细菌玻片凝集实验替代诊断血清的研究

目的 节约实验经费，并解决沙门氏菌因培养时间不同，导致有时O凝集与H凝集不能同时出现的问题。方法 用鞣钙液或鞣酸溶液代替诊断血清与各种沙门氏菌、志贺氏菌做玻片凝集。结果 沙门氏菌、志贺氏菌均在1Inin内出现满意的凝集结果。结论 本法可作为沙门氏菌、志贺氏菌凝集反应的模拟方法，可经济有效地开出有关的免疫学实验。

钩端螺旋体疫苗免疫效果玻片凝集试验评价

目的采用TR/Patoc 1玻片凝集试验(SAT)评价钩端螺旋体疫苗免疫效果及应有价值。方法采用TR/Patoc 1玻片凝集试验检测100名健康人钩端螺旋体疫苗免疫后的血清抗体变化,并与显微镜凝集试验比较。结果无论是基础免疫还是加强免疫20 d后,玻凝试验抗体阳性率高达90%以上,与标准的显微镜凝集试验比较差异无统计学意义,玻片凝集试验检测的抗体持续时间较短,90 d后阳性率已大幅度降低,表明SAT检测的抗体是早期抗体。结论TR/Patoc 1玻片凝集试验操作简易,可以作为基层卫生机构监测钩端螺旋体疫苗近期免疫效果的方法之一。

玻片凝集法检测丰产鲫细菌性败血症病原菌CSS-4-2的研究

应用玻片凝集法对CSS 4 2菌株的全菌抗原进行检测 ,其最低检出水平为 10 8cells/mL。玻片凝集法对 2 2尾人工感染CSS 4 2菌株临死的或有明显症状的丰产鲫的肝、脾、肾组织分离菌的阳性检出率为10 0 % ;而对 12尾人工感染CSS 4 2菌株未显症状丰产鲫的肝、脾、肾组织分离菌的阳性检出率为 80 .5 %。

致病性大肠埃希菌玻片凝集的模拟方法

目的在缺乏致病性大肠埃希菌株及其抗血清情况下，用普通大肠埃希菌和抗血清替代品即能开出致病性大肠埃希菌检验的实验，以减少实验开支。方法用鞣钙液代替OK血清，硫酸铝钾液代替。血清，分别与活的和死的大肠埃希菌做玻片凝集。结果鞣钙液与死、活大肠埃希菌都凝集；硫酸铝钾液只与死大肠埃希菌凝集，与活大肠埃希菌不凝集。结论采用该法可作为致病性大肠埃希菌玻片凝集反应的模拟方法。

含有抗凝剂的标本对布氏菌病玻片凝集试验的影响

目的 探讨含抗凝剂标本对布氏菌病玻片凝集试验的影响.方法 选取2010~2011年来我院进行体检的健康个体100例,每人分别采集两管血液标本,一管含有抗凝剂肝素钠,另一管为普通采血管不含任何抗凝剂.两管血液标本同时离心,取上清按照赫得逊氏玻片凝集试验方法进行试验.结果 同一份血液标本含有抗凝剂的管试验结果均为布氏菌病玻片凝集试验阳性,不含抗凝剂的普通采血管结果均为布氏菌病玻片凝集试验阴性.结论 布氏菌病玻片凝集试验不能使用含有抗凝剂的血液标本.

玻片凝集试验和间接血凝试验诊断钩端螺旋体病比较

目的:探索间接血凝试验(血凝)和TR/Patocl抗原玻片法凝集试验(玻凝)在钩体病血清学诊断方面的应用效果。方法:采用血凝法、玻凝法检测不同人群血清并与显凝法作比较。结果:对30例钩体病患者早期血清检测结果显示:3种试验方法阳性率分别为:玻凝法86.7%,血凝法73.3%,而显凝法仅30.0%,显凝与玻凝、显凝与血凝间有显著性差异,而玻凝与血凝间无显著性差异。对90例非钩体病人3种方法检测结果:玻凝法检出3份阳性,血凝法检出4份阳性,其特异性分别达96.67%和95.56%。对131例钩体病疑似患者血清抗体检测结果:3种方法阳性率分别为显凝40.5%,玻凝35.9%,血凝25.2%。显凝与玻凝总符合率达84.0%,与血凝总符合率达69.2%,3法无显著性差异。对钩体流行地区95份人群血清及60份鼠、57份猪血清检测结果显示:玻凝与血凝试验阳检率低,而显凝试验阳性率显著高于玻凝和血凝两者。结论:玻凝试验和血凝试验早期诊断钩体病都具有高度的敏感性和特异性,明显优于显凝试验,但在应用方面,玻凝试验方法更简便快速,数分钟即出结果,值得基层医疗单位推广。

用TR/PatocI玻片凝集试验快速检测钩端螺旋体病的一点体会

为了证实ＴＲ／ＰａｔｏｃＩ玻片凝集法的诊断钩端螺旋体可靠性，本站将３８例患者血清标本送安徽省卫生防疫站自然疫源科做显微镜凝集试验。现将安徽检验结果报告如下。１检验结果见附表。表ＴＲ／ＰａｔｏｃＩ玻片凝集法诊断各型钩端螺旋体的验证概论菌群（型）ＴＲ／Ｐ...

