细胞破碎方法对几丁质脱乙酰酶活力的影响

实验室保藏一株产几丁质脱乙酰酶(CDA)的菌种,经过验证该酶属于胞内酶,为进一步分离纯化,需对细胞进行破碎。本文以细胞破碎后上清液酶活为指标,通过比较几种常用细胞破碎方法,最终确定破碎该细胞提取CDA的最佳方法:发酵液洗涤三次,用pH8.0 Tris-Hcl缓冲液悬浮菌体,先进行反复冻融,然后再用玻璃匀浆器处理6min,离心测上清液酶活,比破碎前上清液酶活提高了5.58倍。