展

背景:Hedgehog信号通路不仅参与骨髓间充质干细胞的成骨向分化,而且是位于RANKL-RANK-OPG系统调节轴上游的重要通路之一,对成骨细胞RANKL的分泌表达具有重要的调控作用,其调控机制已逐步被揭示。目的:对Hedgehog信号通路调控成骨细胞RANKL表达的研究现状进行综述。方法:通过检索CNKI,Google Scholar,PubM ed等数据库,分别以"Hedgehog,成骨细胞,骨髓间充质干细胞,甲状旁腺激素相关蛋白,环磷酸腺苷应答元件结合蛋白,活化T细胞核因子,核因子κB受体活化因子配体"和"Hedgehog,Osteoblast,BMSCs,PTHrP,CREB,NFAT,RANKL"为检索词进行检索,审阅有关Hedgehog信号通路与成骨细胞RANKL表达相关的文献,根据纳入标准最终选取37篇文献进行综述。结果与结论:Hedgehog信号蛋白可促使骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,同时又可以通过上调细胞内甲状旁腺激素相关蛋白的表达,进一步激活下游细胞因子环磷酸腺苷应答元件结合蛋白和活化T细胞核因子,两者协同促使成骨细胞RANKL基因表达,进而增加破骨前体细胞向破骨细胞分化、成熟。

Ac-SDKP调节CREB、Smad信号抑制矽肺纤维化的作用

目的研究Ac-SDKP调节p-CREB、p-Smad2/3信号抑制矽肺纤维化的作用。方法 Wistar大鼠随机分为:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组、Ac-SDKP预防治疗组。Van Gieson染色观察肺组织形态,Western Blot检测α-SMA、cAMP、PKA、p-CREB和p-Smad2/3蛋白表达;免疫荧光检测p-Smad2/3与α-SMA的共表达。结果矽肺模型组,纤维化病变区域可见胶原沉积,α-SMA、p-Smad2/3蛋白表达明显增多,cAMP、PKA及p-CREB表达显著减少。经Ac-SDKP干预后,cAMP、PKA及p-CREB的表达显著增加,α-SMA、p-Smad2/3的蛋白表达明显降低,肺组织损伤减轻,胶原沉积减少。结论 Ac-SDKP可通过cAMP/PKA/p-CREB信号抑制p-Smad2/3的表达,发挥抑制矽肺纤维化的作用。

Rubinstein综合征1例

Rubinstein综合征是环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(CREBBP)基因异常相关疾病中最为人熟知的一种,以生长和精神运动发育迟缓、异常外貌和体格特征以及智力障碍为主要临床特点。本文回顾了宁波市康复医院2018年1月11日收治的1例Rubinstein综合征患儿,分析其临床症状、实验室检查、遗传学检查情况,并作文献复习。

番石榴叶总黄酮对2型糖尿病模型小鼠肝糖异生ERRγ/CREBH信号通路相关因子的影响

目的:探讨番石榴叶总黄酮(GLTF)对2型糖尿病(T2DM)模型小鼠肝脏雌激素相关受体γ(ERRγ)/环磷酸腺苷应答元件结合蛋白H(CREBH)通路相关因子的影响,探讨其降血糖作用的具体机制。方法:取健康雄性ICR小鼠,采用高糖高脂饲料喂养联合多次腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM模型。将造模成功的小鼠按血糖值随机分为模型组、二甲双胍组(阳性对照,0.17 g/kg)、消渴降糖胶囊组(阳性对照,0.75 g/kg)和GLTF低、高剂量组(0.047、0.094 g/kg),每组12只;另选12只正常小鼠作为正常组。除正常组和模型组小鼠灌胃等体积水外,其余各组小鼠灌胃相应药物溶液10 mL/kg,qd,连续21 d。给药结束后,检测各组小鼠空腹血糖值、血清胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数(ISI);采用苏木素-伊红染色法观察小鼠肝脏和胰腺组织病理学变化;采用免疫印迹法检测小鼠肝组织中ERRγ、CREBH的蛋白表达水平;采用实时定量聚合酶链式反应法检测小鼠肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC1α)、CREB调节转录辅激活因子2(TORC2)的mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠空腹血糖和血清胰岛素水平均显著升高,ISI值显著降低(P<0.01);肝组织病变明显、可见大量空泡;胰腺组织中胰岛数目减少、体积变小,胰岛细胞呈轻度空泡病变;肝组织中ERRγ、CREBH的蛋白表达水平及PGC1α、TORC2的mRNA表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,GLTF各剂量组小鼠上述血糖、胰岛素指标及病理学变化均明显改善;肝组织中ERRγ、CREBH的蛋白表达水平及PGC1α、TORC2的m RNA表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:GLTF对T2DM模型小鼠具有明显降糖及肝、胰腺组织保护作用;其降血糖作用的机制可能与抑制肝脏ERRγ/CREBH信号通路有关。

愈痫灵方对PTZ致痫鼠认知功能障碍与海马p-CREB、CaMK Ⅳ表达的影响

目的分析愈痫灵方对海马磷酸化环磷腺苷应答元件结合蛋白(CREB)、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅳ(CaMK Ⅳ)的关系和表达变化,探讨愈痫灵方改善戊四氮(PTZ)致痫鼠认知功能障碍的影响。方法取健康雄性SD大鼠120只,从中随机选取10只作为正常对照组,其余大鼠用戊四氮造模,将符合模型标准的大鼠随机抽取60只分为愈痫灵组、拉莫三嗪组、丙戊酸钠组和模型组,每组15只。灌胃后用水迷宫实验测试大鼠的学习记忆能力,采用免疫组织化学方法检测p-CREB、Ca MK Ⅳ在海马体CA1区的表达变化。结果各组大鼠水迷宫实验潜伏期和总路程的学习记忆成绩比较有显著统计学意义(P<0.001):模型组与正常组比较,差异有显著统计学意义(P<0.001);拉莫三嗪组、愈痫灵组与模型组比较,差异有显著统计学意义(P<0.001)。愈痫灵方对致痫鼠海马CA1区P-CREB、CaMK Ⅳ表达的影响:各组之间表达的比较,差异有显著统计学意义(P<0.01);模型组与正常组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01);愈痫灵组、拉莫三嗪组与模型组比较,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论愈痫灵方可以通过增强海马区p-CREB的水平,提高P-CREB的上游通路CaMK Ⅳ,改善致痫大鼠的学习记忆能力。

