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玻璃化法保存兔关节软骨的实验研究
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作者 魏民 张伯勋 +1 位作者 王宁 王俊良 《临床和实验医学杂志》 2013年第5期333-333,336,共2页
目的观察玻璃化法保存兔关节软骨的效果。方法选取10只大白兔,软骨标本取材后,低温冷冻组5只和玻璃化保存组5只,分别通过台盼蓝拒染法检测兔关节关节软骨细胞存活率和MTT法测软骨细胞相对活性。结果玻璃化保存组兔关节关节软骨细胞存活... 目的观察玻璃化法保存兔关节软骨的效果。方法选取10只大白兔,软骨标本取材后,低温冷冻组5只和玻璃化保存组5只,分别通过台盼蓝拒染法检测兔关节关节软骨细胞存活率和MTT法测软骨细胞相对活性。结果玻璃化保存组兔关节关节软骨细胞存活率和软骨细胞相对活性均优于低温冷冻组,差异均有显著性(P<0.05)。结论玻璃化法保存兔软骨,软骨存活率高,软骨修复区的组织更接近正常软骨。 展开更多
关键词 关节软骨 玻璃化法保存 低温冷冻 对比研究
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高山红景天愈伤组织的玻璃化法保存及植株再生 被引量:10
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作者 刘剑锋 阎秀峰 +1 位作者 程云清 周晓梅 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期147-151,共5页
采用玻璃化法对高山红景天的愈伤组织进行了超低温保存研究.高山红景天愈伤组织在8%蔗糖中暗培养5 d后,先用25℃的60%玻璃化保护剂PVS2预处理20 min,转至100%PVS2于-20℃乙醇浴中处理2 h后,投入液氮进行保存,48 h后使用40℃水浴快速化冻... 采用玻璃化法对高山红景天的愈伤组织进行了超低温保存研究.高山红景天愈伤组织在8%蔗糖中暗培养5 d后,先用25℃的60%玻璃化保护剂PVS2预处理20 min,转至100%PVS2于-20℃乙醇浴中处理2 h后,投入液氮进行保存,48 h后使用40℃水浴快速化冻.冻存后的愈伤组织用液体培养基MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+40%蔗糖洗涤3次,再转入MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L固体培养基中在22℃条件下进行暗培养,2周后转入光照培养(光照强度800 lx).6周后观察到高山红景天愈伤组织呈鲜绿色,长势较为旺盛,存活率可达到78.24%.冻存后的愈伤组织可诱导成苗. 展开更多
关键词 高山红景天 愈伤组织 玻璃化超低温保存 植株再生
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番木瓜茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生 被引量:21
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作者 曾继吾 易干军 张秋明 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期29-33,共5页
研究了番木瓜 (CaricapapayaL .)茎尖玻璃化法超低温保存的一些影响因素。结果表明 :无菌试管苗在MS +BA 0 5mg/L +NAA 0 1mg/L +GA3 1 0mg/L的培养基上生长较好。番木瓜茎尖超低温保存较佳体系是 :3~ 5cm的茎尖在含有 5 %二甲基亚砜... 研究了番木瓜 (CaricapapayaL .)茎尖玻璃化法超低温保存的一些影响因素。结果表明 :无菌试管苗在MS +BA 0 5mg/L +NAA 0 1mg/L +GA3 1 0mg/L的培养基上生长较好。番木瓜茎尖超低温保存较佳体系是 :3~ 5cm的茎尖在含有 5 %二甲基亚砜 (DMSO)培养基上预培养 3d ,解剖镜下剥取含 1~ 2个叶原基的茎尖 (1 5~ 2 5mm长 ) ,先在室温下于 6 0 %的玻璃化溶液 (PVS2 )中装载 4 0~ 5 0min ,再用PVS2于 0℃下处理 30min ,换 1次PVS2 溶液后迅速投入液氮。保存 2 4h后 ,在 4 0℃水浴中化冻 ,用 1 2mol/L的蔗糖培养液洗涤两次 ,转入继代培养基上再培养 ,成活率和再生率分别达 5 3 7%和 5 2 6 %。 展开更多
关键词 番木瓜 茎尖 玻璃化法保存 超低温保存 植株再生 组织培养
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百子莲胚性愈伤组织玻璃化法超低温保存体系建立及遗传稳定性分析 被引量:10
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作者 陈冠群 李晓丹 申晓辉 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2014年第5期76-83,94,共9页