沙门菌血清分型方法的比较

血清分型是沙门菌最基本和最重要的流行病学调查手段,不同血清型沙门菌引起的临床症状和造成的危害不同,快速准确地进行血清分型对于畜禽沙门菌病的防控和公共卫生安全意义重大。基于此,本试验选择我国1971—2020年分离的51株沙门菌(13种血清型),分别用全基因组测序(WGS)分型方法和液相芯片分型方法进行血清分型,并与玻片凝集法进行比较,分析3种分型方法的优劣。结果显示,玻片凝集法测得51株沙门菌的血清分型结果与原始结果一致;WGS分型方法和液相芯片分型方法分别测得34株和23株沙门菌血清分型与玻片凝集法结果一致。3种分型方法相比,WGS分型方法可鉴定出玻片凝集法和液相芯片分型方法无法分型的菌株,在操作时间和成本上更具优势。本试验可为沙门菌的血清分型研究提供参考。

SPA协同凝集反应快速检测ETEC不耐热肠毒素的研究

本文介绍一种高度特异、敏感、快速检测产肠毒素型大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)的试验方法,即SPA协同凝集反应。该方法检测LT可达毫微克水平(0.1～lng)。与Biken试验(BT)、平板免疫溶血试验(PIHT)符合率为94％,且更为快速、经济、简单。本法适用于一般医院和科研等单位快速诊断或流行病学的调查研究。

沙门氏菌传统血清凝集分型和分子血清分型试剂盒方法比较

目的验证沙门氏菌血清分型试剂盒的适用性,考核本实验室传统沙门氏菌血清分型技术,扩充沙门氏菌的分型方法,寻找更有效、更快捷的沙门氏菌分型方法。方法保存的样品菌株库中随意挑选33株沙门氏菌和6株标准菌株,首先确证为沙门氏菌,然后分别采用传统的玻片血清凝集方法和分子血清分型试剂盒对其进行分型,最后采用16S rRNA系统发育树对试验菌株进行聚类分析。结果2种分型手段的匹配率高达94.9%,其中YP 281 Salmonella havana和YP 639 Salmonella liverpool没有匹配到,这2株菌在试剂盒数据库中不存在,但本实验利用传统血清分型手段可以对这2株菌进行准确分型,其中YP 281是本实验室对GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》表B.1外成功分型的沙门氏菌。结论本实验室传统血清凝集分型技术合格。沙门分子血清分型试剂盒具有较好的适用性,能更快速、更方便对沙门氏菌进行分型。

猪链球菌荚膜多糖抗血清的制备及在血清分型中的应用

为获得猪链球菌荚膜多糖及其抗血清,采用高压破碎法、乙醇分级沉淀法、酶解法以及Sevage法提取纯化了猪链球菌2、3、7、9型荚膜多糖,采用己二酸二酰肼(ADH)间桥法将荚膜多糖与牛血清蛋白(BSA)偶联,将其制备成油乳疫苗免疫BALB/c纯系雌性小鼠制备抗血清,同时制备了猪链球菌2、3、7、9型全菌灭活苗抗血清进行了间接ELISA试验及玻片试验检测。试验结果显示,制备了高纯度的荚膜多糖,对荚膜多糖-牛血清白蛋白偶联物分析,荚膜多糖偶联蛋白后的分子量变大,荚膜多糖与牛血清白蛋白偶联比为1∶1,免疫小鼠表现出较高的免疫原性。而将单独的4种荚膜多糖以及荚膜多糖与牛血清白蛋白(牛血清白蛋白)混合作为比较也免疫小鼠不能激活免疫系统产生IgG抗体,不具有免疫原性。荚膜多糖结合蛋白抗血清与全菌灭活苗抗血清同时进行交叉ELISA以及玻片凝集试验,结果表明这4型荚膜多糖结合蛋白抗血清不与其他型菌株发生反应,具有型特异性,而全菌灭活苗抗血清与其他型菌株会发生一定程度的交叉反应。此研究结果为猪链球菌亚单位疫苗的研制以及猪链球菌分型试剂的制备提供了试验依据。