麻醉期间低体温对新生大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨麻醉期间低体温状态对新生大鼠学习记忆能力的影响及其可能的作用机制。方法出生7 d的SD新生大鼠40只,按随机数字表法分为四组(n=10):对照组(C组)、麻醉保温组(A组)、麻醉低温组(AH组)、物理低温组(H组)。C组腹腔注射0.1 ml生理盐水并配备加热垫保持直肠温度在38~39℃;A组以25 mg/kg腹腔注射丙泊酚0.1 ml,每20分钟追加初始剂量的1/2,麻醉维持2 h,同C组方法保持直肠温度在38~39℃;AH组麻醉方式和时间与A组相同,大鼠在麻醉过程中不保温,控制室温为23℃,允许体温自然下降;H组大鼠腹腔注射0.1 ml生理盐水,同样控制室温为23℃,使体温自然下降。麻醉过程中持续吸氧,2 h内每20分钟监测记录一次体温。清醒后即刻,每组随机取5只大鼠采用Western blot法检测海马磷酸化-细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化-环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(p-CREB)相对表达量。每组剩余5只大鼠继续饲养至30日龄进行水迷宫实验检测其空间学习记忆能力和海马p-ERK、p-CREB相对表达量。结果降温60 min,AH、H组大鼠的直肠温度分别下降至(25.38±0.22)℃、(25.54±0.20)℃,明显低于C组(38.36±0.24)℃和A组(37.40±0.29)℃(P<0.05)。清醒后即刻,AH、H组p-ERK和p-CREB蛋白相对表达量明显低于C组和A组(P<0.05)。30 d四组大鼠逃避潜伏期、穿越平台次数和原平台象限逗留时间差异无统计学意义。水迷宫测试结束时,四组大鼠p-ERK和p-CREB蛋白相对表达量差异无统计学意义。结论麻醉期间体温降至25℃时可短期抑制新生大鼠海马p-ERK、p-CREB表达,而对其远期学习记忆能力无明显影响。

SA4503对抑郁大鼠海马CREB及BDNF的影响

目的观察SA4503对抑郁大鼠海马环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(CREB)及脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。方法雄性Wistar大鼠32只随机均分为对照组(C组)和三个剂量SA4503组(K1-3组)。实验药物干预前1d,大鼠强迫游泳15min建立抑郁大鼠模型。药物干预当日,分别腹腔注射1ml等容量的生理盐水(C组)、SA4503 2.5mg/kg(S1组)、5mg/kg(S2组)、10mg/kg(S3组)。给药30min后将大鼠再次行强迫游泳实验5min,记录其不动时间。随后取海马组织测定CREB及BDNF含量。结果与C组相比,S1-3组呈剂量依赖性地减少大鼠强迫游泳不动时间及增加海马CREB和BDNF表达(P<0.05)。结论 SA4503对大鼠的抗抑郁作用可能与前额皮层CREB及BDNF表达上调有关。

半夏秫米汤对失眠大鼠下丘脑5-HT介导的cAMP/CREB/BDNF通路的影响

目的:探讨半夏秫米汤对失眠模型大鼠的行为学和下丘脑5-羟色胺(5-HT)介导环磷酸腺苷(cAMP)/cAMP应答元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)通路的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、半夏秫米汤8.1、16.2、32.4 g/kg组、地西泮0.9 mg/kg组。除正常对照组外,其余大鼠采用对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠模型。各组大鼠灌服相应药物或蒸馏水7 d后,采用戊巴比妥钠睡眠试验、旷场试验、Morris水迷宫试验检测行为学;ELISA法检测下丘脑5-HT、腺苷酸环化酶(AC)、cAMP含量;Western blot法检测下丘脑5-羟色胺1A受体(5-HT_(1A)R)、5-羟色胺2A受体(5-HT_(2A)R)、蛋白激酶A(PKA)、p-CREB、CREB、BDNF蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠睡眠潜伏期、静止时间和粪便粒数、水迷宫游泳总路程及逃避潜伏期显著增加(P<0.01),睡眠持续时间、平均速度、中央格跨格次数、总活动距离、目标象限穿越次数和停留时间显著减少(P<0.01),下丘脑5-HT、AC、cAMP含量显著降低,下丘脑5-HT_(1A)R、PKA、p-CREB和BDNF蛋白表达显著下调(P<0.01);相较于模型对照组,半夏秫米汤组大鼠睡眠潜伏期、静止时间、粪便粒数、逃避潜伏期、游泳总路程明显减少(P<0.05或P<0.01),睡眠持续时间、平均速度、中央格跨格次数、总活动距离、目标象限穿越次数和停留时间明显增加,5-HT、AC及cAMP含量升高,5-HT_(1A)R及PKA、p-CREB和BDNF蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:半夏秫米汤可通过激活下丘脑5-HT及1A受体介导的cAMP/CREB/BDNF通路,改善失眠大鼠的睡眠并减少焦虑情绪,提升学习记忆能力。