采用单因素随机区组试验及多因素、多水平正交试验方案建立了百子莲胚性愈伤组织(embryogenic callus,ECs)玻璃化法超低温保存体系。将由花梗诱导的胚性愈伤组织接种至预培养基(MS+0.5mol/L蔗糖+1%琼脂)上,在4℃下预培养2d后,在室温下... 采用单因素随机区组试验及多因素、多水平正交试验方案建立了百子莲胚性愈伤组织(embryogenic callus,ECs)玻璃化法超低温保存体系。将由花梗诱导的胚性愈伤组织接种至预培养基(MS+0.5mol/L蔗糖+1%琼脂)上,在4℃下预培养2d后,在室温下加入装载液(MS+0.4mol/L蔗糖+2mol/L丙三醇+10mmol/L KNO3)处理60min;利用改良后的PVS 2玻璃化溶液(MS+0.4mol/L蔗糖+30%丙三醇+15%乙二醇+15%DMSO)在0℃下处理40min,将含有ECs的冻存管投入液氮中冻存1h;在40℃水浴中快速解冻90s;用洗涤液(MS+1.2mol/L蔗糖+10mmol/L KNO3)处理30min,每10min换1次新鲜的洗涤液;洗涤后,接种到胚性愈伤组织增殖培养基上恢复培养24h后,相对成活率分别达56.9%(TTC法)和43.3%(Evans blue法)。恢复培养55d的百子莲胚性愈伤组织经过AFLP多态性检测后未发现基因组变异,证明该方法可用于百子莲种质资源的超低温保存。 展开更多
关键词 百子莲 胚性愈伤组织 玻璃化超低温保存 遗传稳定性 AFLP
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香蕉胚性细胞悬浮系玻璃化法超低温保存及再生植株遗传稳定性分析 被引量:14
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作者 李艳娜 尉义明 +2 位作者 胡桂兵 陈厚彬 徐春香 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期899-905,共7页
采用玻璃化法对3个香蕉栽培品种(Musa spp.AAA)的胚性细胞悬浮系(ECS)进行超低温保存。对超低温保存程序进行优化,冻存后进行ECS重建并通过体细胞胚发生途径进行植株再生,最后对再生植株进行遗传稳定性分析。用建立的ECS玻璃化法超低温... 采用玻璃化法对3个香蕉栽培品种(Musa spp.AAA)的胚性细胞悬浮系(ECS)进行超低温保存。对超低温保存程序进行优化,冻存后进行ECS重建并通过体细胞胚发生途径进行植株再生,最后对再生植株进行遗传稳定性分析。用建立的ECS玻璃化法超低温保存程序对‘巴西蕉’、‘北大矮蕉’和‘粤优抗1号’的ECS进行超低温保存,获得的细胞相对存活率分别为89.6%、90.9%和89.9%,并重建了‘北大矮蕉’的ECS;在冻存后体细胞胚发生途径植株再生过程中,3个品种的相对植株再生率分别为64.4%、0.9%和14.0%。从冻存后‘巴西蕉’ECS获得的细胞胚发生途径再生植株的遗传稳定性分析结果表明:再生植株与对照在形态学方面无明显区别;简单序列重复区间(ISSR)分子标记也显示与对照相比基本无差异带出现,这初步表明超低温保存后的香蕉ECS保持了遗传稳定性。 展开更多
关键词 香蕉 胚性细胞悬浮系 玻璃化超低温保存 植株再生 遗传稳定性
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大苞鞘石斛原球茎超低温保存中生理生化变化 被引量:6
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作者 刘晓东 李晓丹 +1 位作者 吴元玲 申晓辉 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期79-84,共6页
以继代培养60 d的大苞鞘石斛原球茎(=2~3 mm)为材料,对比研究低温高渗(HT+CA)和室温高渗(HT-CA)2种预处理方法对原球茎玻璃化法超低温保存冷冻前含水量以及预处理、脱水和解冻3个关键步骤中相对电导率、丙二醛质量摩尔浓度、可溶性... 以继代培养60 d的大苞鞘石斛原球茎(=2~3 mm)为材料,对比研究低温高渗(HT+CA)和室温高渗(HT-CA)2种预处理方法对原球茎玻璃化法超低温保存冷冻前含水量以及预处理、脱水和解冻3个关键步骤中相对电导率、丙二醛质量摩尔浓度、可溶性糖和可溶性蛋白质量分数的影响,并结合显微结构观测和组织化学分析揭示高渗预处理影响超低温保存后原球茎相对存活率的生理生化基础。结果表明:在冷冻前,干样含水量显著降低,当干样含水量下降为1.06 g.g-1时,冻后相对存活率达最大值,为46.6%;预处理和脱水显著地提高了相对电导率;脱水和解冻使丙二醛质量摩尔浓度显著升高;可溶性糖和可溶性蛋白质量分数呈显著上升后明显下降的单峰变化曲线。多元相关分析表明,丙二醛质量摩尔浓度与相对存活率之间呈极显著负相关(相关系数为-0.992),膜脂过氧化作用是影响大苞鞘石斛原球茎冻后成活的关键因素之一。显微结构观察到细胞膜在预处理和脱水过程中受到明显破坏;组织化学分析显示淀粉粒和蛋白质的分布多集中在未受损伤的顶端分生组织中,分布变化呈先增多后减少的趋势,这与生理生化分析的结果是一致的。 展开更多
