调节环磷酸腺苷对绵羊卵母细胞减数分裂恢复的影响

旨在探讨西洛酰胺(cilostamide)和雌二醇(E2)对绵羊卵母细胞和卵丘细胞中的环磷酸腺苷(cAMP)水平及卵母细胞减数分裂恢复的影响。首先在常规体外成熟体系中添加磷酸二酯酶3抑制剂西洛酰胺,探讨了其对绵羊卵母与卵丘细胞中cAMP水平调控的时间效应;随后在双相体外成熟系统中添加西洛酰胺或不同浓度的E2,利用竞争ELISA检测与DAPI染色技术,探讨了西洛酰胺和E2单独添加或联合添加对卵母和卵丘细胞内cAMP水平及卵母细胞核成熟的影响。结果显示:在常规体外成熟培养体系中,与对照组相比,培养30 min与2 h时,西洛酰胺组可显著提高卵母细胞内cAMP水平(P<0.05);在双相体外成熟系统中,与对照组相比,西洛酰胺组、0.5 ng/mL E2组和联合添加组(西洛酰胺+0.5 ng/mL E2)均可显著提升卵母细胞内cAMP水平,并且显著阻滞卵母细胞减数分裂恢复(P<0.05),同时联合添加组显示出最优的作用效果。综上,研究表明西洛酰胺与较低水平E2(0.5 ng/mL E2),具有改善绵羊卵母细胞体外成熟效率的作用,且联合添加具有明显叠加效应。