右美托咪定通过cGAS-STING通路介导的免疫调控机制对胃癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探究右美托咪定(DEX)通过环磷酸鸟苷-磷酸腺苷合酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)通路介导的免疫调控机制对胃癌(GC)细胞恶性生物学行为的影响。方法:将GC细胞株MGC-803随机分为对照组(Control组,空白培养基处理)、DEX低浓度组(DEX-L组,1 ng/ml)、DEX中浓度组(DEX-M组,10 ng/ml)、DEX高浓度组(DEX-H组,100 ng/ml)和DEX高浓度+cGAS抑制剂RU.521组(DEX-H+RU.521组,100 ng/ml DEX+1.0μmol/L RU.521)。CCK-8法检测细胞增殖情况。细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力。Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡率。ELISA检测细胞中IL-2、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞cGAS、STING、Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)mRNA的表达水平。Western blot检测细胞cGAS、STING、Bax、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、Caspase3、Caspase8及其剪切型蛋白表达和TANK结合激酶1(TBK1)、干扰素调节因子3(IRF3)磷酸化水平。结果:与Control组相比,DEX-M组、DEX-H组MGC-803细胞迁移率、细胞侵袭数目、TNF-α水平、CyclinD1、MMP9、N-cadherin、Vimentin蛋白表达显著下降(P<0.05),生长抑制率(48 h、72 h)、细胞凋亡率、IL-2、IFN-γ、Bax、E-cadherin、Cleaved Caspase3、Cleaved Caspase8蛋白表达水平、cGAS、STING、IFN-ⅠmRNA水平和蛋白表达水平、TBK1和IRF3磷酸化水平显著上升(P<0.05)。RU.521减弱了DEX对GC细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用和诱导细胞凋亡的能力,减轻了对免疫功能的改善作用。结论:DEX可能通过激活cGAS-STING通路介导的免疫调控,抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭,诱导GC细胞凋亡。

决明子水提物对脑缺血/再灌注损伤大鼠的脑保护作用及对cGAS/STING通路的影响

目的:探讨决明子水提物(AESC)对脑缺血/再灌注损伤(CIRI)大鼠的脑保护作用及对环鸟苷-腺苷合酶(cGAS)/干扰素基因的刺激物(STING)通路的影响。方法:制备大鼠CIRI模型,随机数字表法分为CIRI组、AESC低(500 mg·kg^(-1))、中(1000 mg·kg^(-1))、高(2000 mg·kg^(-1))剂量组、尼莫地平(NMDP)阳性对照组(20 mg·kg^(-1)),每组18只,另取18只作为假手术组。灌胃治疗2周后,红四氮唑(TTC)法测定脑梗死体积,苏木素伊红(HE)法观察皮层区组织病变,免疫荧光法检测活化小胶质细胞和变性神经元,试剂盒检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平,实时荧光定量PCR测定胞质中线粒体DNA(mtDNA)水平,Western blot法测定cGAS/STING通路蛋白表达。结果:假手术组皮层区神经细胞排列规则,无变性神经元,小胶质细胞较少;CIRI组皮层区神经细胞疏松、紊乱,有较多变性神经元和小胶质细胞;中、高剂量AESC干预后上述损伤明显好转。较于假手术组,CIRI组脑梗死体积、神经功能评分、IL-6和TNF-α水平、胞质mtDNA含量、p-STING/STING、cGAS蛋白水平显著增加(P<0.05);较于CIRI组,中、高剂量AESC均可使脑梗死体积、神经功能评分、IL-6和TNF-α水平、胞质mtDNA含量、p-STING/STING、cGAS蛋白水平显著降低(P<0.05);AESC高剂量组上述指标与阳性对照NMDP组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AESC对CIRI大鼠神经炎性损伤具有一定改善作用,可能与抑制cGAS/STING通路介导的炎性反应有关。