沙门菌快速血清分型策略的应用

为建立一种对临床沙门菌株进行快速血清分型的策略,本研究尝试将玻片凝集法和液相芯片法进行联合应用。首先利用玻片凝集法对467株动物源沙门菌进行鉴定,然后对不能直接利用玻片凝集法鉴定血清型的沙门菌采用液相芯片法进行补充鉴定。结果显示,利用玻片凝集法可以直接检测409株沙门菌的O抗原和H抗原,包含49种血清型;结合液相芯片法在1 d内完成了其余58株沙门菌的O抗原和H抗原单因子的鉴定,共涉及10种血清型。结果表明,玻片凝集法具有快速鉴定O抗原优势,液相芯片法具有快速鉴定H抗原优势,2种方法结合应用的策略可以快速、高效地实现沙门菌血清分型的目的,可作为沙门菌血清型快速鉴定方案并予以推广。

实时荧光PCR检测技术在沙门菌血清鉴定中的应用

目的 探究实时荧光PCR检测技术在沙门菌血清分型中的应用。方法 选取2010—2015年无锡市健康从业人员肠道分离得到的144株沙门菌,分别采用传统玻片凝集法和实时荧光PCR法进行血清分型,以前者为金标准,比较两种方法的一致性。结果 144株沙门菌利用传统玻片凝集法均可分型,共鉴定出28个型别。两种方法鉴定结果一致的有134株菌,符合率为93.06%,Kappa值为0.68,具有高度一致性。结论 实时荧光PCR法对沙门菌进行血清分型与玻片凝集法鉴定结果一致性高,且检测时间较短,操作简单;对不常见血清型或存在交叉情况时,建议两种方法联合使用,可提高沙门菌血清分型检测效率。

RT-PCR法在沙门菌检测及血清分型鉴定中的应用价值研究

目的研究实时荧光聚合酶链反应检测技术(RT-PCR)法在沙门菌检测及血清分型鉴定中的应用价值。方法选取2021年5月至2023年5月本中心采集的公共场所从业人员肛门拭子3869份,所有肛门拭子样本均采用玻片凝集法、RT-PCR法检测。分析玻片凝集法检测结果,以玻片凝集法检测结果作为金标准,计算RT-PCR法检测沙门菌灵敏度、特异度、准确度及RT-PCR法检测结果与玻片凝集法检测结果的一致性,分析玻片凝集法、RT-PCR法鉴定沙门菌血清分型结果。结果3869份肛门拭子标本经玻片凝集法检测出沙门菌41株,阳性检出率为1.06%(41/3869);RT-PCR法检测沙门菌的灵敏度为95.12%(39/41)、特异度99.92%(3825/3828)、准确率99.87%(3864/3869);RT-PCR法检测沙门菌结果与玻片凝集法检测结果一致性极好(Kappa=0.939,P<0.05);玻片凝集法、RT-PCR法鉴定沙门菌血清分型完全一致的有鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌、姆班达卡沙门菌、里森沙门菌、布伦登卢普沙门菌、火鸡沙门菌、阿尔巴尼沙门菌、鸭沙门菌;RT-PCR法检测误诊的3株沙门菌血清分型分别是吉韦沙门菌、伦敦沙门菌、肠炎沙门菌;RT-PCR法检测漏诊的2株沙门菌血清分型分别是山夫登堡沙门菌、婴儿沙门菌。结论RT-PCR法检测沙门菌灵敏度与特异度均较高,有利于准确检出沙门菌,明确鉴定沙门菌血清分型。

猪链球菌2型的PCR快速检测

根据猪链球菌 2型的荚膜多糖抗原基因 cps2 J,合成 1对可扩增长度为 6 75 bp目的片段的引物 ,建立了检测猪链球菌 2型的 PCR法。应用 PCR对 9株经玻片凝集试验检测为猪链球菌 2型的菌株进行了检测 ,均呈阳性 ;而对马链球菌兽疫亚种 (C群 )、猪葡萄球菌、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌、猪肺炎霉形体等检测结果均呈阴性 ,表明了本方法的特异性。用此法对 88份正常猪的扁桃体样品的细菌分离物进行了检测 ,36份呈阳性 ,同时用玻片凝集试验进行对照检测 ,也全部呈阳性。而此法不需进行细菌的纯分离培养 ,即可用于猪链球菌 2型的快速诊断以及流行病学调查。

沈阳地区鸡慢性呼吸道病的流行病学调查

采用玻片凝集试验结合现场观察 ,对沈阳地区15个鸡场不同品种和日龄的未免疫鸡进行了鸡慢性呼吸道病(CRD)流行病学调查。共检测了300份鸡血清 ,平均阳性率33 %。被调查的15个鸡场中的12个鸡场显示有CRD血清抗体阳性鸡 ,表明沈阳地区一些鸡场鸡群已被鸡败血霉形体(MG )感染 ,有的鸡场还相当严重。