关键词 大苞鞘石斛 原球茎 玻璃化超低温保存 生理生化变化 显微结构 组织化学分析
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Genetic Stability of Cryopreserved Grapevine (Wtis vinifera L.) Genome by Vitrification Method
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作者 Maria Femanda Lazo Javalera Martin Ernesto Tiznado Hemandez +4 位作者 Irasema Vargas Arispuro Miguel Angel Martinez Tellez Maria Auxiliadora Islas Osuna Miguel Angel Hemandez Ofiate Marisela Rivera Dominguez 《Journal of Agricultural Science and Technology(B)》 2016年第6期380-386,共7页
Grapevine (Vitis spp.) is an economically important fruit crop worldwide. In Mexico, Sonora State leads the table grape production and exportation to international markets. In this regard, it is important to preserv... Grapevine (Vitis spp.) is an economically important fruit crop worldwide. In Mexico, Sonora State leads the table grape production and exportation to international markets. In this regard, it is important to preserve the grape varieties during long time without phenotypical or genotypical changes. Cryopreservation is a good alternative, although it very often can induce changes in genome and phenotype. In this study, grapevine cv. "Flame Seedless" axillary buds were cryoprcserved by vitrification using the plant vitrification solution 2 (PVS2) and stored in liquid nitrogen (LN) for one hour, one week and one month, respectively. Genetic stability of buds cryopreserved under all treatments was evaluated using inter-simple sequence repeats (ISSR) markers. Ten ISSR primers were evaluated, but only two primers were possible to amplify distinct and reproducible bands with sizes between 300 bp and 2,000 bp. Different ISSR fragment patterns were recorded in cryopreserved buds as compared with control. These results suggest that cryopreservation by LN and vitrification-cryopreservation affect genetic stability in grapevine. 展开更多
关键词 Table grape axillary buds liquid nitrogen VITRIFICATION PVS2 inter-simple sequence repeats.
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繁殖牛羊成本低 效益显著
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作者 于金枝 《江西饲料》 2003年第6期38-38,共1页
关键词 中国农业大学动物科技学院 卵母细胞 胚胎 0PS玻璃化冷冻保存 综合效益
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