基于网络药理学和分子对接探讨珠子参地上部分防治脂肪肝的作用机制

目的探讨珠子参地上部分防治脂肪肝的活性成分、作用靶点、分子通路,揭示珠子参地上部分防治脂肪肝的作用机制,并初步验证可能的作用机制。方法通过TCMSP和Swiss TargetPrediction数据库以及文献挖掘获取珠子参地上部分活性成分与预测靶点;然后检索Genecards数据库得到脂肪肝相关的疾病靶点;将预测靶点与疾病靶点取交集,筛选出共同的脂肪肝靶点即关键靶点,构建"药物-成分-疾病-靶点"网络;采用String数据库构建活性成分和关键靶点的蛋白相互作用网络(PPI),通过R project软件对关键靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析;利用Autodock_vina软件进行活性成分和核心靶点的分子对接验证;测定三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)的水平,并通过免疫组化法验证珠子参地上部分对环氧合酶2(PTGS2)、丝裂原激活的蛋白激酶3(MAPK3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)的影响。结果最终筛选出珠子参地上部分的活性成分5个,靶点175个;脂肪肝相关的疾病靶点1481个;构建关键作用靶点的PPI网络,其中包含节点84个,边513条;分子对接结果显示PTGS2、MAPK3、PPARG 3个核心靶点能够与活性成分结合并借助氢键等分子间作用力形成较为稳定的构象;GO富集分析主要涉及的生物学功能与过程有类固醇代谢过程、脂肪酸代谢过程、不饱和脂肪酸代谢过程、脂肪酸衍生物代谢过程等,KEGG通路富集分析显示珠子参地上部分通过PPAR信号通路、非酒精性脂肪肝通路、细胞色素P450对外源生物的代谢通路、脂肪消化吸收通路等来发挥防治脂肪肝的作用;免疫组化实验证明珠子参地上部分能够抑制小鼠肝脏组织中PTGS2蛋白的表达,增强MAPK3和PPARG蛋白的表达。结论本研究通过网络药理学,结合分子对接和免疫组化验证,发现珠子参地上部分可能通过多成分、多靶点、多途径协同发挥防治脂肪肝的作用,可为珠子参地上部分的应用提供新的理论基础。

陕产珠子参地上部分挥发油的GC-MS分析

目的:研究陕产珠子参地上部分的挥发油组成;方法:利用水蒸气蒸馏法提取陕产珠子参地上部分的挥发油,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析挥发油中的化学成分;结果:三个产地的珠子参地上部分挥发油中共鉴别化学成分20个。凤县产珠子参地上部分挥发油含量约为0.20%,鉴定11种成分,主要成分为植酮(30.92%)、1,1,7-trimethyl-4-methylenedecahydro-1H-cyclopropa[e]azulen-7-ol(19.59%)、α-芹子烯(15.82%)、5a-(hydroxymethyl)-5,7-dimethyl-2,3,4,5,5a,6,7,9a-octahydrospiro[2,5-methanobenzo[b]oxepine-10,2-oxiran]-3-ol(6.33%)、2-[(Z)-十八碳-9-烯氧基]乙醇(6.12%);眉县产珠子参地上部分挥发油含量约为0.22%,鉴定9种成分,主要成分为植酮(26.03%)、叶绿醇(19.50%)、α-芹子烯(13.57%)、1,1,7-trimethyl-4-methylenedecahydro-1H-cyclopropa[e]azulen-7-ol(11.51%)、natural verticillol(9.88%);太白县产珠子参地上部分挥发油含量约为0.20%,鉴定10种成分,主要成分为植酮(37.68%)、α-himachalene(26.56%)、T-杜松醇(8.29%)、1-hydroxy-1,2-dihydrolycopene(6.22%),1,1,7-trimethyl-4-methylenedecahydro-1H-cyclopropa[e]azulen-7-ol(4.90%)。其中:5-8,11-dihydroxy-10a,12a-dimethylhexadecahydro-1H-naphtho[1,2-h]chromen-1-yran-2-one(2.24%)、5a-(hydroxymethyl)-5,7-dimethyl-2,3,4,5,5a,6,7,9a-octahydrospiro[2,5-methanobenzo[b]oxepine-10,2-oxiran]-3-ol(6.33%)、β-愈创木烯(4.69%)、7,7,8,8-tetramethyloctahydro-2,3b-methanocyclopena[1,3]cyclopropa[1,2]benzene-4-ol(5.51%)、虾青素(2.35%)、2-[(Z)-十八碳-9-烯氧基]乙醇(6.12%)为凤县产珠子参的地上部分挥发油中的特有成分,natural verticillol(9.88%)、(2E,4E,6E,8E,10E)-8a-acetoxy-3a,6b-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)-1,1,5,7-tetramethyl-4-oxo-1,1a,1b,3a,4,6a,6b,7,8,8a-decahydrocyclopenta[a]cyclopropa[f]naphthalen-8-yl tetradeca-2,4,6,8,10-pentaenoate(3.09%)、叶绿醇(19.50%)为眉县产珠子参地上部分挥发油中的特有成分,石竹素(3.58%)、视黄醛(3.54%)、α-himachalene(26.56%)、T-杜松醇(8.29%)、3α-Aethyl-5α-androstanol-(3β)-on-(17)(1.32%)为太白县产珠子参地上部分挥发油中的特有成分。结论:陕产珠子参地上部分挥发油含量均较低,三个产地的挥发油种类存在差异,且各地挥发油中均含有其特有成分,本研究为珠子参地上部分进一步开发研究提供参考。